Page 50 - 《中国药房》2021年10期

染料木素对人鼻咽癌CNE1细胞生长的抑制作用及靶点预测 Δ

3，4
6
6
3，4
2
1＊
5
何文栋 ，苏雯清 ，韦坤华 ，奎 玲 ，王 硕 ，龚小妹 ，杨晓男 ，缪剑华 1，2，3，4，6 # （1.广西中医药大学药学院，南
宁 530200；2.广西医科大学药学院，南宁 530021；3.广西药用植物园广西药用资源保护与遗传改良重点实验
室，南宁 530023；4.广西药用植物园广西壮族自治区中药资源智慧创制工程研究中心，南宁 530023；5.江苏
大学药学院，江苏 镇江 212013；6.广西药用植物园西南濒危药材资源开发国家工程实验室，南宁 530023）
中图分类号 R285 文献标志码 A 文章编号 1001-0408（2021）10-1196-09
DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2021.10.07

摘 要 目的：研究染料木素对人鼻咽癌CNE1细胞生长的抑制作用并预测其可能的作用靶点。方法：采用CCK-8法检测0（空白
对照）、12.5、25、50、100、150 µmol/L染料木素分别作用24、48、72 h对CNE1细胞增殖的影响；分别采用流式细胞术检测0（空白对
照）、15、30、60 µmol/L染料木素作用24 h对CNE1细胞周期、凋亡的影响；采用划痕实验检测0（空白对照）、10、20、30 µmol/L染料
木素作用24 h对CNE1细胞迁移能力的影响。采用高通量测序法挖掘0（空白对照）、30 µmol/L染料木素作用24 h后CNE1细胞中
的差异基因，并通过实时荧光定量-聚合酶链式反应法（RT-qPCR）对上述细胞实验相关差异基因mRNA的表达情况进行验证。结
果：与空白对照比较，12.5、25、50、100、150 µmol/L染料木素对细胞的增殖均有显著的抑制作用（P＜0.01），且呈浓度-时间-效应趋
势；15、30 µmol/L染料木素可使细胞周期阻滞于G0/G1期（P＜0.05或P＜0.01），30、60 µmol/L染料木素可使细胞周期阻滞于G2/M
期并显著促进其凋亡（P＜0.05或P＜0.01）；10、20、30 µmol/L染料木素可显著抑制细胞的迁移能力（P＜0.01）。高通量测序共挖
掘出2 271个差异基因（padj＜0.05），其中1 154个基因上调、1 117个基因下调；结合细胞实验结果共筛选出p53、p21、STC2、FGF2、
CDK6、CYCLIN D、PI3K、AKT等8个潜在靶点差异基因。经RT-qPCR法验证，其中p53、p21、STC2、FGF2、CDK6、CYCLIN D、AKT等7
个潜在靶点差异基因 mRNA 的表达均显著下调（P＜0.05），与转录组测序结果基本一致。结论：染料木素能有效抑制人鼻咽癌
CNE1细胞的生长；其抗鼻咽癌机制可能与抑制突变型p53基因的表达，恢复野生型P53蛋白功能以及抑制磷脂酰肌醇3激酶/蛋
白激酶B通路的活性有关。
关键词 染料木素；人鼻咽癌CNE1细胞；高通量测序；突变型p53基因；磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B通路

Inhibitory Effect and Target Prediction of Genistein on the Growth of Human Nasopharyngeal Carcinoma
CNE1 Cells
HE Wendong ，SU Wenqing ，WEI Kunhua ，KUI Ling ，WANG Shuo ，GONG Xiaomei ，YANG Xiaonan ，
2
6
1
3，4
3，4
6
5
MIAO Jianhua 1，2，3，4，6 （1. Pharmacy College，Guangxi University of TCM，Nanning 530200，China；2. Pharmacy
College，Guangxi Medical University，Nanning 530021，China；3. Guangxi Key Laboratory of Medicinal
Resources Protection and Genetic Improvement，Guangxi Botanical Garden of Medicinal Plants，Nanning
530023，China；4. Guangxi Engineering Research Center of TCM Resource Intelligence Creation，Guangxi
Botanical Garden of Medicinal Plants，Nanning 530023，China；5. Pharmacy College，Jiangsu University，
Jiangsu Zhengjiang 212013，China；6. National Engineering Laboratory of Southwest Endangered Medicinal
Resources Development，Guangxi Botanical Garden of Medicinal Plants，Nanning 530023，China）

ABSTRACT OBJECTIVE：To study the inhibitory effects of genistein on the growth of human nasopharyngeal carcinoma. CNE1
cells and predict its potential target. METHODS：CCK-8 method was used to test the effects of 0（blank control），12.5，25，50，
100，150 µmol/L genistein on the proliferation of CNE1 cells after treated for 24，48，72 h. Flow cytometry was carried out to
detect the effects of 0（blank control），15，30，60 µmol/L genistein on the cell cycle and apoptosis of CNE1 cells after treated for
24 h. Scratch test was used to investigate the effects of 0
Δ 基金项目：科技基础资源调查专项项目（No.2018FY100700）；
（blank control）， 10， 20， 30 µmol/L genistein on the
广西科技计划项目（No.桂科AD17129044）；广西创新驱动发展专项资
migration ability of CNE1 cells after treated for 24 h. High
金项目（No.桂科AA18242040）；2018级研究生教育创新计划立项课题
throughput sequencing was conducted to discover the
（No.18210156）
＊硕士研究生。研究方向：药用植物生态学与中药资源经济学。 differential genes in CNE1 cells after treated with 0 （blank
E-mail：1269535863@qq.com control），30 µmol/L genistein for 24 h. RT-qPCR assay was
# 通信作者：研究员，硕士生导师。研究方向：药用植物生态学与 adopted to verify the mRNA expression of related differential
中药资源经济学。E-mail：mjh1962@vip.163.com genes in above trials. RESULTS： Compared with blank

·1196 · China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 10 中国药房 2021年第32卷第10期