Page 71 - 《中国药房》2021年3期

KEYWORDS Ligustrazine opthalmic liposome；Thermosensitive gel；Preparation technology； in vitro drug release；Human
corneal epithelial cell HCE-T；Eye irritation；Corneal histology

川芎嗪（Ligustrazine）即四甲基吡嗪（Tetramethyl- 芝生物科技股份有限公司）、HH-4 型数显恒温水浴锅
pyrazine，TMP），是 中 药 川 芎（Ligusticum chuanxiong （常州澳华仪器有限公司）、DF-101S型集热式恒温加热
Hort.）的主要有效成分。传统医学认为，川芎味辛，性 磁力搅拌器（郑州汇成科工贸有限公司）、RE-2000B 型
温，归肝、胆、心经，具有活血祛瘀、行气开郁的功效；其 旋转蒸发仪（上海亚荣生化仪器厂）、Ymnl-1000Y 型超
药效主要包括活血与行气两方面，其中活血功效最为关 声波细胞粉碎机（南京以马内利仪器设备有限公司）、
键，符合中医眼疾治则，而其有效成分制剂川芎嗪注射 UPH-Ⅱ-10T 型超纯水制造系统（四川优普超纯科技有
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液可用于临床治疗视网膜相关疾病 。现代药理研究表 限公司）、Tecnai G2 F20 S型透射电镜（TEM，美国FEI公
明，川芎嗪具有抗炎、抗氧化、增强心肌收缩力、减少脑 司）。
损伤、保护冠状动脉、抗血栓等多种药理活性 [2－7] 。近年 1.2 主要药品与试剂
来，研究人员发现川芎嗪具有抗血管内皮生长因子 本研究使用的主要药品与试剂有：川芎嗪对照品[萨
（VEGF）、抑制眼部新生血管等作用 [8－9] ，可用于眼部新 恩化学技术（上海）有限公司，批号 EH230112，纯度≥
生血管疾病的防治。然而，眼是一个相对独立的器官， 99％]，卵磷脂[分析纯，阿拉丁试剂（上海）有限公司，批
其解剖结构含有无血成分和中枢神经系统成分等，其特 号 D1918047]，胆固醇、泊洛沙姆 P407（分析纯，大连美
殊的生理屏障大大限制了药物的有效传递 ，因此亟需 仑生物技术有限公司，批号分别为 F0119A、J0102A），
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寻找一种新型眼用给药系统来提高眼部递药效率和生 L-氧化型谷胱甘肽、二水氯化钙（上海源叶生物科技有
物利用度。 限公司，批号分别为Q14D9J77577、Z01M10Y81919），磷
有研究者制备了川芎嗪脂质体并发现其可持续释 酸盐缓冲溶液（PBS，pH 6.8）、胰蛋白酶、DMEM 高糖培
放药物到达角膜或结膜，但由于角膜屏障的存在，同时 养基[赛默飞世尔科技（中国）有限公司，批号分别为
受泪液冲刷的影响，大多数药物会随着眼泪排出，余下 8119056、8119244、8119181]，胎牛血清（FBS）、青霉素-
药物则部分进入鼻泪管、部分经过结膜入血进入体循 链霉素双抗（浙江天杭生物科技股份有限公司，批号分
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环 。因此，单独使用脂质体递药存在眼部滞留时间 别为19030604、J180025），MTT试剂盒（上海碧云天生物
短、生物利用度低等问题，只能通过增加给药次数和提 技术有限公司，批号 042319190619），2％磷钨酸负染色
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高药物浓度来达到治疗效果 ，患者使用不便，易产生 液（北京索莱宝科技有限公司），苏木素-伊红（HE）染色
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全身毒副作用 。脂质体温敏凝胶剂（Liposome thermo- 液（北京世济合力生物科技有限公司），二甲基亚砜（武
sensitive gel）是一种新型复合剂型，是将脂质体分散在 汉博士德生物工程有限公司），硫酸铵、氯化钠、氯化镁、
凝胶基质中形成的新型复合凝胶，常温下为液态，若给 三氯甲烷、葡萄糖、碳酸氢钠、氯化钾、磷酸二氢钾、生理
药部位温度高于胶凝温度，可立即转为非化学交联的半 盐水、二甲苯、无水乙醇等（成都市科隆化学品有限公
固定凝胶，这样不仅能保持脂质体自身固有特性，还能 司），超纯水。
延长脂质体在角膜上的滞留时间，从而延缓药物释放、 1.3 动物
增强药物吸收 。泊洛沙姆 P407 是一种具有良好的生 本研究所用动物为新西兰大白兔，雄性，体质量
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物相容性和缓释性、局部惰性、低毒性并易与其它剂型 2.0～2.5 kg，由成都达硕实验动物有限公司提供，动物生
配伍的温度敏感材料，常在外用溶液中作为凝胶基质使 产许可证号为SCXK（川）2020-030。
用 。笔者以泊洛沙姆 P407 作为凝胶基质制备川芎嗪 1.4 细胞
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眼用脂质体温敏凝胶，以期提高药物在眼部的传递效 本研究所用细胞为人角膜上皮细胞HCE-T，由北京
率，延长药物作用时间，减少给药次数，改善患者顺应 北纳创联生物技术研究院提供。
性，提高药物的生物利用度。 2 方法与结果
1 材料 2.1 川芎嗪的含量测定
1.1 主要仪器 2.1.1 色谱条件 色谱柱为 Agilent Zorbax SB-C18 （250
本研究使用的主要仪器有：1100 型高效液相色谱 mm×4.6 mm，5 μm），流动相为乙腈-水（90 ∶ 10，V/V），检
（HPLC）仪（美国 Agilent 公司）、ZEN3600 型纳米粒度仪 测波长为 280 nm，流速为 0.8 mL/min，柱温为 30 ℃，进
（英国 Malvern 公司）、改良 Franz 扩散池（上海锴凯科技 样量为10 μL。
贸易有限公司）、CPA225D 型十万分之一电子分析天平 2.1.2 含量测定 精密称取川芎嗪对照品10.23 mg，置
（德国 Sartorius 公司）、KMH1 型超声波清洗机（宁波新 于10 mL量瓶中，加甲醇超声（频率40 kHz，功率100 W）

中国药房 2021年第32卷第3期 China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 3 ·321 ·