Page 56 - 《中国药房》2021年10期
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有表现出抗癌的作用，反而会促进肿瘤细胞的生长，加                            因mRNA的表达和凋亡调节剂相关X蛋白、胱天蛋白酶
        快肿瘤发展进程，表现出了与野生型 p53 基因完全相反                         8（Caspase-8）、裂解型胱天蛋白酶 9（Cleaved-caspase-9）
        的作用    [27－29] 。研究表明，野生型 P53 蛋白可以促进 E3型             等蛋白靶点，参与鼻咽癌细胞生长、转移和发展的过程，
        泛素化连接酶MDM2的表达，而后者可使P53蛋白泛素                          已确定染料木素能通过抑制Hedgehog通路活性发挥抗
        化降解；然而，突变型P53蛋白不会激活MDM2，因此导                         鼻咽癌作用     [44－45] 。p21 可以参与多条信号通路转导，如
        致突变型 P53 蛋白积聚于肿瘤细胞内 。又有报道证                          P53 通路和 PI3K/Akt 通路，其可正向调控P53通路，负向
                                          [30]
        实，抑制突变型 p53 基因的表达或使突变型 P53 蛋白与                      调控PI3K/Akt通路    [46－47] 。而本研究结果显示，p21 基因
        某些小分子结合，使突变型P53蛋白发生稳定折叠而恢复                          表达量显著下降，与p53基因表达趋势相同，提示其可能
        其野生型P53蛋白的功能后，可达到抗肿瘤的目的                    [31－32] 。  是受到P53通路的调控。
        因此笔者推测，在 CNE1 细胞中突变型 p53 基因编码翻                          综上所述，本研究除了通过体外细胞实验证实了染
        译的突变型P53蛋白无法激活MDM2，导致其积聚于细                          料木素抗鼻咽癌的活性外，还通过高通量测序技术和
        胞内难以降解，而染料木素能抑制细胞中突变型 p53 基                         RT-qPCR 方法相互印证，挖掘出了 p53、STC2、FGF2、
        因表达，甚至与突变型P53蛋白结合，使突变型P53蛋白                         AKT、PIK、CDK6 和 CYCLIN D 等抗鼻咽癌的相关靶点，
        发生折叠而恢复了野生型 P53 蛋白的功能，从而阻滞                          发现染料木素可能通过抑制突变型基因 p53 的表达，恢
        CNE1 细胞周期、诱导其凋亡，最终发挥抗鼻咽癌的作                          复野生型 P53 蛋白的功能，从而发挥抗鼻咽癌的作用。
        用。而人类正常细胞不表达突变型 p53 基因                 [33－34] ，这意  笔者还在 mRNA 水平上初步证明了染料木素可以抑制
        味着染料木素在抑制突变型p53基因表达的同时不会对                           PI3K/Akt 通路的活性，从而抑制鼻咽癌的生长、转移。
        正常组织造成严重损伤，因此该化合物针对突变型 p53                          虽然本研究只涉及了基因水平，仍需蛋白水平和体内实
        基因靶向治疗鼻咽癌有望得以实现。
                                                            验的验证，但本研究依托高通量测序技术挖掘出了新的
            STC2 基因是锡钙素家族的成员，STC2 以及其所编                     染料木素抗鼻咽癌靶点和通路，也为该化合物的后续研
        码的锡钙素 2（STC2）蛋白具有调节钙和磷酸盐分泌的
                                                            究以及鼻咽癌的治疗提供了理论基础。
        重要作用 。目前，已有研究证实，STC2 的异常表达与                         参考文献
                 [35]
        鼻咽癌患者预后不良存在一定关系 。STC2 蛋白是人
                                       [36]
                                                            [ 1 ]  林玲，胡耶芳. HPLC测定千斤拔染料木苷及染料木素含
        头颈部鳞状细胞癌细胞生长、转移和侵袭的正向调节
                                                                 量[J].国际中医中药杂志，2019，41（2）：182-184.
        剂；而成细胞纤维生长因子2（FGF2）作为TGF家族的一                        [ 2 ]  冯果，施晓伟，蔡琨，等.黔产纯种发酵淡豆豉中大豆黄素
        员，与肿瘤细胞增殖、迁移和侵袭密切相关；STC2、FGF2                            及染料木素的含量测定[J].广东农业科学，2011，38
        蛋白对磷酸化蛋白激酶 B（p-Akt）、磷脂酰肌醇 3 激酶                          （23）：118-119.
        （PI3K）等 PI3K/Akt 通路中关键蛋白的表达均有正向调                    [ 3 ]  梁永枢，安冉，刘军民，等.不同产地鸡血藤药材中染料木
        节作用，可增强头颈部鳞状细胞HNSCC的增殖、侵袭和                               素及芒柄花素的含量测定[J].时珍国医国药，2013，24
        肿瘤转移能力       [37－40] 。而本研究结果表明，染料木素可以                   （7）：1655-1657.
        显著抑制 CNE1 细胞的增殖和迁移，且可以显著降低                          [ 4 ]  张晓松，金花，闫惠丽，等.去甲基化法制备黄豆苷元和染
        CNE1细胞中STC2、FGF2基因的表达，而调控PI3K/Akt                        料木黄酮及抗氧化性分析[J].食品科学，2018，39（2）：
        通路的关键基因 AKT、PI3K 的表达也有不同程度的下                             240-246.
        降，因此笔者推测是 STC2、FGF2 基因表达的下调导致                       [ 5 ]  FANG Y C，CHEN B H，HUANG R F，et al. Effect of ge-
        了 PI3K/Akt 通路活性被抑制。细胞周期蛋白依赖性激                            nistein supplementation on tissue genistein and lipid per-
        酶（CDK）家族和 D 型细胞周期蛋白（CYCLIN D）是                           oxidation of serum，liver and low-density lipoprotein in
        PI3K/Akt通路的下游蛋白，CDK家族依赖CYCLIN D与                         hamsters[J]. J Nutr Biochem，2004，15（3）：142-148.
        其结合才能被激活，从而发挥调控细胞周期、转录、生长                           [ 6 ]  UDDIN M S，KABIR M T. Emerging signal regulating po-
                                                                 tential of genistein against alzheimer’s disease：a promi-
        的作用    [41 － 42] 。同时，有研究发现，染料木素可直接与
        CDK6/CYCLIN D 复合物结合，从而直接发挥抗鼻咽癌                           sing molecule of interest[J]. Front Cell Dev Biol，2019
                                                                （7）：197-208.
               [43]
        的作用 。本研究已经证实，经染料木素干预后，CNE1
                                                            [ 7 ]  张岭，张丽婧，胡文敏，等.染料木黄酮对小鼠卵母细胞成
        细胞中 CDK6、CYCLIN D 基因表达均显著下调，细胞周
                                                                 熟的抑制作用[J].中国食品卫生杂志，2018，30（4）：
        期阻滞于G2/M期，这可能是CDK6基因表达下调直接导
                                                                 353-356.
        致了CDK6激酶的表达水平降低；同时，CYCLIN D基因                       [ 8 ]  GUAN Y，ZHANG Y，ZOU J，et al. Synthesis and biologi-
        调控CYCLIN D的表达，使蛋白表达水平降低从而抑制                              cal evaluation of genistein-IR783 conjugate：cancer cell
        CDK6 激酶的活性，导致细胞周期被阻滞、转录受阻，最                              targeted delivery in MCF-7 for superior anti-cancer thera-
        终使 CNE1 细胞生长受到抑制。因此，染料木素的抗鼻                              py[J]. Molecules，2019，24（22）：4120-4136.
        咽癌机制可能与其抑制 PI3K/Akt 通路活性有关。已有                       [ 9 ]  ZHANG Z，JIN F，LIAN X，et al. Genistein promotes
        的研究表明，染料木素可以通过调控p21、ART、p15等基                            ionizing radiation-induced cell death by reducing cytoplas-


        ·1202 ·  China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 10                                 中国药房    2021年第32卷第10期
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