Page 65 - 《中国药房》2021年16期
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mmol/L，DS 分别为 0.5、1、2、3、4 和 5。将制备得到的系              （DS＝1）、0.28（DS＝2）、0.42（DS＝3）和 0.56（DS＝4）
        列超饱和体系迅速密封，于32 ℃水浴中静置1 h，然后在                       μmol/cm 。1 h 后，从每个接收池中取样品溶液 1 mL。
                                                                   2
        显微镜下观察，若在视野中出现清晰的棱角分明的晶                            拆除扩散池，将皮肤样品用水冲洗约1 min后，将其剪成
        体，则视为该溶液不稳定。结果，当DS为0.5和1时，添                        小块（直径＜3 mm），然后置于甲醇-水溶液（3 ∶ 2，V/V）5
        加或不添加 HPMC E3 的 ACV-Hex 超饱和体系在制备 1                 mL 中，密封搅拌 3 h 以提取皮肤内部贮留的 ACV 和
        h 后均澄清、透明；当 DS≥2 且不添加 HPMC E3 时，                   ACV-Hex。将上述皮肤提取液和取自接收池的样品溶
        ACV-Hex 超饱和体系在制备 1 h 后均观察到有晶体出                     液分别以15 000 r/min离心15 min，取上清液，用微孔滤
        现 。 与 之 相 比 ，添 加 HPMC E3 且 DS≤4 的 所 有              膜（0.22 μm）滤过，收集续滤液，以流动相适当稀释后
        ACV-Hex超饱和体系在制备1 h后仍保持澄清、透明，表                      （稀释倍数根据预实验确定，以保证测定结果在线性范
        明添加HPMC E3可以显著提高ACV-Hex超饱和体系的                      围之内为标准），按“2.3.1”项下条件进样测定并计算
        物理稳定性，在 1 h 内可有效抑制该超饱和体系的成核                        ACV 和 ACV-Hex 的浓度，将结果乘以各自样品的稀释
        和结晶行为，从而得以维持体系内分子的热力学活度。                           倍数后，可得 ACV 和 ACV-Hex 在实际样品中的浓度。
        当 DS＝5 时，在刚刚混合后即出现了白色沉淀，表明即                        规定皮肤中ACV 的贮留量（QACV ）和皮肤中ACV-Hex的
        便添加 HPMC E3 也不能有效维持处在这个 DS 下溶液                     贮留量（QACV-Hex ）之和为皮肤贮留总量（QTOT ）。实验重复
        的物理稳定性。这提示，在DS≤4的ACV-Hex超饱和体                       6次。采用Excel 2007进行统计分析，具有相同DS的添
        系中，加入1％HPMC E3可以在一定时间内有效维持体                        加或不添加 HPMC E3 样品的皮肤贮留量比较采用 Stu-
        系的物理稳定性，抑制 ACV-Hex 的快速沉淀。DS 为 4                    dent’s t检验，具有不同DS的添加或不添加HPMC E3样
        的 ACV-Hex 超饱和体系物理稳定性观察的显微图见                        品的皮肤贮留量比较采用单因素方差分析，P＜0.05 为
        图4。                                                差异具有统计学意义。结果见表1。
                                                           表 1   不同 DS 的添加或不添加 HPMC E3 的 ACV-Hex
                                                                 超饱和体系作用1 h后皮肤中QACV、QACV-Hex和QTOT
                                                                                             2
                                                                 的测定结果（x±±s，n＝6，nmol/cm）
                                                           Tab 1 Determination results of QACV，QACV-Hex and QTOT
                                                                  after the application of ACV-Hex supersatura-
                                                                  ted systems with different DS and with or with-
                                                                  out HPMC E3 for 1 h（x±±s，n＝6，nmol/cm）
                                                                                                       2
         A.添加HPMC E3的ACV-Hex超饱和  B.未添加HPMC E3的ACV-Hex超饱和
                  体系                      体系                DS        不添加HPMC E3             添加HPMC E3
        图 4  DS 为 4 的 ACV-Hex 超饱和体系物理稳定性观察                        QACV   QACV-Hex  QTOT  QACV   QACV-Hex  QTOT
                                                            0.5  0.02±0.01  0.09±0.03  0.12±0.03  0.01±0.00  0.17±0.09  0.18±0.09
             的显微图（×10）
                                                            1   0.03±0.01  0.24±0.05  0.27±0.06  0.13±0.02  0.18±0.08  0.27±0.12
        Fig 4  Micrographs of physical stability observation of  2  0.07±0.02  0.25±0.04  0.30±0.03  0.03±0.01  0.26±0.15  0.30±0.18
              ACV-Hex supersaturated system with DS of 4    3   0.06±0.02  0.35±0.14  0.41±0.14  0.31±0.19 ＊  2.14±0.71 ＊  2.55±0.64 ＊
             （×10）                                          4   0.05±0.02  0.59±0.25  0.64±0.25  0.20±0.07 ＊  4.77±1.52 ＊  4.90±1.58 ＊
                                                                                                  ＊
                                                               注：与具有相同DS但不添加HPMC E3的样品比较，P＜0.05
        2.6  ACV-Hex超饱和体系的被动透皮实验                               Note：vs. sample with same DS but without HPMC E3， P＜0.05
                                                                                                   ＊
            使用新鲜猪皮和立式 Franz 扩散池进行透皮实验。                         由表1可知，所有ACV-Hex超饱和体系进行被动透
        用手术刀将新鲜猪耳外侧皮肤剥离，于－20 ℃冰箱中冷                         皮 1 h 后，接收池中均未检测到 ACV-Hex 或原型药物
        冻保存（保存时间不超过1个月），备用。实验前，将猪皮                         ACV，而 在 皮 肤 提 取 液 样 品 中 均 检 测 到 了 ACV 和
        置于 0.9％氯化钠溶液中解冻约 10 min，以滤纸吸去多                     ACV-Hex。在不添加 HPMC E3 的情况下，当 DS 为 0.5
        余水分，然后剃除猪毛，剪成直径约 3 cm的圆形皮肤样                        时，QTOT为（0.12±0.03）nmol/cm ；当 DS 为 1 时，QTOT增
                                                                                       2
                                                                                  2
        本，再用真皮刀削去脂肪及部分真皮组织，最终得厚度                           加至（0.27±0.06）nmol/cm ；当DS为2、3、4时，QTOT分别
        约为1 mm的皮肤样本。将处理好的皮肤样本紧密固定                          为（0.30±0.03）、（0.41±0.14）、（0.64±0.25）nmol/cm ，
                                                                                                          2
        在给药池和接收池之间，接收池中加入磷酸盐缓冲液                            组间比较差异均无统计学意义（P＞0.05）。该结果表
       （pH 7.4）10 mL，恒速（200 r/min）搅拌；接收池外水浴温               明 ，由 于 HPMC E3 的 缺 失 ，导 致 超 饱 和 体 系 中 的
        度保持在32 ℃。给药池中加入0.9％氯化钠溶液1 mL，                      ACV-Hex 有结晶趋势，无法维持体系的高热力学活度，
        平衡 20 min 后移除，用水洗涤 2 次。按照“2.5.2（2）”项               从而无法促进药物经皮吸收。在添加HPMC E3的情况
        下方法分别制备添加或不添加 HPMC E3 的 DS 为 0.5～                  下，DS 为 0.5、1、2 时，ACV-Hex 超饱和体系的 QTOT分别
        4的ACV-Hex超饱和体系，并立即取各溶液0.5 mL分别                     为（0.18±0.09）、（0.27±0.12）、（0.30±0.18）nmol/cm ；
                                                                                                          2
        加至给药池中，迅速用封口膜密封给药池并开始计时。                           而当DS增至3和4时，QTOT分别为（2.55±0.64）、（4.90±
                                                                       2
        此时，在给药池中的药物量分别为 0.07（DS＝0.5）、0.14                  1.58）nmol/cm ，相比于同一DS下不添加HPMC E3样品

        中国药房    2021年第32卷第16期                                            China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 16  ·1979 ·
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