Page 45 - 《中国药房》2021年16期

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8 下方法分别制备各阴性对照溶液。
2 600 7 6 10 14 15
2 400 3 5 9 11 12 16 17 19 2.2.5 系统适用性试验 取上述混合对照品溶液、供试
2 200 1 2 4 18 20 21
2 000 品溶液、阴性对照溶液适量，按“2.2.1”项下色谱条件进
1 800
1 600
mV 1 400 样测定，记录色谱图。结果，各成分分离度均大于 1.5，
U， 1 200 理论板数均不低于10 000，阴性对照溶液对各成分的测
1 000
800
600 定均无干扰，详见图3。
400
200 2.2.6 线性关系考察 精密吸取“2.2.2”项下混合对照
0
溶液 3、5、7、10、12、15 μL，按“2.2.1”项下色谱条件进样
0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 70 75 80 85 90 95
t，min 测定，记录峰面积。以各待测成分的进样量（X，μg）为横
图1 10批芩连润肺汤的HPLC叠加指纹图谱
坐标、峰面积（Y）为纵坐标进行线性回归，结果见表5。
Fig 1 HPLC superimposed fingerprint of 10 batches
2.2.7 精密度试验 取“2.2.2”项下混合对照品溶液，按
of Qinlian runfei decoction
“2.2.1”项下色谱条件连续进样测定 6 次，记录峰面积。
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340
320 结果，11 种成分峰面积的 RSD 分别为 1.07％、0.38％、
300
280 0.27％、0.43％、1.55％、0.19％、0.33％、0.88％、0.39％、
260
240
220 0.62％、0.52％（n＝6），表明仪器精密度良好。
200
mV 180 2.2.8 重复性试验 取同一批芩连润肺汤样品（编号
U， 160 6 7 17
140
120 5 8 S1）1 g，共 6 份，按“2.2.3”项下方法制备供试品溶液，再
100
80 9 12 15 19
60 11 16 按“2.2.1”项下色谱条件进样测定，记录峰面积并按标准
40 2 3 4 14
20 1 10 18 20 21
0 曲线法计算含量。结果，11 种成分含量的 RSD 分别为
0 4 8 12 16 20 24 28 32 36 40 44 48 52 56 60 64 68 72 76 80 84 88 92 1.26％、1.08％、1.32％、1.51％、1.30％、1.24％、1.31％、
t，min
图2 芩连润肺汤的HPLC对照指纹图谱 1.42％、1.30％、1.33％、1.45％（n＝ 6），表明方法重复性
Fig 2 HPLC control fingerprint of Qinlian runfei de- 良好。
coction 2.2.9 稳定性试验 取“2.2.3”项下供试品溶液（编号
15）、汉黄芩苷（峰17）、黄芩素（峰19）、次野鸢尾黄素（峰 S1），分别于室温下放置 0、2、8、12、18、24、48 h 时按
20）、汉黄芩素（21峰）。由于黄芩为方中君药，其所含成 “2.2.1”项下色谱条件进样测定，记录峰面积。结果，11
分汉黄芩苷（峰 17）的分离度较好、出峰时间稳定，峰面 种成分峰面积的 RSD 分别为 1.32％、1.25％、1.28％、
积适中，对照品易得，故以汉黄芩苷为参照（S）计算各共 1.47％、1.01％、1.22％、1.05％、1.29％、1.15％、1.24％、
有峰的相对保留时间和相对峰面积，结果见表3、表4。 1.20％（n＝7），表明供试品溶液在室温下放置 48 h 内稳
表2 10批芩连润肺汤的相似度评价结果 定性良好。
Tab 2 Similarity evaluation results of 10 batches of 2.2.10 加样回收率试验 取已知含量的芩连润肺汤样
Qinlian runfei decoction 品（编号 S1），每份约 0.5 g，共 6 份，精密称定，分别加入
编号 S1 S2 S3 S4 S5 S6 S7 S8 S9 S10 R 适量的“2.2.2”项下混合对照品溶液，按“2.2.3”项下方法
S1 1.000 0.990 0.976 0.986 1.000 0.990 0.976 0.986 0.990 0.986 0.995 制备供试品溶液，再按“2.2.1”项下色谱条件进样测定，
S2 0.990 1.000 0.968 0.992 0.990 1.000 0.968 0.992 1.000 0.992 0.994
S3 0.976 0.968 1.000 0.974 0.976 0.968 1.000 0.974 0.968 0.974 0.988 记录峰面积并计算加样回收率，结果见表6。
S4 0.986 0.992 0.974 1.000 0.986 0.992 0.974 1.000 0.992 1.000 0.995 2.2.11 样品含量测定 取 10 批芩连润肺汤样品，按
S5 1.000 0.990 0.976 0.986 1.000 0.990 0.976 0.986 0.990 0.986 0.995 “2.2.3”项下方法制备供试品溶液，再按“2.2.1”项下色谱
S6 0.990 1.000 0.968 0.992 0.990 1.000 0.968 0.992 1.000 0.992 0.994
S7 0.976 0.968 1.000 0.974 0.976 0.968 1.000 0.974 0.968 0.974 0.988 条件进样测定，记录峰面积并按标准曲线法计算样品中
S8 0.986 0.992 0.974 1.000 0.986 0.992 0.974 1.000 0.992 1.000 0.995 11 种成分的含量。每样品平行测定 3 次，取平均值，结
S9 0.990 1.000 0.968 0.992 0.990 1.000 0.968 0.992 1.000 0.992 0.994 果见表7。
S10 0.986 0.992 0.974 1.000 0.986 0.992 0.974 1.000 0.992 1.000 0.995
R 0.995 0.994 0.988 0.995 0.995 0.994 0.988 0.995 0.994 0.995 1.000 2.3 聚类分析
2.2 芩连润肺汤中11种活性成分的含量测定 聚 类 分 析 是 目 前 常 用 的 数 据 挖 掘 分 析 方 法 之
[17]
2.2.1 色谱条件 同“2.1.1”项。 一 。以 10 批芩连润肺汤中 11 种成分的峰面积为变
2.2.2 混合对照品溶液的制备 同“2.1.2”项。 量，借助SPSS 21.0统计软件，采用离差平方和法以欧式
2.2.3 供试品溶液的制备 同“2.1.3”项。 距离为区间进行聚类分析，结果见图4。由图4可见，当
2.2.4 阴性对照溶液的制备 按芩连润肺汤处方比例， 类间距为 10 时，10 批样品可聚为两类，S1～S3 聚为一
分别制备缺黄芩、连翘、射干的阴性样品，再按“2.2.3”项 类、S4～S10聚为一类；当类间距为5时，第2类又可聚为

中国药房 2021年第32卷第16期 China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 16 ·1959 ·