Page 62 - 《中国药房》2021年8期

芥子碱硫氰酸盐对人皮肤鳞状细胞癌SCL-1细胞增殖、上皮间质

转化、转移的影响及其机制研究 Δ

1，2
1，2
1，2
1，2
1，2
1，2 #
苏羽屾 1，2＊ ，曾智锐 ，荣冬芸 ，王 叶 ，李 丹 ，唐姗姗 ，汪 涛 ，龙雪梅 ，曹 煜 （1.贵州医科大学
3，4
1，2
临床医学院，贵阳 550004；2.贵州医科大学附属医院皮肤科，贵阳 550004；3.贵州医科大学基础医学院生理
教研室，贵阳 550004；4.贵州省常见慢性病发病机制与药物研究重点实验室，贵阳 550004）
中图分类号 R965 文献标志码 A 文章编号 1001-0408（2021）08-0952-09
DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2021.08.10
摘 要 目的：研究芥子碱硫氰酸盐（ST）对人皮肤鳞状细胞癌SCL-1细胞增殖、上皮间质转化（EMT）和转移的影响，并考察其可
能的作用机制。方法：将人皮肤鳞状细胞癌SCL-1细胞分为空白对照组（0.1％二甲基亚砜）和ST不同浓度组（5、10、20 μmol/L），
分别通过CCK-8实验、5-乙炔基-2′脱氧尿嘧啶核苷染色实验、细胞划痕实验和Transwell小室侵袭实验测定各组细胞的增殖、迁移
和侵袭能力，通过Western blot实验和免疫荧光实验分别测定各组细胞中EMT相关指标N-钙黏着蛋白（N-cadherin）、E-钙黏着蛋
白（E-cadherin）的表达水平。另将SCL-1细胞分为空白对照组（0.1％二甲基亚砜）、ST单用组（20 μmol/L）、ST+NSC228155组[20
μmol/L ST+100 μmol/L NSC228155（EGFR 激动剂）]和 ST+SC79 组[20 μmol/L ST+20 μmol/L SC79（PI3K/Akt 激动剂）]，分别通过
CCK-8实验、细胞划痕实验和Transwell小室侵袭实验测定各组细胞的增殖、迁移和侵袭能力，并通过Western blot实验测定空白对
照组（0.1％二甲基亚砜）和ST不同浓度组（5、10、20 μmol/L）组细胞中表皮生长因子受体（EGFR）、磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）、磷酸
化磷脂酰肌醇3激酶（p-PI3K）、蛋白激酶B（Akt）和磷酸化Akt（p-Akt）蛋白的表达水平，以验证ST的作用与EGFR/PI3K/Akt信号
通路的关系。另将 SCL-1 细胞和人正常皮肤成纤维细胞 WS1 分别分为空白对照组（0.1％二甲基亚砜）、ST 组（20 μmol/L）、
ZD1839组（阳性对照，20 μmol/L，EGFR抑制剂）和LY294002组（阳性对照，20 μmol/L，PI3K/Akt抑制剂），采用CCK-8实验测定各
组细胞的增殖能力，以评价ST的细胞毒性。结果：与空白对照组比较，5、10、20 μmol/L ST组SCL-1细胞的增殖、迁移和侵袭能力
均显著减弱（P＜0.05）；Western blot和免疫荧光实验结果显示，5、10、20 μmol/L ST组SCL-1细胞中N-cadherin蛋白的表达均显著
下调（P＜0.05），E-cadherin蛋白的表达均显著上调（P＜0.05），并且细胞中EGFR、p-PI3K、p-Akt蛋白的表达水平均显著降低（P＜
0.05）。与ST单用组比较，ST+NSC228155组和ST+SC79组SCL-1细胞的增殖、迁移和侵袭能力均显著增强（P＜0.05）。与空白对
照组比较，ST 组 WS1 细胞的增殖能力差异无统计学意义（P＞0.05），SCL-1 细胞增殖能力显著减弱（P＜0.05），ZD1839 组和
LY294002组两种细胞的增殖能力均显著减弱（P＜0.05）；与ST组比较，ZD1839组和LY294002组WS1细胞的增殖能力均显著减
弱（P＜0.05），但SCL-1细胞的增殖能力差异无统计学意义（P＞0.05）。结论：ST可能通过抑制EGFR/PI3K/Akt信号通路的活化而
抑制人皮肤鳞癌SCL-1细胞的增殖、EMT和转移，且其毒副作用较小。
关键词 芥子碱硫氰酸盐；人皮肤鳞状细胞癌SCL-1细胞；增殖；上皮间质转化；转移；EGFR/PI3K/Akt信号通路

Study on the Effects and Its Mechanism of Sinapine Thiocyanate on the Proliferation， Epithelial
Mesenchymal Transition and Metastasis of Human Cutaneous Squamous Cell Carcinoma SCL-1 Cells
3，4
SU Yushen ，ZENG Zhirui ，RONG Dongyun ，WANG Ye ，LI Dan ，TANG Shanshan ，WANG Tao ，
1，2
1，2
1，2
1，2
1，2
1，2
1，2
LONG Xuemei ，CAO Yu （1. School of Clinical Medicine，Guizhou Medical University，Guiyang 550004，
1，2
China；2. Dept. of Dermatology，the Affiliated Hospital of Guizhou Medical University，Guiyang 550004，
China；3. Dept. of Physiology，School of Basic Medical Science，Guizhou Medical University，Guiyang
550004，China；4. Guizhou Provincial Key Laboratory of Pathogenesis&Drug Research on Common Chronic
Diseases，Guiyang 550004，China）
ABSTRACT OBJECTIVE：To study the effects of sinapine thiocyanate （ST） on the proliferation，epithelial mesenchymal
transformation（EMT）and metastasis of human cutaneous squamous cell carcinoma SCL-1 cells，and to investigate its possible
mechanism. METHODS：Human cutaneous squamous cell carcinoma SCL-1 cells were divided into blank control group（0.1％
DMSO） and ST different concentration groups （5，10，20
Δ 项目基金：贵州省科技计划项目（No.黔科合平台人才〔2016〕
μmol/L）. CCK-8 assay，5-ethynyl-2′-deoxyuridine（EDU）test，
5501）；贵阳市云岩区软科学研究项目[No.云科软字（2016）2号）]
scratch test and Transwell chamber invasion test were adopted
＊硕士研究生。研究方向：中药现代化抗皮肤鳞癌机制的研究
及药物的筛选。电话：0851-86770846。E-mail：350214796@qq.com to test the proliferation，migration and invasion ability. The
# 教授，博士生导师，硕士。研究方向：中药现代化抗皮肤鳞癌机 expression of N-cadherin and E-cadherin were detected by
制的研究及药物的筛选。电话：0851-86770846。E-mail：2692327139@ Western blot and immunofluorescence assay. Other SCL-1 cells
qq.com were collected and divided into blank control group （0.1％

·952 · China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 8 中国药房 2021年第32卷第8期