Page 61 - 《中国药房》2021年07期
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果,14 个共有峰相对保留时间的 RSD 均小于 0.21%、相                   分在大多数批次样品中的比例处于同一水平;菊苣酸(7
        对峰面积的RSD均小于3.23%(n=6),表明该方法重复                      号峰)在样品组分中所占比例远远高于其他化合物,故
        性良好。                                               该组分的含量差异直接影响各批次样品的相似度。
                                                           表6    蒲公英药材HPLC指纹图谱共有峰相对保留时间
         8 275.98
                                                                 和相对峰面积的RSD
         6 206.17                                          Tab 6 RSD of relative retention time and relative
                                                      S42
                                                                   peak area of common peak in HPLC finger-
         mAU  4 136.75                                             prints of T. officinale
                                                                       RSD,%                    RSD,%
         2 047.13
                                                            峰号                      峰号
                                                                 相对保留时间    相对峰面积           相对保留时间   相对峰面积
                                                      S1    1      0.53     59.68    8       0.54     81.45
          -2.489
              0    8.70  17.39  26.09  34.79  43.49  52.18  60.00  2  0.94  68.50    9       0.49     84.11
                                  t,min                     3      0.82     31.48   10       0.20     50.57
                              A.样品叠加图谱
                                                            4      0.52     108.85  11       0.54     95.00
                                                            5      0.38     72.32   12       0.40     53.37
         1 032.50
                                                            6      0.47     97.46   13       0.66    110.14
                                                            7(S)   0.0       0.0    14       0.70    125.57
          773.76
                                                           3 主成分分析
         mAU  5.5.01                                           采用 SPSS 22.0 软件,将符合 2020 年版《中国药典》
                                                           标准(按干燥品计算,蒲公英药材中菊苣酸的含量不得
          256.26
                                                                     [2]
                                                           低于0.45% )的25批药材中的浸出物、总黄酮和4种酚
                                                      R
          -2.48                                            酸类化合物共7个指标性成分的定量结果组成矩阵,数
              0    8.70  17.39  26.09  34.79  43.49  52.18  60.00
                                  t,min                    据经标准化处理后进行主成分分析,提取特征值>1 的
                              B.对照图谱(R)                    主成分。结果,所提取的主成分累计方差贡献率达到
           注:S1~S42表示编号为甘肃1~陕西42的样品                        85.071%(表 7),说明其在评价不同产地蒲公英药材样
           Note:S1-S42 mean samples of No. Gansu 1-Shaanxi 42                      [16]
                                                           品质量的优劣中起主导作用 。
              图2   42批蒲公英药材的HPLC指纹图谱
                                                           表7    蒲公英药材含量测定主成分的特征值及累计方差
        Fig 2  HPLC fingerprints of 42 batches of T. officinale
                                                                 贡献率
        2.4.4  指纹图谱的建立及共有峰的指认                取 42 批蒲公      Tab 7 Eigen values of principal components and cu-
        英药材样品,按“2.3.3”项下方法制备供试品溶液,再按                              mulative variance contribution rate of content
       “2.3.1”项下色谱条件进样测定,记录色谱图。将所得数                               determination of T. officinale
        据导入《中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012 版)》                        主成分       特征值           方差贡献率,%      累计方差贡献率,%
        软件进行分析,生成样品叠加图谱和对照图谱(R),如图                          1         4.113           58.759        58.759
        2所示。因为7号峰的峰面积大、占总峰面积比例高、可                           2         1.842           26.312        85.071
        辨识度好,具有代表性,故以该峰为参照峰(S),共标示                             利用2个主成分对不同产地的蒲公英药材样品进行
        出 14 个共有峰,其峰面积之和占总峰面积的 90%以                        评价。以各成分因子得分与权重系数乘积之和计算样
        上。通过与混合对照品图谱(图1B)中的保留时间比对,                         品中7个指标性成分的总因子得分值(F),以F值的大小
                                                                                [17]
        指认出 4 个共有峰,其中 3 号峰为绿原酸、4 号峰为咖啡                     评价各样品的质量优劣 ,F值越大,说明样品综合质量
        酸、7 号峰为菊苣酸、9 号峰为异绿原酸 A。42 批蒲公英                     越好。权重系数为各主成分的方差贡献率与2个主成分
        药材共有峰相对保留时间的 RSD 为 0~0.94%,相对峰                     的总方差贡献率之比。通过计算得到第1、2主成分的权
        面积的RSD为0~125.57%(表6),说明各批次蒲公英药                     重系数依次为 0.691、0.309,再结合特征向量,得到主成
        材中各组分的含量存在明显差异,这可能是由于不同产                           分线性组合表达式 F=0.691F1+0.309F2 (为消除负值影
        地的种植方式、气候条件以及加工储存方式不同而导                            响,F1、F2进行坐标平移2个单位),从而计算出不同产地
        致的。                                                蒲公英药材的F值,并对其进行排序(表8)。由表8可以
        2.4.5  相似度评价      采用《中药色谱指纹图谱相似度评                  看出,陕西所产蒲公英药材的综合质量较优,河北所产
        价系统(2012 版)》软件对 42 批蒲公英药材样品图谱与                     蒲公英药材的综合质量仅次于陕西产药材;其余产地的
        对照图谱(R)进行相似度分析,其中有39批样品的相似                         蒲公英药材综合质量相对较差,且同一产地不同批次间
        度>0.900,只有 3 批样品(湖北 19、山西 20、山西 25)的               的药材质量不稳定。
        相似度较低(分别为0.892、0.778、0.778),说明虽然不同                 4 讨论
        批次蒲公英样品各组分含量存在一定的差异,但不同组                               本研究以2020年版《中国药典》为基准,对8个产地


        中国药房    2021年第32卷第7期                                               China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 7  ·823 ·
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