Page 54 - 《中国药房》2021年10期

6.87）％、（29.41±7.43）％。与空白对照组比较，15、30、 染料木素组比较，20 µmol/L 染料木素组的伤口愈合率
60 µmol/L 染料木素组细胞的凋亡率均有不同程度升 差异无统计学意义（P＞0.05），但30 µmol/L染料木素组
高，且具有一定的浓度依赖性趋势，其中 30、60 µmol/L 的伤口愈合率则显著降低（P＜0.01）；与20 µmol/L组比
染料木素组细胞的凋亡率显著升高（P＜0.05 或 P＜ 较，30 µmol/L 染料木素组的伤口愈合率也显著降低
0.01）。不同浓度染料木素作用 24 h 后对 CNE1 凋亡影 （P＜0.01）。不同浓度染料木素作用 24 h 后对 CNE1 细
响的流式细胞图见图2。 胞迁移能力影响的显微图见图 3，伤口愈合率测定结果
10 4 10 4 见图4。
3.5 染料木素对CNE1细胞中基因表达的影响
10 3 10 3
经染料木素干预后，产生了众多差异基因，如图5A
PI 10 2 PI 10 2 所示（图中，每个点代表1个基因，灰色代表无显著变化
的基因，红色代表显著上调的基因，蓝色代表显著下调
10 1 10 1
的基因，且差异越显著其离散程度越高）。与空白对照
10 0 10 0 组比较，30 µmol/L染料木素组细胞中共有2 271个差异
10 0 10 1 10 2 10 3 10 4 10 0 10 1 10 2 10 3 10 4
Annexin V-FITC Annexin V-FITC 基因（padj＜0.05），其中有 1 154 个基因表达显著上调、
A.空白对照组 B. 15 μmol/L染料木素组 1 117个基因表达显著下调。结合本研究中相关细胞实
10 4 10 4
验 ，筛 选 出 p53、p21、STC2、FGF2、CDK6、CYLIN D、
10 3 10 3 PI3K、AKT等8个相关基因进行后续实验，这8个基因表

PI 10 2 PI 10 2 达量趋势如图5B所示（图中，从蓝色到红色代表了差异
基因表达量从低到高的变化趋势）。结果显示，与空白
10 1 10 1
对照组比较，30 µmol/L染料木素组细胞中上述8个基因
10 0 10 0 的表达均呈下调的趋势。
10 0 10 1 10 2 10 3 10 4 10 0 10 1 10 2 10 3 10 4
Annexin V-FITC Annexin V-FITC 3.6 CNE1 细胞中 8 个差异基因 mRNA 表达情况的验
C. 30 μmol/L染料木素组 D. 60 μmol/L染料木素组 证结果
图2 不同浓度染料木素作用24 h后对CNE1凋亡影响 与空白对照组比较，30 µmol/L 染料木素组细胞中
的流式细胞图 上述 8 个差异基因 mRNA 的相对表达量均有不同程度
Fig 2 Flow cytometries of the effects of different con- 降低，其中 p53、p21、STC2、FGF2、CDK6、CYCLIN D、
centration genistein on the apoptosis of CNE1 AKT 等 7 个基因 mRNA 的相对表达量均显著降低（P＜
cells after treated for 24 h 0.05或P＜0.01）。各组细胞中8个差异基因mRNA相对
3.4 染料木素对CNE1细胞迁移能力的影响结果 表达量的测定结果见表4。
与空白对照组比较，10、20、30 µmol/L 染料木素组 4 讨论
细胞的伤口愈合率均显著降低（P＜0.01）；与 10 µmol/L 本研究结果显示，12.5～150 µmol/L 染料木素对

0 h

24 h

A.空白对照组 B. 10 μmol/L染料木素组 C. 20 μmol/L染料木素组 D. 30 μmol/L染料木素组
图3 不同浓度染料木素作用24 h后对CNE1细胞迁移能力影响的显微图（×200）
Fig 3 Micrographs of the effects of different concentration of genistein on migration ability of CNE1 cells after
treated for 24 h（× 200）

·1200 · China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 10 中国药房 2021年第32卷第10期