Page 55 - 《中国药房》2021年10期
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40                                           可以使 CNE1 细胞的 G0/G1期和 G2/M 期都发生阻滞;而
                                                            当染料木素浓度提高到60 µmol/L时,CNE1细胞则大量
               30
                                                            阻滞于 G2/M 期,这可能是由于高浓度的染料木素对
              %              **      **                     CNE1 细胞 G2/M 期相关基因或蛋白的调控作用更加显
              伤口愈合率,  20                   **##ΔΔ           著所造成的,但具体的作用过程及机制仍然需要进一步


               10                                           研究。
                                                                本研究用 30 µmol/L 的染料木素干预 CNE1 细胞后
                0                                           共获得2 271个差异基因,并用RT-qPCR法验证了其中8
                    空白对照组 10 μmol/L染 20 μmol/L染  30 μmol/L染
                            料木素组   料木素组    料木素组             个基因的mRNA表达与测序结果相符,这8个基因也在
                            **
           注:与空白对照组比较, P<0.01;与 10 µmol/L 染料木素组比            染料木素对鼻咽癌 CNE1 细胞的抑制作用中发挥重要
                                      ΔΔ
        较,P<0.01;与20 µmol/L染料木素组比较,P<0.01
          ##
                                                            作用。p53 基因已被证实在抗肿瘤方面作用明显,通常
           Note:vs. blank control group, P<0.01;vs. 10 µmol/L genistein
                                **
                                        ΔΔ
            ##
        group,P<0.01;vs. 20 µmol/L genistein group, P<0.01  过表达的p53基因会通过调控其下游基因的表达,直接
        图4   不同浓度染料木素作用24 h对CNE1细胞迁移能                       或间接参与肿瘤细胞的生长、发展和死亡过程,其主要
             力影响的结果(x±±s,n=5,%%)                            通过阻滞细胞周期和诱导细胞凋亡而产生抗肿瘤作
                                                              [24]
        Fig 4 Effects of different concentration of genistein  用 。然而,本研究发现,在染料木素干预后的CNE1细
               on the migration ability of CNE1 cells after  胞中,p53基因的表达水平并没有升高反而显著降低,因
               treated for 24 h(x±±s,n=5,%%)                此笔者推测 p53 基因可能在 CNE1 细胞中发生了突变。
        CNE1 细胞的增殖均有不同程度的抑制作用,10~30                         已有研究表明,p53 基因突变在人类肿瘤细胞中非常常
        µmol/L 染料木素可以抑制 CNE1 细胞的迁移,15~60                   见,约有 50%的人类肿瘤细胞都会发生 p53 基因突变,
        µmol/L染料木素可不同程度地促进CNE1细胞凋亡,且                       30%~50%的头颈部肿瘤患者细胞中会发生p53基因突
        可以阻滞细胞周期进程。其中,30 µmol/L 的染料木素                      变  [25-26] 。与野生型 p53 基因不同,突变型 p53 基因并没

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             10
                                                                                                   CYCLIN D
            -log10( padj )                                                                         p21

                                                                                                   p53
                                                                                                   CDK6
              5
                                                                                                   STC2

                                                                                                   FGF2
                                                                                                   PI3K
              0                                                                                    AKT

                -5.0      -2.5       0        2.5       5.0         空白对照组           30 μmol/L染料木素组
                                log2 (Fold change)
                               A.差异基因火山图                                  B. 8个差异基因表达热图
                          图5    30 µmol/L染料木素作用24 h对CNE1细胞中差异基因表达的影响
             Fig 5 Effects of 30 µmol/L genistein on differentical gene expression of CNE1 cells after treated for 24 h
                         表4    各组细胞中8个差异基因mRNA相对表达量的测定结果(x±±s,n=3)
           Tab 4 Results of relative mRNA expression of 8 differential genes of CNE1 cells in each group(x±±s,n=3)
         组别              p53        p21       STC2       FGF2       CDK6      CYCLIN D    PI3K      AKT
         空白对照组         1.00±0.12  1.00±0.01  1.00±0.15  1.00±0.02  1.00±0.05  1.00±0.13  1.00±0.34  1.00±0.06
         30 μmol/L染料木素组  0.37±0.06 **  0.37±0.06 **  0.30±0.19 **  0.23±0.05 **  0.12±0.03 **  0.38±0.02 **  0.90±0.35  0.69±0.09 *
                                  **
                           *
           注:与空白对照组比较,P<0.05, P<0.01
           Note:vs. blank control group, P<0.05, P<0.01
                                      **
                               *
        中国药房    2021年第32卷第10期                                            China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 10  ·1201 ·
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