Page 66 - 《中国药房》2021年16期

的 QTOT均显著增加（P＜0.05）。由上述结果可知，添加 1.8
1.6
HPMC E3的ACV-Hex超饱和体系的超饱和状态能在一 1.4 ＊ DS为1的ACV-Hex超饱和体系
DS为4的ACV-Hex超饱和体系
定时间内得以维持，从而显著增加 ACV-Hex 的透皮递 nmol/cm 2 1.2 阿昔洛韦乳膏
1.0
送量。 药物贮留量 ， 0.8
2.7 ACV-Hex超饱和体系的皮肤分布实验 0.6
0.4
[14]
采用冷冻层切-分层定量法进行测定 。同“2.6”项 0.2 ＊ ＊ ＊ ＊ ＊ ＊
0
下超饱和体系透皮实验的浓度和操作方法，使用 DS 分 20 40 60 80 100 120 140 160 180 200
皮肤厚度，μm
别为 1、4 的添加了 HPMC E3 的 ACV-Hex 超饱和体系
注：与阿昔洛韦乳膏比较，P＜0.05
＊
（ACV-Hex 的剂量分别为 0.14 、0.56 μmol/cm ，见“2.6” Note：vs. aciclovir cream， P＜0.05
2
＊
项）进行被动透皮实验；同时，以上市药物阿昔洛韦乳膏 图 5 不同 DS 的 ACV-Hex 超饱和体系作用 1 h 后不同
2
（100 mg，相当于 ACV 剂量 11.10 μmol/cm）为阳性对照 厚度皮肤中药物贮留量的测定结果（x±±s，n＝3）
进行比较。1 h后结束实验。将与药物直接接触的皮肤 Fig 5 Deposited amount of drug in different depths of
圆片剪下，用水冲洗约1 min后，拭干皮肤表面水分。将 skin after application of ACV-Hex supersatura-
皮肤样品用 OCT 冰冻切片包埋剂固定于冷冻切片机样 ted systems with different DS for 1 h（x ±± s，
品托上，浸入用液氮冷却的异戊烷中快速冷冻，取出后， n＝3）
以平行于皮肤表面的方式横向切片，连续得到单片厚度
3 讨论
为20 μm的10个皮肤切片，依次保存，分别置于1 mL甲
促进ACV的透皮吸收，除了可以使用微乳、纳米粒
醇-水溶液（3∶2，V/V）中提取3 h，提取液以15 000 r/min离
等制剂方法外 [9，15] ，还可以将 ACV 制成水溶性的氨基酸
心 15 min，取上清液，用微孔滤膜（0.22 μm）滤过，收集
[8]
酯前体药物，并利用离子导入将其递送至皮肤 。超饱
续滤液，按“2.3.1”项下条件进样测定并分别计算续滤液
和体系的促渗机理在于提高了分子本身的热力学活度，
中ACV和ACV-Hex的浓度。规定在第1个皮肤切片（即
而非像促渗剂那样改变了皮肤角质层属性 ，因此其对
[16]
厚度介于 0～20 μm 的皮肤组织）中检测到的 ACV 和
皮肤的刺激性小；加之超饱和体系的构成和制备均较简
1-ACV 和 Q′
ACV-Hex 的量分别为 Q′ 1-ACV-Hex，在第 2 个皮肤
单，故在实际操作中可能会比纳米粒制剂及离子导入装
切片（即厚度介于 20～40 μm 的皮肤组织）中检测到的
置等更简便易行。虽然超饱和体系在透皮给药领域的
ACV和ACV-Hex的量分别为Q′ 2-ACV-Hex，以此类 运用已有多年，但一直未见将该技术用于促进 ACV 透
2-ACV和Q′
10-ACV和 Q′
推，直至 Q′ 10-ACV-Hex；规定第1个皮肤切片中药物 皮递送的研究报道。为此，本课题组进行了相关研究。
1-ACV+Q′
贮留量Q′＝Q′ 1-ACV-Hex，第2个皮肤切片中药物贮 由于HSV的主要复制部位为皮肤基底表皮层，因此
1
留量为 Q′ 2＝Q′ 2-ACV+Q′ 2-ACV-Hex，以此类推，直至 Q′ 10＝
只知道药物在整体皮肤中的浓度还不够，还需通过皮肤
2-ACV+……+
Q′ 10-ACV-Hex；规定 Q′ 1-ACV+Q′ 分布实验来确定药物在基底表皮层的浓度。药物在皮
10-ACV+Q′
TOT-ACV＝Q′
Q′ 10-ACV，Q′ TOT-ACV-Hex＝Q′ 1-ACV-Hex+Q′ 2-ACV-Hex+……+Q′ 10-ACV-Hex； 肤中的生物利用度可采用胶带粘提法（tape-stripping）和
规定 Q′ TOT＝Q′ TOT-ACV+Q′ TOT-ACV-Hex。实验重复 3 次。采用 微透析法（microdialysis）进行测定 [17－18] 。但前者只能研
Excel 2007进行统计分析，不同ACV-Hex饱和体系在相 究药物在角质层中的分布，而后者对透析装置的操作要
同厚度皮肤中的药物贮留量比较采用 Student’s t 检验， 求较为苛刻，且只能监测到药物在某个厚度皮肤组织中
P＜0.05表示差异具有统计学意义。结果见图5。 的吸收情况，无法反映药物在皮肤中分布的全貌。冷冻
由图 5 可知，使用阿昔洛韦乳膏后，尽管在皮肤浅 层切-分层定量法是将皮肤横切为数个切片，分别提取
表处发现了较高浓度的 ACV[Q′ 1-ACV 为（0.47±0.19） 各切片中的药物，然后通过定量测定提取液中的药物含
nmol/cm ]，但在其后各层皮肤中ACV的量迅速下降，至 量，进而得知不同厚度皮肤中所蓄积的药物量，是一种
2
第 5 层 以 后 ，已 无 法 再 检 出 ACV。 使 用 DS 为 1 的 行之有效的研究皮肤中药物分布的手段 。
[14]
ACV-Hex超饱和体系后，在第5层以后的各层皮肤中几 在本研究中，笔者首先基于饱和溶解度数据，明确
乎无法检出药物，且其Q′～Q′也都显著低于阿昔洛韦 了ACV-Hex是制备超饱和体系的最佳前体药物，并确定
1
4
乳膏（P＜0.05）。使用 DS 为 4 的 ACV-Hex 超饱和体系 了制备ACV-Hex超饱和体系的溶剂体系为10％丙二醇-
后，从皮肤厚度为 100 μm 开始（即从 Q′开始），以后的 水溶液。然后，通过加入一定量的抗成核高分子材料
5
每一层皮肤中检出的ACV和ACV-Hex量之和均显著高 HPMC E3，证实了其在短期内（1 h）可维持 DS 不超过 4
于阿昔洛韦乳膏在相同皮肤层中的 ACV 量（P＜0.05）。 的ACV-Hex超饱和体系的物理稳定性。接着，笔者又通
使用 DS 为 4 的 ACV-Hex 超饱和体系后，在皮肤基底表 过超高效液相色谱串联质谱法确定了进入皮肤的药物
皮层（厚度为 100～160 μm）中的递送量（即 Q′ 6+Q′ 7+ 量，证实了在 HPMC E3 的存在下，增加体系 DS 可以促
Q′ 8 ）为（0.40±0.12）nmol/cm ，其中 ACV（即 Q′ 5-ACV + 进 ACV-Hex 的皮肤吸收。最后，笔者通过冷冻层切-分
2
7-ACV+Q′ ）的量为（0.08±0.03）nmol/cm 。
Q′ 8-ACV 2 层定量法证实了DS为4的ACV-Hex超饱和体系能在不

·1980 · China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 16 中国药房 2021年第32卷第16期