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表1 LGT-6的精密度与准确度试验结果（％％） 离药物浓度）。结果，平衡48 h时，LGT-6的血浆蛋白结
Tab 1 Results of precision and accuracy tests of 合率与72 h时比较无明显差异，说明48 h时透析已经达
LGT-6（％％） 到平衡状态，因此将平衡时间定为48 h，详见表6。
种属 理论浓度，nmol/L 日内RSD（n＝6） 日间RSD（n＝5） 准确度（n＝6） 表 6 不同平衡时间对 LGT-6 血浆蛋白结合率的影响
大鼠 1 3.58 8.21 90.46
3 2.59 9.03 92.05 （x±±s，n＝3，％％）
50 3.21 7.50 101.82 Tab 6 Effects of different equilibration time on pro-
720 4.05 7.36 105.77 tein binding rate of different concentration of
猴 1 2.69 7.84 91.63
3 2.74 4.27 91.26 LGT-6（x±±s，n＝3，％％）
50 5.46 6.09 96.83 LGT-6浓度，nmol/L 6 h 12 h 24 h 48 h 72 h
720 3.98 8.13 102.34 3 81.04±2.38 88.60±4.65 93.07±1.20 96.25±0.97 96.32±2.45
人 1 4.01 5.99 93.00 30 69.24±1.95 76.85±2.04 81.36±3.76 84.16±1.24 83.81±1.72
3 3.56 4.04 94.55
300 63.16±1.54 71.03±3.11 75.58±2.63 78.25±0.61 78.54±2.74
50 6.88 5.71 103.71 3 000 51.53±1.39 58.98±2.60 63.04±1.44 66.63±0.95 66.82±3.06
720 4.50 6.72 98.59
2.6.3 药物血浆蛋白结合率的测定 将处理后的透析
表2 LGT-6的基质效应试验结果（x±±s，n＝6，％％）
Tab 2 Results of matrix effect tests of LGT-6（x±±s， 袋一端结扎，朝袋中精密加入空白血浆1 mL，固定透析
n＝6，％％） 袋的另一端，使透析袋保持垂直且内有一定的空气，再
种属 3 nmol/L 50 nmol/L 720 nmol/L 将透析袋悬浮于装有PBS（其中LGT-6的浓度分别为3、
大鼠 94.64±2.31 96.12±8.14 90.01±4.34 30、300、3 000 nmol/L）10 mL 的平底玻璃管中，调节透
猴 103.85±5.33 93.49±4.38 96.75±5.71
人 94.54±6.35 97.07±3.95 95.09±3.22 析袋内、外液面，使两者保持在同一平面上，并且确保透
表3 LGT-6的稳定性试验结果（n＝6，％％） 析袋不接触管壁，最后将管口密封，在 4 ℃下平衡静置
Tab 3 Results of stability tests of LGT-6（n＝6，％％） 48 h。在透析结束后，精密量取透析内液和透析外液（先
RSD 用10％的高氯酸溶液检测是否有蛋白外漏，有外漏的样
种属 理论浓度，nmol/L
4 ℃冷藏12 h 室温静置12 h 反复冻融3次 品舍弃）各 100 μL，按“2.4”项下方法处理后，再按“2.1”
大鼠 3 5.32 4.78 4.12
50 3.18 5.00 3.27 项下条件进样测定5次，记录峰面积，代入回归方程计算
720 4.01 5.66 6.70 其中 LGT-6 浓度。同时，考虑到 LGT-6 浓度为 3 000
猴 3 4.26 4.09 4.98 nmol/L 的样品浓度超出方法学线性浓度范围，取 3 000
50 3.05 4.8 5.92
720 5.02 4.91 6.53 nmol/L 的样品时，先用空白血浆或 PBS 稀释 5 倍后，再
人 3 2.07 3.41 5.01 同法处理、分析。各样品中LGT-6蛋白结合率的计算同
50 5.25 6.70 4.65
720 2.75 4.88 5.19 “2.6.2”项，结果见表7。
表4 LGT-6的稀释可靠性考察结果（n＝6，％％） 表 7 不同浓度LGT-6在大鼠、猴和人血浆中的蛋白结
Tab 4 Investigation results of dilution reliability of 合率测定结果（x±±s，n＝5，％％）
LGT-6（n＝6，％％） Tab 7 Protein binding rates of different concentra-
种属 浓度，nmol/L 准确度 精密度的RSD tions of LGT-6 in rat，monkey and human
大鼠 720 104.28 3.94 plasma（x±±s，n＝5，％％）
猴 720 105.27 5.02
人 720 103.77 3.68 种属 3 nmol/L 30 nmol/L 300 nmol/L 3 000 nmol/L F P
表 5 透析袋对不同浓度 LGT-6 的吸附率结果（x±±s， 大鼠 96.25±0.97 84.16±1.24 78.25±0.61 66.63±0.95 323.0 ＜0.000 1
猴 98.54±0.58 87.27±1.01 79.35±0.86 66.69±0.54 323.0 ＜0.000 1
n＝6，％％） 人 99.40±1.03 84.48±1.15 77.62±0.77 66.93±0.48 323.0 ＜0.000 1
Tab 5 Adsorption rate result of different concentra- 使用GraphPad Prism v 7.0软件，对相同浓度下不同
tions of LGT-6 by dialysis bag（x±±s，n＝6，％％）
种属和相同种属下不同浓度 LGT-6 的血浆蛋白结合率
种属 3 nmol/L 30 nmol/L 300 nmol/L 3 000 nmol/L 进行单因素方差分析，检验水准α＝0.05。结果，在相同
大鼠 1.25±0.97 2.16±0.22 0.65±0.11 3.30±0.95
猴 0.54±0.28 1.27±0.45 2.35±0.86 2.69±0.14 浓度下，LGT-6在大鼠、猴、人血浆中的蛋白结合率比较
人 1.40±0.63 1.48±0.23 3.45±0.20 2.13±0.68 差异无统计学意义（P＞0.05）；在相同种属血浆中，不同
程计算其中LGT-6浓度，并按如下公式计算血浆蛋白结 浓度 LGT-6 的血浆蛋白结合率组间比较差异有统计学
合率：蛋白结合率（％）＝（Dt－Df ）/Dt×100％（式中，Dt为 意义（P＜0.05），且有随着药物浓度的升高而降低的
透析内液的药物浓度；Df为透析外液的药物浓度，即游 趋势。

·1732 · China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 14 中国药房 2021年第32卷第14期