Page 38 - 《中国药房》2021年第4期

录峰面积，代入回归方程计算含量；同法考察按“2.6”项 240
下方法处理后于自动进样器放置 12 h 的含量。每质量
200 实验组
浓度样品平行制备3份，以RE考察各样品的稳定性，结 对照组
果见表3。 160
表2 吡嗪酰胺和吡嗪酸的基质效应考察结果（n＝6）
Tab 2 Results of matrix effect of pyrazinamide and c，g/mL μ 120
pyrazinoic acid（n＝6） 80
分析物 理论质量浓度，ng/mL 内标归一化基质因子，％ RSD，％
40
吡嗪酰胺 50.00 94.82 7.15
4 000.00 93.54 3.56
0
吡嗪酸 200.00 94.94 2.83
0 5 10 15 20 25
10 000.00 94.43 2.43 t，min
表3 吡嗪酰胺和吡嗪酸的稳定性试验结果（n＝3） A.吡嗪酰胺
100
Tab 3 Results of stability tests of pyrazinamide and
pyrazinoic acid（n＝3） 80 实验组
对照组
分析物 储存条件 理论质量浓度，ng/mL 实测质量浓度，ng/mL RE，％
吡嗪酰胺 室温4 h 50.00 54.63 9.33 60
4 000.00 3 850.00 －3.70 c，g/mL
冻融3次 50.00 52.77 5.33 μ
4 000.00 3 850.00 －3.73 40
－40 ℃，30 d 50.00 51.87 3.50
4 000.00 3 803.33 －4.87 20
自动进样器12 h 50.00 52.93 5.67
4 000.00 3 920.00 －2.10
0
吡嗪酸 室温4 h 200.00 219.00 9.50 0 5 10 15 20 25
10 000.00 10 600.00 6.00 t，min
冻融循环3次 200.00 213.00 6.33 B.吡嗪酸
10 000.00 10 333.33 3.33 图 3 两组大鼠体内吡嗪酰胺和吡嗪酸的药-时曲线
－40 ℃，30 d 200.00 214.00 7.00 （n＝8）
10 000.00 10 213.33 2.13
自动进样器12 h 200.00 207.00 3.53 Fig 3 Mean plasma concentration-time curves of
10 000.00 10 600.00 6.00 pyrazinamide and pyrazinoic acid in rats of 2
2.8 药动学研究 groups（n＝8）
2.8.1 药-时曲线的绘制 将16只SD大鼠按“2.5”项下 果，与对照组比较，实验组大鼠吡嗪酰胺的tmax显著延长
方法分组、造模、给药，分别于给药前（0 h）和给药后 （P＜0.01）；而其他药动学参数组间比较差异均无统计
0.167、0.333、0.667、1、1.5、2、3、4、6、9 h 时从眼眶静脉丛 学意义（P＞0.05），详见表4。
采血约 0.1 mL，给药后 12、24 h 时从眼眶静脉丛采血约 表 4 两组大鼠体内吡嗪酰胺和吡嗪酸的药动学参数
0.3 mL 置于肝素钠抗凝离心管中，于 4 ℃下以 4 700×g
（x±±s，n＝8）
离心 10 min，取上层血浆，于－40 ℃冻存。将上述血浆 Tab 4 Pharmacokinetic parameters of pyrazinamide
样品分别按“2.6”项下方法处理后，再按“2.1”项下色谱
and pyrazinoic acid in rats（x±±s，n＝8）
与质谱条件进样分析，测定血浆中吡嗪酰胺和吡嗪酸的
吡嗪酰胺 吡嗪酸
浓度，其中0.167、0.333、0.667、1、1.5、2、3、4、6 h等9个时 参数
对照组 实验组 对照组 实验组
间点的血浆样品用大鼠空白血浆进行 50 倍稀释，9 h 时 cmax，μg/mL 170.86±40.69 148.12±10.90 66.39±26.21 57.10±9.94
的血浆样品进行 10 倍稀释。以 Origin 2019b 软件绘制 tmax，h 0.54±0.17 1.23±0.47 ＊ 1.94±0.49 2.25±0.84
吡嗪酰胺和吡嗪酸在大鼠体内的药-时曲线（给药前的 t1/2，h 1.31±0.05 1.34±0.03 1.30±0.32 1.48±0.28
AUC0-24 h，μg·h/mL 629.09±216.64 650.65±54.88 285.10±132.94 275.66±40.35
血浆样品是为了考察内源性杂质是否影响药物出峰，不 AUC0-∞，μg·h/mL 629.09±216.64 650.66±54.88 285.01±132.94 275.68±40.04
计入药-时曲线），结果见图3。 CLz/F，L/（h·kg） 0.03 0.02 0.06 0.05
2.8.2 药动学参数的计算 使用DAS 2.1.1软件计算实 Vz/F，L/kg 0.05 0.04 0.10 0.12
＊
验组和对照组大鼠体内吡嗪酰胺和吡嗪酸的主要药动 注：与对照组比较，P＜0.01
＊
学参数，使用 SPSS 26.0 软件进行统计分析。当数据符 Note：vs. control group，P＜0.01
合正态分布时，以 x±s 表示，两两比较采用 t 检验；当数 3 讨论
据不符合正态分布时，以中位数表示，两两比较采用非 3.1 含量测定方法的建立
参数秩和检验。P＜0.05 表示差异有统计学意义。结 本文参考同时测定大鼠血浆中吡嗪酰胺及其活性

·416 · China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 4 中国药房 2021年第32卷第4期