Page 19 - 2021年15期

·药学研究·

杨桃根活性成分对高糖诱导H9c2心肌细胞损伤的改善作用及机制 Δ

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高雨桐 ，吴娅妮 ，陈 铭 ，张晓琳 ，韦秀莎 ，韦晓洁 ，黄仁彬 （1.广西医科大学药学院，南宁 530021；2.广
西中医药大学基础医学院，南宁 530299）
中图分类号 R965 文献标志码 A 文章编号 1001-0408（2021）15-1805-06
DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2021.15.03
摘 要 目的：研究杨桃根活性成分2-十二烷基-6-甲氧基-2，5-二烯-1，4-环己二酮（DMDD）对高糖诱导H9c2 心肌细胞损伤的改
善作用及机制。方法：将H9c2 心肌细胞分为正常组、高糖组、渗透压对照组和DMDD高、中、低浓度组（8、4、2 μmol/L）。正常组和
高糖组细胞分别加入低糖（含5.5 mmol/L葡萄糖，下同）、高糖DMEM培养基（含33.3 mmol/L葡萄糖，下同）培养48 h；渗透压对照
组细胞加入含27.5 mmol/L甘露醇的低糖DMEM培养基培养48 h；DMDD各浓度组细胞先加入高糖DMEM培养基培养24 h，再
加入含相应浓度DMDD的高糖DMEM培养基继续培养24 h。各组细胞培养结束后，采用MTT法检测细胞存活率；采用相应试剂
盒检测细胞上清液中活性氧簇（ROS）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、乳酸脱氢酶（LDH）的活性；采用酶联免疫吸附法（ELISA）检
测细胞上清液中肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素6（IL-6）的水平；采用吖啶橙/溴化乙锭（AO/EB）染色法检测细胞凋亡情况；
采用Western blot法检测细胞中凋亡相关蛋白[活化的胱天蛋白酶3（cleaved caspase-3）、B细胞淋巴瘤2（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白
（Bax）]的表达水平以及核因子κB（NF-κB）/NF-κB抑制蛋白α（IκBα）信号通路相关蛋白（NF-κB p65、IκBα）的磷酸化水平。结果：
与正常组比较，高糖组细胞存活率、GSH-Px活性、Bcl-2蛋白表达水平均显著降低（P＜0.01）；ROS、LDH活性，TNF-α、IL-6水平，
Bax、cleaved caspase-3蛋白表达水平和NF-κB p65、IκBα蛋白磷酸化水平均显著升高（P＜0.01）；细胞呈橙黄色荧光，且形态模糊
的细胞明显增多，表现出明显的凋亡状态。渗透压对照组细胞上述指标与正常组比较差异无统计学意义。与高糖组比较，DMDD
各浓度组细胞上述指标活性或水平（低浓度组细胞存活率、LDH活性除外）均显著逆转（P＜0.05或P＜0.01）；细胞中橙黄色荧光
明显减少，细胞形态较完整。结论：DMDD 可改善高糖诱导的 H9c2 心肌细胞损伤；其作用机制可能与抑制氧化应激和炎症反
应、调控凋亡相关蛋白和NF-κB/IκBα通路相关蛋白的表达有关。
关键词 2-十二烷基-6-甲氧基-2，5-二烯-1，4-环己二酮；糖尿病心肌病；H9c2心肌细胞；凋亡；NF-κB/IκBα信号通路

Improvement Effect and Its Mechanism of Active Components of Averrhoa carambola on High Glucose-

induced Injury of H9c2 Myocardial Cell
GAO Yutong ，WU Yani ，CHEN Ming ，ZHANG Xiaolin ，WEI Xiusha ，WEI Xiaojie ，HUANG Renbin（1.
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School of Pharmacy，Guangxi Medical University，Nanning 530021，China；2.College of Basic Medicine，
Guangxi University of Chinese Medicine，Nanning 530299，China）
ABSTRACT OBJECTIVE：To study the improvement effects of 2-dodecyl-6-methoxycyclohexa-2，5-diene-1，4-dione（DMDD）
from Averrhoa carambola on H9c2 myocardial cell injury induced by high glucose and its mechanism. METHODS：H9c2
myocardial cells were divided into normal group，high glucose group，osmotic pressure control group，DMDD high，medium and
low concentration groups（8，4，2 μmol/L）. Normal group and high glucose group were treated with low glucose DMEM medium
（containing 5.5 mmol/L glucose，similarly hereinafter） and high glucose DMEM medium （containing 33.3 mmol/L glucose，
similarly hereinafter） for 48 h，respectively. The cells in osmotic pressure control group were cultured in low glucose DMEM
medium containing 27.5 mmol/L mannitol for 48 h. In DMDD groups，cells were cultured in high glucose DMEM medium for 24
h， and then in high glucose DMEM medium containing
Δ 基金项目：国家自然科学基金资助项目（No.82004186）；广西自 corresponding concentration of DMDD for 24 h. At the end of
然科学基金资助项目（No.2018JJA140966，No.2020JJA140237）
cell culture，MTT method was used to detect the cell survival
＊硕士研究生。研究方向：抗糖尿病药、心血管病药。电话：
rate. The activities of ROS， GSH-Px and LDH in cell
0771-5339805。E-mail：591090229@qq.com
# 通信作者：教授，博士生导师。研究方向：抗糖尿病药、肝病和 supernatant were detected by using related kits. ELISA assay
老年痴呆药。电话：0771-5339805。E-mail：huangrenbin518@163.com was used to detect the levels of TNF-α and IL-6 in cell

中国药房 2021年第32卷第15期 China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 15 ·1805 ·