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或 P＜0.01），Bax、cleaved caspase-3 蛋 白 表 达 水 平 和 表4 各组细胞中凋亡相关蛋白表达水平和NF-κB/IκBα
NF-κB p65、IκBα蛋白磷酸化水平均显著降低（P＜0.05 通路相关蛋白磷酸化水平的测定结果（x±±s，
或P＜0.01），详见图2、图3、表4。 n＝3）
Tab 4 Protein expression of apoptosis related proteins
Bax 21 kDa
and phosphorylation level of NF-κB/IκBα path-
way related proteins in cells of each group（x±±
Bcl-2 26 kDa
s，n＝3）

cleaved caspase-3 17/19 kDa 组别 Bax/GAPDH Bcl-2/GAPDH cleaved caspase-3/ NF-κB p65/ p-IκBα/
GAPDH p-NF-κB p65 IκBα
正常组 1.10±0.24 1.31±0.25 1.56±0.12 0.30±0.07 0.38±0.06
GAPDH 36 kDa 高糖组 3.28±0.24 ＊＊ 0.63±0.06 ＊＊ 2.30±0.28 ＊＊ 1.48±0.24 ＊＊ 1.36±0.20 ＊＊
渗透压对照组 1.25±0.26 1.14±0.44 1.62±0.16 0.33±0.01 0.36±0.02
正常组 高糖组 渗透压 DMDD DMDD DMDD
对照组 高剂量组 中剂量组 低剂量组 DMDD高浓度组 1.70±0.25 ## 1.07±0.26 ## 1.85±0.09 ## 0.40±0.04 ## 0.56±0.16 ##
图 2 DMDD 对高糖诱导的 H9c2 心肌细胞中凋亡相关 DMDD中浓度组 1.88±0.37 ## 0.92±0.23 ## 1.93±0.16 ## 0.51±0.06 ## 0.65±0.20 ##
DMDD低浓度组 2.20±0.55 ## 0.74±0.13 # 1.94±0.26 # 0.69±0.03 ## 0.78±0.17 #
蛋白表达影响的电泳图
#
注：与正常组比较， P＜0.01；与高糖组比较，P＜0.05，P＜0.01
##
＊＊
Fig 2 Electrophoretogram of the effects of DMDD on
＊ ＊
#
Note：vs. normal group， P＜0.01；vs. high glucose group，P＜
the expression of apoptosis related proteins in
##
0.05，P＜0.01
H9c2 myocardial cells
GSH-Px 的活性。这表明 DMDD 对高糖诱导的 H9c2 心
肌细胞损伤的改善作用，可能与抑制氧化应激反应有关。
p-NF-κB p65 65 kDa
相关研究发现，促炎因子IL-6和TNF-α在糖尿病心
NF-κB p65 65 kDa [8，14]
肌病的发病机制中也具有重要的作用 。当糖尿病患
者体内TNF-α水平升高时，可损害其胰岛素信号传导功
p-IκBα 40 kDa
能和心肌功能；当 TNF-α水平降低时，可减轻心肌炎症
[14]
IκBα 36 kDa 和心肌纤维化程度，进而改善心功能 。另有研究发
现，当糖尿病模型小鼠体内 IL-6 水平降低时，其心功能
GAPDH 36 kDa
[15]
改善、间质纤维化减轻 。本研究发现，DMDD 可降低
正常组 高糖组 渗透压 DMDD DMDD DMDD
对照组 高剂量组 中剂量组 低剂量组
高糖诱导的 H9c2 心肌细胞上清液中 IL-6、TNF-α水平。
图 3 DMDD 对高糖诱导的 H9c2 心肌细胞中 NF-κB/ 这表明DMDD对高糖诱导的H9c2心肌细胞损伤的改善
IκBα信号通路相关蛋白表达影响的电泳图
作用，可能与抑制炎症因子表达有关。
Fig 3 Electrophoretogram of the effects of DMDD on
促凋亡因子 caspase-3 在细胞凋亡途径中发挥着至
the expression of NF-κB/IκBα signaling path-
关重要的作用：当细胞凋亡发生时，凋亡信号通过级联
way related proteins in H9c2 myocardial cells
反应汇聚于 caspase-3 酶原，然后使该酶原发生裂解、活
4 讨论 化，从而获得凋亡执行能力 。另外，凋亡的发生也与
[16]
氧化应激和炎症反应均是糖尿病心肌病产生、恶化 Bcl-2蛋白家族密切相关，其中Bcl-2、Bax之间的动态平
的关键因素；氧化应激是由于ROS的过度生成和（或）清 衡是界定细胞凋亡发生的重要指标 [17－18] 。本研究发现，
除减少，导致机体内的 ROS 相对过剩；当糖尿病患者体 DMDD 可升高高糖诱导的 H9c2 心肌细胞中 cleaved
内的 ROS 长期过量时，会诱发 DNA、蛋白质、脂质等生 caspase-3、Bax 蛋白的表达水平，降低 Bcl-2 蛋白的表达
物大分子损伤，进而引起心脏炎症、心肌肥厚及心血管 水平。这表明DMDD对高糖诱导的H9c2心肌细胞损伤
功能的病变，从而诱导糖尿病心肌病的发生 [10－11] 。有研 的改善作用，可能与调控凋亡相关蛋白的表达有关。
究表明，ROS 活性的升高在高糖诱导的 H9c2 心肌细胞 NF-κB 是一种核转录因子，当机体发生应激、炎症
的凋亡过程中具有重要作用 。GSH-Px 是机体的清除 时均可将其激活；IκB蛋白家族是NF-κB的抑制蛋白，当
[12]
剂，能特异性地清除过氧自由基、超氧阴离子等，从而减 细胞处于静息状态时，细胞质中 NF-κB 的 p65 亚基或
[13]
轻ROS造成的损伤 。LDH主要存在于细胞内，当细胞 p50 亚基会与 IκB 结合，从而在细胞质中形成多聚体复
受损时，LDH 会泄漏至细胞外，故可作为反映细胞损伤 合物，使NF-κB蛋白活性受到抑制；当细胞受到刺激时，
[7]
程度的指标 。本研究发现，DMDD 可显著降低高糖诱 IκBα被蛋白酶降解，使得NF-κB与IκB形成的多聚体逐
导的 H9c2 心肌细胞上清液中 ROS、LDH 的活性，升高 渐解离，最终激活NF-κB信号通路 [9，19] 。本研究发现，与

中国药房 2021年第32卷第15期 China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 15 ·1809 ·