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correlation between peak 6 and analgesic effects),showing correlation relationship;the correlation of peaks 3,7 and 10 with
analgesic and anti-inflammatory effects were all greater than 0.8,which was highly related. Bivariate correlation analysis showed
that the correlation of peak 1,3,4,7,9,10,11 with analgesic and anti-inflammatory effects were all greater than 0.6,showing
correlation relationship. PLS method showed that peaks 1,3,4,7,9,10,11 contributed greatly to playing an analgesic and
anti-inflammatory role. CONCLUSIONS:HPLC fingerprints of different polar parts of C. muricatum is established and five
common peak components were identified. Neochlorogenic acid,isochlorogenic acid A,isochlorogenic acid C and chemical
components represented by peaks 1,4,7,9 may be the pharmacodynamic substances of C. muricatum to exert analgesic and
anti-inflammatory effects.
KEYWORDS Calonyction muricatum;Analgesic and anti-inflammatory;Fingerprint;Spectrum-effect relationship
华佗豆为旋花科植物丁香茄 Calonyction murica- 司;醋酸地塞米松片(批号 191030201,规格 0.75 mg)购
tum(Linn)G.Don.的种子,壮药名为跌打豆、丁香茄子, 自辰欣药业股份有限公司;罗通定片(批号200201,规格
始载于《救荒本草》,分布于广西、海南等地 ;其性寒、味 30 mg)购自四川迪菲特药业有限公司;甲醇、乙腈均为
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苦,具有镇痛、抗炎、抑菌及止血等药效,是一味具有广 色谱纯,其他试剂为分析纯,水为超纯水。
西民族特色的中药材,民间常用于治疗跌打损伤、小儿 1.3 动物
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肺炎 。研究表明,华佗豆中含生物碱、黄酮类、酚酸类 本研究所用动物为SPF级昆明种小鼠,体质量18~
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等化学成分 。经本课题组前期药理研究发现,华佗豆 22 g,购自湖南斯莱克景达实验动物有限公司,动物生产
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具有明显的镇痛抗炎作用 ,但哪些成分起到了主要的 许可证号为 SCXK(湘)2019-0004。小鼠饲养于广西中
药效作用尚不明确。谱效学的广泛应用,为中药的药效 医药大学实验动物中心,饲养期间均自由摄食、饮水。
物质研究提供了有利手段,通过数理统计模型对指纹图 实验过程遵守《广西中医药大学实验动物管理条例》。
谱和药效指标进行相关分析,可寻找潜在的药效物质基 所有小鼠均适应性喂养7 d后进行后续实验。
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础 。基于此,本研究采用高效液相色谱法(HPLC)建立 2 方法与结果
华佗豆不同极性部位的指纹图谱,并考察其镇痛抗炎作 2.1 华佗豆不同极性部位的制备
用;同时,采用灰色关联度分析、双关变量分析以及偏最 将华佗豆粉碎,过二号筛,称取其粉末 4 kg,加入 7
小二乘法(PLS)分析,研究华佗豆镇痛抗炎作用与指纹 倍量(按 L/kg 计)的 80%乙醇,回流提取 3 次,每次 2 h;
图谱共有峰之间的相关性,以期为进一步阐明华佗豆的 过滤,取滤液,经减压浓缩、水浴蒸干后,得总部位浸膏
药效物质基础提供参考。 (W1 )778.75 g。将总部位浸膏加入适量水溶解后,依次
1 材料 加入乙酸乙酯、正丁醇萃取 3 次,将各部位萃取液分别
1.1 主要仪器 合并,经减压浓缩、水浴蒸干后,得乙酸乙酯部位浸膏
本研究所用的 Waters 2695 型 HPLC 仪,包括 Waters (W2 )123.48 g、正丁醇部位浸膏(W3 )50 g、水部位浸膏
2998 检测器、Empower 色谱工作站,均购自美国 Waters (W4 )259.07 g,于4 ℃条件下保存。动物实验时,取不同
公司;H1650-W型医用离心机购自湘仪离心机仪器有限 极性部位浸膏适量,加入 2%聚山梨酯 80 制成混悬液,
公司;KQ5200B型超声清洗仪购自昆山超声仪器有限公 备用。
司;RE-52 型旋转蒸发仪购自上海亚荣生化仪器厂; 2.2 华佗豆不同极性部位的HPLC指纹图谱建立
XSR205DU 型十万分之一天平购自瑞士 Mettler Toledo 2.2.1 色谱条件 色谱柱为 Aigenlun Eclipse PLus C18
公司。 (250 mm×4.6 mm,4.0 μm);流动相为乙腈(A)-0.1%磷
1.2 主要药品与试剂 酸溶液(B),梯度洗脱(0~16 min,5%A→10%A;16~
华佗豆采自广西金秀县,经广西中医药大学药学院 25 min,10%A→12%A;25~32 min,12%A→15%A;
滕建北教授鉴定为旋花科植物丁香茄 C. muricatum 32~38 min,15%A→20%A;38~65 min,20%A→30%A;
(Linn)G. Don.的干燥种子;新绿原酸对照品( 批号 65~70 min,30%A→60%A;70~75 min,60%A→90%A;
RP190416,纯 度 ≥99.48%)、绿 原 酸 对 照 品(批 号 75~95 min,90%A);流速为 0.6 mL/min;柱温为 30 ℃;
RP190505,纯 度 ≥99.97%)、隐 绿 原 酸 对 照 品(批 号 检测波长为246 nm;进样量为10 μL。
RP200117,纯度≥99.71%)、异绿原酸 A 对照品(批号 2.2.2 供试品溶液的制备 取“2.1”项下华佗豆不同极
RP190517,纯度≥98.91%)、异绿原酸 C 对照品(批号 性部位浸膏适量,分别加入80%甲醇超声(功率200 W,
RP190609,纯度≥98%)均购自成都麦德生科技有限公 频率 40 kHz)溶解,定容,制成质量浓度均为 14 mg/mL
·2080 · China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 17 中国药房 2021年第32卷第17期