Page 59 - 《中国药房》2021年07期

表2 42批蒲公英药材的浸出物含量测定结果（n＝3，％％） 表3 42批蒲公英药材中总黄酮和4种酚酸类成分的含
Tab 2 Results of content determination of the extract 量测定结果（n＝3，％％）
from 42 batches of T. officinale（n＝3，％％） Tab 3 Results of content determination of total flavo-
样品 醇溶性 水溶性 样品 醇溶性 水溶性 样品 醇溶性 水溶性 noids and 4 phenolic acids in 42 batches of T.
编号 浸出物 浸出物 编号 浸出物 浸出物 编号 浸出物 浸出物 officinale（n＝3，％％）
甘肃1 18.78 31.22 湖北15 21.96 34.18 河北29 27.91 34.11
甘肃2 24.17 37.20 湖北16 23.85 29.22 河北30 30.40 38.96 样品 总黄酮 绿原酸 咖啡酸 菊苣酸 异绿原 样品 总黄酮 绿原酸 咖啡酸 菊苣酸 异绿原
甘肃3 25.74 38.62 湖北17 22.32 28.95 安徽31 15.30 30.14 编号 酸A 编号 酸A
甘肃4 25.76 38.22 湖北18 22.70 35.28 安徽32 16.63 31.01 甘肃1 1.528 0.017 0.050 0.168 0.034 山西22 2.245 0.038 0.055 0.680 0.043
甘肃5 23.43 36.19 湖北19 21.14 34.82 安徽33 21.97 34.48 甘肃2 2.046 0.059 0.029 0.534 0.044 山西23 2.672 0.059 0.035 0.813 0.037
甘肃6 20.36 33.18 山西20 18.81 32.87 江苏34 21.28 34.28 甘肃3 2.307 0.036 0.075 0.598 0.043 山西24 1.418 0.056 0.050 0.749 0.037
甘肃7 25.39 38.24 山西21 23.69 35.25 江苏35 21.08 33.15 甘肃4 1.996 0.040 0.039 0.545 0.028 山西25 2.743 0.016 0.061 0.137 0.030
河南8 18.48 27.59 山西22 26.59 38.69 江苏36 21.34 33.28 甘肃5 1.868 0.040 0.064 0.370 0.038 河北26 2.793 0.050 0.034 0.882 0.045
河南9 27.05 37.95 山西23 23.94 35.82 江苏37 19.11 31.00 甘肃6 1.446 0.016 0.036 0.141 0.021 河北27 2.547 0.060 0.035 1.054 0.050
河南10 22.14 30.47 山西24 27.36 38.22 江苏38 20.29 32.85 甘肃7 1.433 0.029 0.087 0.391 0.043 河北28 2.931 0.062 0.031 0.935 0.060
河南11 23.34 36.85 山西25 20.10 33.18 江苏39 20.51 31.91 河南8 2.365 0.026 0.023 0.329 0.016 河北29 2.592 0.075 0.036 0.833 0.054
河南12 23.69 32.35 河北26 29.11 36.25 陕西40 25.66 38.29 河南9 1.331 0.054 0.060 0.607 0.029 河北30 1.181 0.059 0.028 0.900 0.051
河南13 17.50 38.09 河北27 28.67 38.51 陕西41 23.29 36.25 河南10 1.653 0.032 0.038 0.345 0.015 安徽31 0.734 0.013 0.032 0.208 0.008
湖北14 21.38 28.12 河北28 29.82 36.51 陕西42 25.81 36.44 河南11 1.474 0.026 0.056 0.400 0.016 安徽32 1.440 0.004 0.013 0.073 0.006
河南12 1.060 0.046 0.029 0.524 0.012 安徽33 2.005 0.020 0.039 0.288 0.009
共 6 份，分别按“2.2.2”项下方法制备供试品溶液，再按
河南13 1.219 0.007 0.010 0.077 0.005 江苏34 2.117 0.036 0.006 0.713 0.032
“2.2.3”项下方法测定吸光度，并采用标准曲线法计算总 湖北14 1.839 0.014 0.041 0.156 0.025 江苏35 1.990 0.051 0.009 0.667 0.047
黄酮（以芦丁计）的含量。结果，总黄酮含量的 RSD＝ 湖北15 1.793 0.039 0.023 0.594 0.023 江苏36 1.855 0.026 0.012 0.610 0.043
湖北16 1.529 0.053 0.024 0.700 0.023 江苏37 2.130 0.029 0.012 0.670 0.019
0.97％（n＝6），表明该方法重复性良好。
湖北17 1.410 0.040 0.032 0.460 0.022 江苏38 1.812 0.028 0.011 0.572 0.029
2.2.8 加样回收率试验 取样品（编号为甘肃7）粉末适 湖北18 1.465 0.037 0.029 0.379 0.014 江苏39 2.871 0.022 0.006 0.566 0.019
量，共 6 份，分别加入与其总黄酮含量相当的对照品溶 湖北19 1.250 0.024 0.063 0.188 0.018 陕西40 2.416 0.123 0.011 1.281 0.096
液，按“2.2.2”项下方法制备供试品溶液，再按“2.2.3”项 山西20 1.972 0.006 0.027 0.081 0.020 陕西41 3.700 0.095 0.008 1.499 0.109
山西21 2.473 0.041 0.045 0.361 0.052 陕西42 2.627 0.053 0.016 0.988 0.081
下方法测定吸光度，计算其总黄酮含量和加样回收率。
均值 1.959 0.039 0.034 0.548 0.034
结果，平均加样回收率为101.8％，RSD＝0.59％（n＝6），
表4 蒲公英药材中4种酚酸类成分HPLC含量测定的
表明该方法准确度良好。
流动相梯度洗脱程序
2.2.9 总黄酮的含量测定 取42批蒲公英药材样品，分
Tab 4 Mobile phase gradient elution program for
别按“2.2.2”项下方法制备供试品溶液，再按“2.2.3”项下
HPLC content determination of 4 phenolic
方法测定吸光度，采用标准曲线法计算其总黄酮含量。
acids in T. officinale
每批样品平行测定 3 次，取均值。结果，42 批蒲公英药
材中总黄酮的含量为0.734％～3.700％，均值为1.959％ 时间 ，min 流动相A，％ 流动相B，％
0 9 91
（表 3）。拟定以干燥品计算，蒲公英药材中总黄酮的含 10 9 91
量不得低于1.383％。 20 12 88
2.3 绿原酸、咖啡酸、菊苣酸和异绿原酸A的含量测定 36 18 82
40 20 80
采用HPLC法测定蒲公英药材中绿原酸、咖啡酸、菊
50 50 50
苣酸和异绿原酸A的含量。
的质量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
2.3.1 色 谱 条 件 色 谱 柱 为 XTERRA MS C18 （250 2.3.4 系统适用性试验 精密吸取“2.3.2”项下对照品
®
mm×4.6 mm，5 μm）；流动相为乙腈（A）-0.1％磷酸溶液
溶液与“2.3.3”项下供试品溶液各 10 μL，按“2.3.1”项下
（B），梯度洗脱（表 4）；检测波长为 325 nm；流速为 1.0 色谱条件进样测定，记录色谱图（图1）。结果显示，理论
mL/min；柱温为40 ℃；进样量为10 μL。 板数按咖啡酸峰计算不低于3 000，4种酚酸类成分色谱
2.3.2 混合对照品溶液的制备 精密称取绿原酸、咖啡 峰的分离度均大于1.5、拖尾因子为0.95～1.05。
酸、菊苣酸和异绿原酸 A 对照品各适量，加甲醇制成每 2.3.5 线性关系考察 取“2.3.2”项下混合对照品溶液，
1 mL 含 0.196 mg 绿原酸、0.117 mg 咖啡酸、1.578 mg 菊 用甲醇稀释成绿原酸质量浓度依次为 0.098、0.049、
苣酸和 0.152 mg 异绿原酸 A 的混合对照品溶液，摇匀， 0.025、0.012、0.006、0.003 mg/mL，咖啡酸质量浓度依次
即得。 为 0.059、0.029、0.015、0.007、0.004、0.002 mg/mL，菊苣
2.3.3 供试品溶液的制备 精密称取样品粉末（过三号 酸 质 量 浓 度 依 次 为 0.789、0.395、0.197、0.099、0.049、
筛，下同）约 1 g，加入 80％甲醇 10 mL，称定质量，超声 0.025 mg/mL，异绿原酸A质量浓度依次为0.076、0.038、
（功率250 W，频率40 kHz）60 min，用80％甲醇补足减失 0.019、0.010、0.005、0.002 mg/mL 的梯度浓度混合对照

中国药房 2021年第32卷第7期 China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 7 ·821 ·