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表 7 10 批不同产地三七姜乙酸乙酯提取物中 18 个共 不同流速(0.8、1、1.2 mL/min)对各成分的分离效果。结
有峰与抗炎、镇痛作用的关联度和关联序 果发现,当检测波长为260 nm、流动相为乙腈-0.1%磷酸
Tab 7 Correlation degree and order between common 溶液、流速为 0.8 mL/min 时,各色谱峰的分离效果和峰
peaks and analgesic and anti-inflammatory ef- 形均最好,且基线较平稳、各峰保留时间适当,故最终确
fects of ethyl acetate extracts of 10 batches of 定了“2.3.2”项下色谱条件。
S. involucratus from different habitats 3.2 三七姜乙酸乙酯提取物抗炎、镇痛的谱-效关系
抗炎关联度结果 镇痛关联度结果 分析
色谱峰号
关联度 关联序 关联度 关联序 本研究主要是想探讨三七姜外用的抗炎、镇痛作
1 0.732 7 2 0.732 2 1
2 0.707 4 6 0.704 4 6 用,因此选择了外敷药物复方醋酸地塞米松软膏和双氯
3 0.695 9 14 0.692 9 13 芬酸二乙胺乳胶剂作为阳性对照药物。其中,复方醋酸
4 0.708 7 5 0.703 0 7 地塞米松软膏为糖皮质激素外用制剂,临床上常用于炎
5 0.699 7 10 0.694 7 10
[15]
6 0.700 7 9 0.695 0 9 症性疾病的治疗,且效果显著 ;双氯芬酸二乙胺乳胶
7 0.704 9 8 0.699 8 8 剂为前列腺素合成抑制剂,其不仅能抑制前列腺素的合
8 0.693 7 15 0.689 1 18 成,具有抗炎、镇痛作用,还能提高痛阈值,从而减轻疼
9 0.715 1 4 0.708 9 4
[16]
10 0.687 9 18 0.689 3 17 痛及肿胀,最终达到治疗效果 。
11 0.698 3 11 0.692 8 14 本研究采用 HPLC 法对 10 批不同产地三七姜乙酸
12 0.697 3 12 0.691 9 15
13 0.696 8 13 0.691 3 16 乙酯提取物进行了指纹图谱分析,共标定出了18个共有
14 0.734 1 1 0.726 2 3 峰,并指认出了其中3个特征峰。接着,本研究分别采用
15 0.694 7 16 0.693 0 12 Pearson相关系数法和灰色关联分析法对这18个共有色
16 0.706 4 7 0.704 5 5
17 0.730 5 3 0.728 4 2 谱峰与三七姜乙酸乙酯提取物的抗炎、镇痛作用进行了
18 0.691 9 17 0.693 6 11 相关性分析。Pearson相关性分析结果表明,与三七姜乙
17>峰 9>峰 4>峰 2>峰 16>峰 7>峰 6>峰 5>峰 酸乙酯提取物抗炎、镇痛作用具有显著相关的是峰 10、
11>峰 12>峰 13>峰 3>峰 8>峰 15>峰 18>峰 10,各 18;基于灰色关联度分析表明,对三七姜乙酸乙酯提取
成分对镇痛作用贡献的大小顺序依次为峰1>峰17>峰 物抗炎作用贡献较大的是峰 14、1(原儿茶酸)、17、9、4
14>峰 9>峰 16>峰 2>峰 4>峰 7>峰 6>峰 5>峰 (对羟基苯甲醛)、2(对羟基苯甲酸)、16、7、6,对其镇痛
18>峰 15>峰 3>峰 11>峰 12>峰 13>峰 10>峰 8。 作用贡献较大的是峰1(原儿茶酸)、17、14、9、16、2(对羟
同时,峰14、1(原儿茶酸)、17、9、4(对羟基苯甲醛)、2(对 基苯甲酸)、4(对羟基苯甲醛)。以上各特征峰与三七姜
羟基苯甲酸)、16、7、6 与三七姜乙酸乙酯提取物抗炎药 乙酸乙酯提取物对应药效的关联度虽存在差异,但关联
效的关联度相对较高(关联度均高于 0.7),峰 1(原儿茶 度均高于0.7,可能为三七姜乙酸乙酯提取物发挥抗炎、
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酸)、17、14、9、16、2(对羟基苯甲酸)、4(对羟基苯甲醛) 镇痛效果的主要活性成分 。
与三七姜乙酸乙酯提取物镇痛药效的关联度相对较高 在上述关联度较高的色谱峰中,笔者指认出了原儿
(关联度均高于 0.7)。该结果表明,这些关联度较高的 茶酸、对羟基苯甲酸、对羟基苯甲醛这 3 种成分。占龙
[18]
峰(其中包括已知成分原儿茶酸、对羟基苯甲酸、对羟基 等 通过研究原儿茶酸在体外对白细胞介素 1β诱导炎
苯甲醛等)可能是三七姜乙酸乙酯提取物发挥药效的主 症软骨细胞的生物学影响,证实了其能促进软骨细胞生
要成分。 长以及下调炎症相关基因MMP-13的表达。姜鸿等 在
[19]
3 讨论 火绒草抗急性炎症的药效物质基础研究中发现,该药发
3.1 色谱条件的筛选 挥 抗 急 性 炎 症 的 作 用 与 其 所 含 成 分 原 儿 茶 酸 有
[20]
本 课 题 组 前 期 考 察 了 多 种 色 谱 柱(COSMOSIL 关。 Dikmen 等 研究发现,原儿茶酸通过内源性大麻
5C18-PAQ、Hypersil ODS2 和 Phenomennex Kinetex XB 素系统来抑制疼痛反应。Arslan等 通过小鼠热板实验
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C18等)的分离效果,结果发现色谱柱 Phenomenex Kine- (脊柱上综合反应)和尾巴浸入实验(脊髓反射)发现,原
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tex XB C18 (250 mm×4.6 mm,5 μm)对各成分的分离效果 儿茶酸具有镇痛作用。和蕾等 研究发现,对羟基苯甲
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明显优于其他色谱柱。此外,本课题组前期还考察了不 酸具有抗炎活性。刘珊珊等 研究表明,天麻中的对羟
同检测波长(220、260、280、300、320 nm)、不同流动相 基苯甲醛具有抗炎作用。可见,原儿茶酸、对羟基苯甲
(甲醇-水、甲醇-0.1%磷酸溶液、乙腈-水、乙腈-0.1%磷 酸、对羟基苯甲醛可能为三七姜药材抗炎、镇痛的活性
酸溶液、乙腈-0.1%冰乙酸溶液、乙腈-0.1%甲酸溶液)、 成分之一。
·1726 · China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 14 中国药房 2021年第32卷第14期