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DPP-4抑制剂LGT-6在不同种属血浆中蛋白结合率的比较 Δ

1，2
1，2
1，2
廖伟科 1，2＊ ，杨华丽 ，王忠元 ，陈 瑞 ，汤 磊 ，崔 杏 ，朱高峰 （1.贵州省化学合成药物研发利用工程
1，2 #
3
3
技术研究中心，贵阳 550004；2.贵州医科大学药学院，贵阳 550004；3.贵州省人民医院药剂科，贵阳
550002）
中图分类号 R969.1 文献标志码 A 文章编号 1001-0408（2021）14-1728-06
DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2021.14.11

摘 要 目的：建立二肽基肽酶4抑制剂LGT-6在不同种属血浆中蛋白结合率的测定方法并比较差异。方法：采用平衡透析法，
以磷酸盐缓冲液为透析外液，将3、30、300、3 000 nmol/L的LGT-6分别在大鼠、猴、人血浆（即透析内液）中平衡48 h。以甲苯磺丁
脲为内标，采用超高效液相色谱-串联质谱法测定透析内、外液中LGT-6的浓度，计算血浆蛋白结合率。以ACQUITY UPLC HSS
T3为色谱柱，以水（含0.01％甲酸）-乙腈（含0.01％甲酸）为流动相进行梯度洗脱，流速为0.6 mL/min，柱温为40 ℃，进样量为2 μL；
离子源为电喷雾离子源，监测模式为多反应监测模式，采集模式为正离子模式，定量分析用离子对分别为 m/z 487.0→434.3
（LGT-6）、m/z 271.1→172.0（内标）。结果：在 3、30、300、3 000 nmol/L 浓度下，LGT-6 在大鼠血浆中的蛋白结合率分别为（96.25±
0.97）％、（84.16±1.24）％、（78.25±0.61）％、（66.63±0.95）％，在猴血浆中的蛋白结合率分别为（98.54±0.58）％、（87.27±
1.01）％、（79.35±0.86）％、（66.69±0.54）％，在人血浆中的蛋白结合率分别为（99.40±1.03）％、（84.48±1.15）％、（77.62±
0.77）％、（66.93±0.48）％。在相同浓度下，LGT-6在大鼠、猴和人血浆中的蛋白结合率没有明显差异（P＞0.05）；在相同种属血浆
中，不同浓度LGT-6的血浆蛋白结合率组间比较差异有统计学意义（P＜0.05），且有随药物浓度的升高而降低的趋势。结论：成功
建立了测定LGT-6血浆蛋白结合率的方法。在相同浓度下，LGT-6在大鼠、猴、人血浆中的蛋白结合率没有明显的种属差异，但有
明显的浓度依赖趋势。
关键词 二肽基肽酶4抑制剂；LGT-6；平衡透析法；超高效液相色谱-串联质谱法；血浆蛋白结合率；不同种属血浆

Comparison of Protein Binding Rate of DPP-4 Inhibitor LGT-6 in Different Species of Plasma
LIAO Weike ，YANG Huali ，WANG Zhongyuan ，CHEN Rui ，TANG Lei ，CUI Xing ，ZHU Gaofeng 1，2
3
1，2
3
1，2
1，2
1，2
（1. Guizhou Provincial Engineering Technology Research Center for Chemical Drug R&D，Guiyang 550004，
China；2. College of Pharmacy，Guizhou Medical University，Guiyang 550004，China；3. Dept. of Pharmacy，
Guizhou Provincial People’s Hospital，Guiyang 550002，China）
ABSTRACT OBJECTIVE：To establish the method for determining protein binding rate of dipeptidyl peptidase-4 inhibitor LGT-6
in different species of plasma，and to compare their difference. METHODS：By equilibrium dialysis，LGT-6（3，30，300，3 000
nmol/L）was equilibrated in rat，monkey and human plasma（i. e. internal dialysis solution）for 48 h，using phosphate buffer as the
external dialysis solution. The concentration of LGT-6 in internal and external dialysis solution was determined by UPLC-MS/MS
using tolbutamide as internal standard，and the plasma protein binding rate was calculated. The determination was performed on
ACQUITY UPLC HSS T3 column with water （containing 0.01％ formic acid）-acetonitrile （containing 0.01％ formic acid） as
mobile phase at the flow rate of 0.6 mL/min. The column temperature was 40 ℃，and the sample size was 2 μL. The ion source
was electrospray ion source，and the multiple ion monitoring mode was used to carry out positive ionization scanning. The ion pairs
for quantitative analysis were m/z 487.0→434.3（LGT-6），m/z 271.1→172.0（internal standard），respectively. RESULTS：At the
concentrations of 3，30，300，and 3 000 nmol/L，the protein binding rates of LGT-6 in rat plasma were（96.25±0.97）％，（84.16±
1.24）％，（78.25±0.61）％，（66.63±0.95）％；the protein protein binding rates in monkey plasma were（98.54±0.58）％，（87.27±
1.01）％ ，（79.35 ± 0.86）％ ，（66.69 ± 0.54）％ ；the protein binding rates in human plasma were （99.40 ± 1.03）％ ，（84.48 ±
1.15）％，（77.62±0.77）％，（66.93±0.48）％. At the same concentration，the protein binding rates of LGT-6 in rat，monkey and
human plasma had no significant difference（P＞0.05）. In the same species of plasma，there were significant differences in the
plasma protein binding rates of different concentration of
Δ 基金项目：贵州省科技计划项目（No.黔科合支撑〔2019〕2761
LGT-6 among those groups（P＜0.05），and it decreased with
号）；贵州省高层次创新型人才“百层次人才”项目（No.黔科合平台人
the increase of drug concentration. CONCLUSIONS： The
才〔2016〕4015）
＊副教授，硕士生导师，博士。研究方向：创新药物研发。电话： method for the determination of plasma protein binding rate of
0851-86908318。E-mail：641212891@qq.com LGT-6 is successfully established. The data revealed that the
# 通信作者：高级实验师，硕士生导师，硕士。研究方向：药物分 protein binding rate of LGT-6 is concentration-dependent，
析与药动学。电话：0851-86908318。E-mail：64949824@qq.com there was no obvious species difference on protein binding

·1728 · China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 14 中国药房 2021年第32卷第14期