Page 42 - 《中国药房》2021年16期

芩连润肺汤的HPLC指纹图谱建立、含量测定及多元统计分析 Δ

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闫凯莉 ，尹程程 ，刘梦瑶 ，崔长升 ，汪 莹 ，孙晓舟 ，孙丽平 ，齐 滨 ，刘 莉 （1.长春中医药大学药学院，
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长春 130117；2.长春中医药大学吉林省人参科学研究院，长春 130117；3.长春中医药大学附属医院儿童诊疗
中心，长春 130117）
中图分类号 R284.1 文献标志码 A 文章编号 1001-0408（2021）16-1956-08
DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2021.16.07
摘 要 目的：建立芩连润肺汤的指纹图谱，测定其中11种成分的含量，并进行聚类分析、正交偏最小二乘判别法（OPLS -DA）分
析。方法：采用高效液相色谱法（HPLC）。色谱柱为ZORBAX Eclipse Plus C18，流动相为乙腈-0.05％磷酸溶液（梯度洗脱），检测波
长为 260 nm，柱温为 30 ℃，流速为 1.0 mL/min，进样量为 10 μL。以汉黄芩苷为参照，采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统
（2012版）》绘制10批芩连润肺汤的HPLC指纹图谱并进行相似度评价，确定共有峰；同法测定芩连润肺汤中11种成分的含量；采
用SPSS 21.0软件进行聚类分析，采用SIMCA 14.0软件进行有监督模式的OPLS-DA分析，并筛选影响其质量的标志物。结果：10
批芩连润肺汤共有21个共有峰，与对照指纹图谱的相似度均大于0.98；共指认了11个共有峰，分别为芦丁、连翘酯苷A、连翘酯苷
B、鸢尾苷、野鸢尾苷、黄芩苷、连翘苷、汉黄芩苷、黄芩素、次野鸢尾黄素、汉黄芩素。上述11种成分检测进样量的线性范围分别为
9.960 0～49.800 0、1.974 0～9.870 0、0.672 0～3.360 0、0.960 0～4.800 0、0.549 0～2.745 0、5.040 0～25.200 0、1.374 0～6.870 0、
0.615 0～3.075 0、0.759 9～3.795 0、0.162 0～0.810 0、0.042 0～0.210 0 μg（r 均大于 0.999）；精密度、稳定性（48 h）、重复性试验的
RSD 均小于 2％；平均加样回收率为 95.81％～100.29％（RSD 为 0.43％～1.73％，n＝6）；含量分别为 8.924 4～12.820 8、0.352 2～
0.868 7、0.435 6～0.711 2、0.389 8～1.309 0、0.335 8～0.530 1、1.680 5～4.542 3、0.701 8～1.584 2、2.240 2～5.442 5、2.351 0～5.558 9、
0.106 0～0.182 2、0.076 8～0.128 9 mg/g。聚类分析结果显示，当类间距为10时，10批样品可聚为两类，S1～S3聚为一类、S4～S10
聚为一类；当类间距为5时，第2类又可聚为两类，S6、S7、S9聚为一类，S4、S5、S8、S10聚为一类。OPLS-DA分析结果显示，S6、S7、
S9位于得分图的上方，S4、S5、S8、S10位于得分图的左下侧，S1～S3位于得分图的右下侧，与聚类分析结果一致；黄芩苷、鸢尾苷、
连翘酯苷A、黄芩素、汉黄芩苷的变量重要性投影值均大于1。结论：所建指纹图谱、含量测定方法的精密度较高、稳定性较好，结
合多元统计分析 可用于芩连润肺汤的质量控制。黄芩苷等5种成分为影响芩连润肺汤的质量标志物。
关键词 芩连润肺汤；高效液相色谱法；指纹图谱；含量测定；聚类分析；正交偏最小二乘判别法

HPLC Fingerprint Establishment，Content Determination and Multivariate Statistical Analysis of Qinlian
Runfei Decoction
YAN Kaili ，YIN Chengcheng ，LIU Mengyao ，CUI Changsheng ，WANG Ying ，SUN Xiaozhou ，SUN Liping ，
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QI Bin ，LIU Li（1. School of Pharmacy，Changchun University of TCM，Changchun 130117，China；2. Jilin
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Ginseng Academy，Changchun University of TCM，Changchun 130117，China；3. Children’s Diagnosis and
Treatment Center，the Affiliated Hospital of Changchun University of TCM，Changchun 130117，China）
ABSTRACT OBJECTIVE：To establish the fingerprint of Qinlian runfei decoction，determine the contents of 11 components，
and conduct cluster analysis and orthogonal partial least squares discriminant analysis（OPLS-DA）. METHODS：HPLC method
was used. The determination was performed on ZORBAX Eclipse Plus C18 column with mobile phase consisted of acetonitrile-
0.05％ phosphoric acid solution（gradient elution）at the flow rate of 1.0 mL/min. The detection wavelength was set at 260 nm，
and column temperature was 30 ℃. The sample size was 10 μL. Using wogonoside as reference，HPLC fingerprints of 10 batches
of Qinlian runfei decoction were drawn and the similarity evaluation was conducted with Similarity Evaluation System of TCM
Chromatographic Fingerprint（2012 edition），the common peaks were also confirmed；the contents of 11 components in Qinlian
runfei decoction were determined by the same method. SPSS 21.0 software was used for cluster analysis，and SIMCA 14.0 software
was used for OPLS-DA to screen marker components affecting
Δ 基金项目：国家重点研发计划项目（No.2017YFC1702100）；吉
quality. RESULTS： There were 21 common peaks in 10
林省科技发展计划项目（No.20190101010JH）；长春中医药大学科学研
batches of Qinlian runfei decoction，and the similarity with
究发展基金项目
control fingerprint was greater than 0.98. A total of 11
＊ 硕 士 研 究 生 。 研 究 方 向 ：中 药 活 性 物 质 分 析 。 E-mail：
1922853205@qq.com common peaks were identified， which were rutin，
# 通信作者：副教授，硕士生导师，博士。研究方向：中药饮片质 forsythiaside A， forsythiaside B， iris， irigenin， baicalin，
量标准。E-mail：68734263@qq.com forsythiaside， wogonoside， baicalein， irisflorentin and

·1956 · China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 16 中国药房 2021年第32卷第16期