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表 7 10 批不同产地三七姜乙酸乙酯提取物中 18 个共                       不同流速(0.8、1、1.2 mL/min)对各成分的分离效果。结
              有峰与抗炎、镇痛作用的关联度和关联序                            果发现,当检测波长为260 nm、流动相为乙腈-0.1%磷酸
        Tab 7 Correlation degree and order between common   溶液、流速为 0.8 mL/min 时,各色谱峰的分离效果和峰
               peaks and analgesic and anti-inflammatory ef-  形均最好,且基线较平稳、各峰保留时间适当,故最终确
               fects of ethyl acetate extracts of 10 batches of  定了“2.3.2”项下色谱条件。
               S. involucratus from different habitats      3.2  三七姜乙酸乙酯提取物抗炎、镇痛的谱-效关系
                     抗炎关联度结果              镇痛关联度结果           分析
         色谱峰号
                  关联度       关联序        关联度       关联序            本研究主要是想探讨三七姜外用的抗炎、镇痛作
         1        0.732 7     2        0.732 2     1
         2        0.707 4     6        0.704 4     6        用,因此选择了外敷药物复方醋酸地塞米松软膏和双氯
         3        0.695 9     14       0.692 9    13        芬酸二乙胺乳胶剂作为阳性对照药物。其中,复方醋酸
         4        0.708 7     5        0.703 0     7        地塞米松软膏为糖皮质激素外用制剂,临床上常用于炎
         5        0.699 7     10       0.694 7    10
                                                                                      [15]
         6        0.700 7     9        0.695 0     9        症性疾病的治疗,且效果显著 ;双氯芬酸二乙胺乳胶
         7        0.704 9     8        0.699 8     8        剂为前列腺素合成抑制剂,其不仅能抑制前列腺素的合
         8        0.693 7     15       0.689 1    18        成,具有抗炎、镇痛作用,还能提高痛阈值,从而减轻疼
         9        0.715 1     4        0.708 9     4
                                                                                     [16]
         10       0.687 9     18       0.689 3    17        痛及肿胀,最终达到治疗效果 。
         11       0.698 3     11       0.692 8    14            本研究采用 HPLC 法对 10 批不同产地三七姜乙酸
         12       0.697 3     12       0.691 9    15
         13       0.696 8     13       0.691 3    16        乙酯提取物进行了指纹图谱分析,共标定出了18个共有
         14       0.734 1     1        0.726 2     3        峰,并指认出了其中3个特征峰。接着,本研究分别采用
         15       0.694 7     16       0.693 0    12        Pearson相关系数法和灰色关联分析法对这18个共有色
         16       0.706 4     7        0.704 5     5
         17       0.730 5     3        0.728 4     2        谱峰与三七姜乙酸乙酯提取物的抗炎、镇痛作用进行了
         18       0.691 9     17       0.693 6    11        相关性分析。Pearson相关性分析结果表明,与三七姜乙
        17>峰 9>峰 4>峰 2>峰 16>峰 7>峰 6>峰 5>峰                   酸乙酯提取物抗炎、镇痛作用具有显著相关的是峰 10、
        11>峰 12>峰 13>峰 3>峰 8>峰 15>峰 18>峰 10,各               18;基于灰色关联度分析表明,对三七姜乙酸乙酯提取
        成分对镇痛作用贡献的大小顺序依次为峰1>峰17>峰                           物抗炎作用贡献较大的是峰 14、1(原儿茶酸)、17、9、4
        14>峰 9>峰 16>峰 2>峰 4>峰 7>峰 6>峰 5>峰                  (对羟基苯甲醛)、2(对羟基苯甲酸)、16、7、6,对其镇痛
        18>峰 15>峰 3>峰 11>峰 12>峰 13>峰 10>峰 8。                作用贡献较大的是峰1(原儿茶酸)、17、14、9、16、2(对羟
        同时,峰14、1(原儿茶酸)、17、9、4(对羟基苯甲醛)、2(对                   基苯甲酸)、4(对羟基苯甲醛)。以上各特征峰与三七姜
        羟基苯甲酸)、16、7、6 与三七姜乙酸乙酯提取物抗炎药                        乙酸乙酯提取物对应药效的关联度虽存在差异,但关联
        效的关联度相对较高(关联度均高于 0.7),峰 1(原儿茶                       度均高于0.7,可能为三七姜乙酸乙酯提取物发挥抗炎、
                                                                                  [17]
        酸)、17、14、9、16、2(对羟基苯甲酸)、4(对羟基苯甲醛)                   镇痛效果的主要活性成分 。
        与三七姜乙酸乙酯提取物镇痛药效的关联度相对较高                                 在上述关联度较高的色谱峰中,笔者指认出了原儿
        (关联度均高于 0.7)。该结果表明,这些关联度较高的                         茶酸、对羟基苯甲酸、对羟基苯甲醛这 3 种成分。占龙
                                                              [18]
        峰(其中包括已知成分原儿茶酸、对羟基苯甲酸、对羟基                           等 通过研究原儿茶酸在体外对白细胞介素 1β诱导炎
        苯甲醛等)可能是三七姜乙酸乙酯提取物发挥药效的主                            症软骨细胞的生物学影响,证实了其能促进软骨细胞生
        要成分。                                                长以及下调炎症相关基因MMP-13的表达。姜鸿等 在
                                                                                                        [19]
        3 讨论                                                火绒草抗急性炎症的药效物质基础研究中发现,该药发
        3.1 色谱条件的筛选                                         挥 抗 急 性 炎 症 的 作 用 与 其 所 含 成 分 原 儿 茶 酸 有
                                                                         [20]
            本 课 题 组 前 期 考 察 了 多 种 色 谱 柱(COSMOSIL            关。 Dikmen 等 研究发现,原儿茶酸通过内源性大麻
        5C18-PAQ、Hypersil ODS2 和 Phenomennex Kinetex XB     素系统来抑制疼痛反应。Arslan等 通过小鼠热板实验
                                                                                          [21]
        C18等)的分离效果,结果发现色谱柱 Phenomenex Kine-                (脊柱上综合反应)和尾巴浸入实验(脊髓反射)发现,原
                                                                                       [22]
        tex XB C18 (250 mm×4.6 mm,5 μm)对各成分的分离效果            儿茶酸具有镇痛作用。和蕾等 研究发现,对羟基苯甲
                                                                                    [23]
        明显优于其他色谱柱。此外,本课题组前期还考察了不                            酸具有抗炎活性。刘珊珊等 研究表明,天麻中的对羟
        同检测波长(220、260、280、300、320 nm)、不同流动相                 基苯甲醛具有抗炎作用。可见,原儿茶酸、对羟基苯甲
        (甲醇-水、甲醇-0.1%磷酸溶液、乙腈-水、乙腈-0.1%磷                     酸、对羟基苯甲醛可能为三七姜药材抗炎、镇痛的活性
        酸溶液、乙腈-0.1%冰乙酸溶液、乙腈-0.1%甲酸溶液)、                      成分之一。


        ·1726 ·  China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 14                                 中国药房    2021年第32卷第14期
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