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correlation between peak 6 and analgesic effects),showing correlation relationship;the correlation of peaks 3,7 and 10 with
        analgesic and anti-inflammatory effects were all greater than 0.8,which was highly related. Bivariate correlation analysis showed
        that the correlation of peak 1,3,4,7,9,10,11 with analgesic and anti-inflammatory effects were all greater than 0.6,showing
        correlation relationship. PLS method showed that peaks 1,3,4,7,9,10,11 contributed greatly to playing an analgesic and
        anti-inflammatory role. CONCLUSIONS:HPLC fingerprints of different polar parts of C. muricatum is established and five
        common peak components were identified. Neochlorogenic acid,isochlorogenic acid A,isochlorogenic acid C and chemical
        components represented by peaks 1,4,7,9 may be the pharmacodynamic substances of C. muricatum to exert analgesic and
        anti-inflammatory effects.
        KEYWORDS     Calonyction muricatum;Analgesic and anti-inflammatory;Fingerprint;Spectrum-effect relationship


            华佗豆为旋花科植物丁香茄 Calonyction murica-                司;醋酸地塞米松片(批号 191030201,规格 0.75 mg)购
        tum(Linn)G.Don.的种子,壮药名为跌打豆、丁香茄子,                    自辰欣药业股份有限公司;罗通定片(批号200201,规格
        始载于《救荒本草》,分布于广西、海南等地 ;其性寒、味                         30 mg)购自四川迪菲特药业有限公司;甲醇、乙腈均为
                                             [1]
        苦,具有镇痛、抗炎、抑菌及止血等药效,是一味具有广                           色谱纯,其他试剂为分析纯,水为超纯水。
        西民族特色的中药材,民间常用于治疗跌打损伤、小儿                            1.3 动物
            [2]
        肺炎 。研究表明,华佗豆中含生物碱、黄酮类、酚酸类                               本研究所用动物为SPF级昆明种小鼠,体质量18~
                   [3]
        等化学成分 。经本课题组前期药理研究发现,华佗豆                            22 g,购自湖南斯莱克景达实验动物有限公司,动物生产
                               [4]
        具有明显的镇痛抗炎作用 ,但哪些成分起到了主要的                            许可证号为 SCXK(湘)2019-0004。小鼠饲养于广西中
        药效作用尚不明确。谱效学的广泛应用,为中药的药效                            医药大学实验动物中心,饲养期间均自由摄食、饮水。
        物质研究提供了有利手段,通过数理统计模型对指纹图                            实验过程遵守《广西中医药大学实验动物管理条例》。
        谱和药效指标进行相关分析,可寻找潜在的药效物质基                            所有小鼠均适应性喂养7 d后进行后续实验。
          [5]
        础 。基于此,本研究采用高效液相色谱法(HPLC)建立                         2 方法与结果
        华佗豆不同极性部位的指纹图谱,并考察其镇痛抗炎作                            2.1  华佗豆不同极性部位的制备
        用;同时,采用灰色关联度分析、双关变量分析以及偏最                               将华佗豆粉碎,过二号筛,称取其粉末 4 kg,加入 7
        小二乘法(PLS)分析,研究华佗豆镇痛抗炎作用与指纹                          倍量(按 L/kg 计)的 80%乙醇,回流提取 3 次,每次 2 h;
        图谱共有峰之间的相关性,以期为进一步阐明华佗豆的                            过滤,取滤液,经减压浓缩、水浴蒸干后,得总部位浸膏
        药效物质基础提供参考。                                        (W1 )778.75 g。将总部位浸膏加入适量水溶解后,依次
        1 材料                                                加入乙酸乙酯、正丁醇萃取 3 次,将各部位萃取液分别
        1.1  主要仪器                                           合并,经减压浓缩、水浴蒸干后,得乙酸乙酯部位浸膏
            本研究所用的 Waters 2695 型 HPLC 仪,包括 Waters          (W2 )123.48 g、正丁醇部位浸膏(W3 )50 g、水部位浸膏
        2998 检测器、Empower 色谱工作站,均购自美国 Waters                (W4 )259.07 g,于4 ℃条件下保存。动物实验时,取不同
        公司;H1650-W型医用离心机购自湘仪离心机仪器有限                         极性部位浸膏适量,加入 2%聚山梨酯 80 制成混悬液,
        公司;KQ5200B型超声清洗仪购自昆山超声仪器有限公                         备用。
        司;RE-52 型旋转蒸发仪购自上海亚荣生化仪器厂;                          2.2 华佗豆不同极性部位的HPLC指纹图谱建立
        XSR205DU 型十万分之一天平购自瑞士 Mettler Toledo                2.2.1  色谱条件      色谱柱为 Aigenlun Eclipse PLus C18
        公司。                                                (250 mm×4.6 mm,4.0 μm);流动相为乙腈(A)-0.1%磷
        1.2 主要药品与试剂                                         酸溶液(B),梯度洗脱(0~16 min,5%A→10%A;16~
            华佗豆采自广西金秀县,经广西中医药大学药学院                          25 min,10%A→12%A;25~32 min,12%A→15%A;
        滕建北教授鉴定为旋花科植物丁香茄 C. muricatum                       32~38 min,15%A→20%A;38~65 min,20%A→30%A;
        (Linn)G. Don.的干燥种子;新绿原酸对照品( 批号                      65~70 min,30%A→60%A;70~75 min,60%A→90%A;
        RP190416,纯 度 ≥99.48%)、绿 原 酸 对 照 品(批 号               75~95 min,90%A);流速为 0.6 mL/min;柱温为 30 ℃;
        RP190505,纯 度 ≥99.97%)、隐 绿 原 酸 对 照 品(批 号             检测波长为246 nm;进样量为10 μL。
        RP200117,纯度≥99.71%)、异绿原酸 A 对照品(批号                   2.2.2  供试品溶液的制备          取“2.1”项下华佗豆不同极
        RP190517,纯度≥98.91%)、异绿原酸 C 对照品(批号                   性部位浸膏适量,分别加入80%甲醇超声(功率200 W,
        RP190609,纯度≥98%)均购自成都麦德生科技有限公                       频率 40 kHz)溶解,定容,制成质量浓度均为 14 mg/mL


        ·2080 ·  China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 17                                 中国药房    2021年第32卷第17期
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