Page 63 - 《中国药房》2021年07期

大黄-丹参药对对慢性肾衰竭模型大鼠肠源性尿毒素含量和肠道

屏障功能的影响 Δ

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王 宏 ，徐 娟 ，江 茜 ，康 利 ，刘伟伟 ，袁 玲 ，崔晓雪 ，刘琳娜 ，冯仁蕊 ，王 蕾 ，李燕林 （1.天津
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市医药科学研究所心脑血管药物研究室，天津 300020；2.中山市中医院肾内科，广东 中山 528401）
中图分类号 R285.5 文献标志码 A 文章编号 1001-0408（2021）07-0825-07
DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2021.07.10
摘 要 目的：研究大黄-丹参药对对慢性肾衰竭（CRF）模型大鼠肠源性尿毒素含量和肠道屏障功能的影响。方法：将55只雄性
Wistar 大鼠随机分为假手术组（10 只）和造模组（45 只），假手术组大鼠分离肾组织但不切除，造模组大鼠采用 5/6 肾切除法复制
CRF模型。造模成功后（剔除死亡和不成模大鼠5只），将模型大鼠分为模型组（水）、尿毒清颗粒组（2.5 g/kg）和大黄-丹参药对高、
低剂量组（6、3 g/kg，以生药量计），每组10只。假手术组和模型组大鼠灌胃等体积水，各给药组灌胃相应药物，每天1次，连续12
周。末次给药后，采用全自动生化分析仪检测各组大鼠血清中肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）含量和24 h尿液中尿肌酐（Ucr）含量，并
计算肌酐清除率（Ccr）；采用超高效液相色谱-电喷雾串联三重四极杆质谱法同时测定大鼠血清中尿毒素[氧化三甲胺（TMAO）、硫
酸吲哚酚（IS）、硫酸对甲酚（PCS）]的含量；采用实时荧光定量聚合酶链式反应（RT-PCR）法、免疫荧光法分别检测大鼠回肠组织中
闭合蛋白（Occludin）、紧密连接蛋白1（ZO-1）的mRNA和蛋白表达水平；采用苏木素-伊红染色法、Masson染色法观察大鼠肾组织
的病理学变化；采用透射电镜法观察大鼠结肠组织的超微结构变化。结果：与假手术组比较，模型组大鼠血清中 Scr、BUN、
TMAO、PCS、IS含量均显著升高（P＜0.01），尿液中Ucr含量和Ccr及回肠组织中Occludin、ZO-1的mRNA及蛋白表达水平均显著
降低（P＜0.01）；肾组织中肾小球硬化、肾小管扩张，肾间质可见炎性细胞浸润和纤维化；结肠上皮屏障结构重度损伤。与模型组
比较，各给药组大鼠血清中Scr、BUN、TMAO、PCS、IS含量均显著降低（P＜0.05或P＜0.01）；尿液中Ucr含量和回肠组织中Occlu-
din、ZO-1的mRNA及蛋白表达水平均显著升高（大黄-丹参药对低剂量组的ZO-1 mRNA除外，P＜0.05或P＜0.01）；肾间质炎性细
胞浸润、纤维化程度和结肠上皮屏障结构损伤程度均减轻。结论：大黄-丹参药对能有效保护CRF模型大鼠残存的肾功能，其作用
机制可能与降低大鼠血清中肠源性尿毒素含量，上调回肠组织中Occludin、ZO-1 的mRNA及蛋白表达水平从而改善肠道屏障功
能有关。
关键词 大黄；丹参；慢性肾衰竭；肠源性尿毒素；肠道屏障；大鼠

Effects of Couplet Medicine of Rheum palmatum-Salvia miltiorrhiza on Enterogenous Urotoxins Contents
and Intestinal Barrier Function in Rats with Chronic Renal Failure
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WANG Hong ，XU Juan ，JIANG Qian ，KANG Li ，LIU Weiwei ，YUAN Ling ，CUI Xiaoxue ，LIU Linna ，
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FENG Renrui ，WANG Lei ，LI Yanlin （1. Cardiovascular and Cerebrovascular Drug Research Laboratory，
Tianjin Institute of Medical & Pharmaceutical Sciences， Tianjin 300020， China； 2. Dept. Nephrology，
Zhongshan Hospital of TCM，Guangdong Zhongshan 528401，China）
ABSTRACT OBJECTIVE：To study the effects of couplet medicine of Rheum palmatum-Salvia miltiorrhiza on the contents of
enterogenous urotoxin and intestinal barrier function in chronic renal failure（CRF）model rats. METHODS：Totally 55 male Wistar
rats were randomly divided into sham operation group （10 rats） and modeling group （45 rats）. In sham operation group，the
kidneys were isolated but not removed；CRF model was reproduced by 5/6 nephrectomy in modeling group. After modeling
（excluding 5 dead and non-modeling rats），modeling rats were divided into model group（water），Niaoduqing granules group（2.5
g/kg），couplet medicine of R. palmatum-S. miltiorrhiza groups（6，3 g/kg，by crude drug），with 10 rats in each group. Sham
operation group and model group were given constant volume of water intragastrically. Administration groups were given relevant
medicine intragastrically，once a day，for consecutive 12 weeks. After last administration，the contents of creatinine（Scr）and urea
nitrogen （BUN） in serum，the content of urinary creatinine
Δ 基金项目：广东省自然科学基金资助项目（No.2017A030313720）；
（Ucr） in urine were determined by automatic biochemical
中山市社会公益科技研究项目（No.2018B1008）；2020年度中山市第三
analyzer；creatinine clearance rate （Ccr） was calculated. The
批社会公益与基础研究专项（No.2020B3005）；天津市卫生健康委员会
contents of enterogenous urotoxin [trimethylamine-N-oxide
科技人才培育项目（No.KJ20018）
＊助理研究员，硕士。研究方向：心脑血管药理学。电话： （TMAO），indoxyl sulfate（IS）and p-cresyl sulphate（PCS）]
022-27236137。E-mail：wh19860906@126.com were determined by UPLC-ESI-MS/MS. Real-time RT-PCR
# 通信作者：主任医师，硕士。研究方向：中医肾病。电话： and immunofluorescence assay were used to detect the mRNA
0760-89980746。E-mail：li.yan.lin@126.com and protein expression of Occludin and ZO-1 in the ileum

中国药房 2021年第32卷第7期 China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 7 ·825 ·