Page 60 - 《中国药房》2021年07期

1.2 3 “2.3.3”项下方法制备供试品溶液，再按“2.3.1”项下色谱
0.9 条件进样测定，记录色谱图，按标准曲线法计算样品含
mAU 0.6
0.3 2 量并计算加样回收率。结果，样品中绿原酸、咖啡酸、菊
1 4
0
0 6 12 18 24 30 36 42 苣酸和异绿原酸A的平均加样回收率分别为103.53％、
t，min 98.97％、99.46％、101.65％，RSD 分别为 1.58％、1.19％、
A. 供试品溶液（甘肃1）
1.52％、1.15％（n＝6），表明该方法准确度良好。
2.4 3
1.8 2.3.10 4种酚酸类成分的含量测定 取42批蒲公英药
mAU 1.2 材样品，分别按“2.3.3”项下方法制备供试品溶液，再按
0.6 1 2 4
0 “2.3.1”项下色谱条件进样测定，记录色谱图，按标准曲
0 6 12 18 24 30 36 42
t，min 线法计算样品含量。每批样品平行测定 3 次，取均值。
B. 混合对照品溶液 结果，42批蒲公英药材中绿原酸、咖啡酸、菊苣酸和异绿
注：1.绿原酸；2.咖啡酸；3.菊苣酸；4.异绿原酸A
原 酸 A 的 含 量 分 别 为 0.004％ ～0.123％ 、0.006％ ～
Note：1. chlorogenic acid；2. caffeic acid；3. chicoric acid；4. iso-
0.087％、0.073％～1.499％和 0.005％～0.109％，均值分
chlorogenic acid A
别为 0.039％、0.034％、0.548％和 0.034％（表 3）。拟定
图 1 蒲公英药材和 4 种酚酸类成分混合对照品的
HPLC图 按干燥品计算，蒲公英药材中绿原酸的含量不得低于
0.024％、咖啡酸的含量不得低于0.021％、异绿原酸A的
Fig 1 HPLC chromatogram of T. officinale and 4 phe-
含量不得低于0.021％。
nolic acids mixed control
蒲公英药材的上述 4 种酚酸类成分中，2020 年版
品溶液。取上述各梯度浓度混合对照品溶液和“2.3.2” 《中国药典》（一部）只对菊苣酸进行了含量限定（不得低
项下混合对照品溶液，按“2.3.1”项下色谱条件进样测 于0.45％） ，本研究也以此作为菊苣酸的限量标准。测
[2]
定，记录色谱图。以各成分的质量浓度（X）为横坐标、峰 定 结 果 显 示 ，42 批 蒲 公 英 药 材 中 菊 苣 酸 的 含 量 为
面积（Y）为纵坐标进行线性回归，结果如表5所示。 0.073％～1.499％，其中河北、江苏和陕西所产药材的菊
表 5 蒲公英药材中 4 种酚酸类成分的线性关系考察 苣酸含量远远高出药典规定，且各产地药材的菊苣酸含
结果 量差异明显。
Tab 5 Results of linear relationship of 4 phenolic 由表 2 和表 3 可以看出，河北产蒲公英药材中的浸
acids in T. officinale 出物和各种成分的含量均符合所拟定的限量标准；陕西
成分 线性范围，mg/mL 回归方程 R 2 产蒲公英药材中除咖啡酸含量略低以外，浸出物、总黄
绿原酸 0.003～0.196 Y＝3×10 X－16 713 ＞0.999 9 酮和其余3种酚酸类成分的含量均远远超过所拟定的限
7
7
咖啡酸 0.002～0.117 Y＝5×10 X－22 098 ＞0.999 9
7
菊苣酸 0.025～1.578 Y＝4×10 X－1×10 6 0.999 4 量标准。上述结果对筛选优质蒲公英种植基地具有一
7
异绿原酸A 0.002～0.152 Y＝3×10 X－26 800 ＞0.999 9 定的参考价值。
2.3.6 精密度试验 取“2.3.2”项下混合对照品溶液，按 2.4 蒲公英药材的HPLC指纹图谱研究
“2.3.1”项下色谱条件连续进样测定 6 次，记录色谱图。 2.4.1 精密度试验 取样品（编号为甘肃 7）粉末适量，
结果，4 种酚酸类成分峰面积的 RSD 均小于 2.00％（n＝ 按“2.3.3”项下方法制备供试品溶液，再按“2.3.1”项下色
6），表明仪器精密度良好。 谱条件连续进样测定6次，以菊苣酸色谱峰为参照峰，记
2.3.7 稳定性试验 取样品（编号为山西22）粉末适量， 录各共有峰的相对保留时间和相对峰面积。结果，14个
按“2.3.3”项下方法制备供试品溶液，再于常温下放置0、 共有峰相对保留时间的RSD均小于0.31％、相对峰面积
4、8、12、18、24 h时按“2.3.1”项下色谱条件进样测定，记 的RSD均小于3.70％（n＝6），表明该方法精密度良好。
录色谱图。结果，4种酚酸类成分峰面积的RSD均小于 2.4.2 稳定性试验 取样品（编号为甘肃 1）粉末适量，
2.00％（n＝6），表明供试品溶液在常温下放置 24 h 内稳 按“2.3.3”项下方法制备供试品溶液，再于常温下放置0、
定性良好。 4、8、12、18、24 h时按“2.3.1”项下色谱条件进样测定，以
2.3.8 重复性试验 取样品（编号为山西22）粉末适量， 菊苣酸色谱峰为参照峰，记录各共有峰的相对保留时间
共 6 份，分别按“2.3.3”项下方法制备供试品溶液，再按 和相对峰面积。结果，14个共有峰相对保留时间的RSD
“2.3.1”项下色谱条件进样测定，记录峰面积并按标准曲 均小于 0.45％、相对峰面积的 RSD 均小于 4.05％（n＝
线法计算样品中 4 种酚酸类成分的含量。结果，4 种酚 6），表明该方法稳定性良好。
酸类成分含量的RSD均小于2.00％（n＝6），表明该方法 2.4.3 重复性试验 取样品（编号为山西21）粉末适量，
重复性良好。 共 6 份，分别按“2.3.3”项下方法制备供试品溶液，再按
2.3.9 加样回收率试验 精密称取已知含量的样品（编 “2.3.1”项下色谱条件进样测定，以菊苣酸色谱峰为参照
号为甘肃 4）粉末 0.6 g，共 6 份，加入等量的对照品，按 峰，记录各共有峰的相对保留时间和相对峰面积。结

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