Page 74 - 《中国药房》2021年3期
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胶凝。向该西林瓶中加入同温度的人工泪液2 mL，在一                          回归，得回归方程为Y＝0.917 7X+5.605 2（R ＝0.993 4），
                                                                                                 2
        定频率（10 kHz）下恒温振荡20 min后立即取出，倒出人                     说明两者相关性良好，该凝胶的体外释药主要与其溶蚀
        工泪液，将瓶拭干后迅速称质量。重新将西林瓶放入恒                            相关。
        温水浴锅中平衡温度，补充同温度的人工泪液至初始质                            2.8 不同川芎嗪制剂的离体角膜透过性实验
        量，继续振荡 20 min。如此反复操作，直至剩余凝胶质                        2.8.1  谷胱甘肽-碳酸氢钠林格溶液（GBR溶液）的配制
        量不足起始量的 10％为止。平行测定 3 次。相邻时间                           A溶液：称取氯化钠12.49 g、氯化钾0.716 g、磷酸二氢
        点的瓶内剩余凝胶质量差即为此期间凝胶溶蚀量，凝胶                            钾 0.206 g、碳酸氢钠 4.908 g，加水溶解并定容至 1 000
        溶蚀率＝凝胶溶蚀量/初始质量。以凝胶溶蚀率（Y）为                           mL；B 溶液：称取氯化钙 0.23 g、氯化镁 0.318 g、葡萄糖
        纵坐标、时间（X）为横坐标绘制凝胶溶蚀曲线，详见图                           1.80 g、L-氧化型谷胱甘肽 0.184 g，加水溶解并定容至
        3。由图3可知，川芎嗪眼用脂质体温敏凝胶的溶蚀呈零                           1 000 mL；A、B 溶液均于 4 ℃贮存，临用时按 1 ∶ 1（V/V）
        级动力学特征，计算得回归方程为Y＝0.280 5X+2.100 8                   比例配制成GBR溶液，现配现用 。
                                                                                        [22]
           2
        （R ＝0.998 6）。                                       2.8.2  离体角膜的准备         耳缘静脉注射空气处死家兔
                  100                                       后20 min内开始实验：摘除眼球，冲去表面附着的血块，
                  80                                        置于 35 ℃的 GBR 溶液（于水浴锅中放置 30 min 使温度
                 ％  60                                      维持在35 ℃）中以保存离体角膜活性；清除巩膜表面的
                 凝胶溶蚀率，  40                                 动眼肌和睑结膜附属组织，由视神经纵向前剖开眼球，


                  20                                        至距角膜边缘约2 mm的巩膜处横切，分离角膜，除去晶
                                                            状体、玻璃体等眼球后部组织，用眼科镊子轻轻剥离虹
                   0
                    0  40  80  120 160 200 240 280 320 360 400  膜、睫状体，得到带有2 mm巩膜环的角膜，用GBR溶液
                                时间，min
                                                            淋洗3次，备用。
          图3 川芎嗪眼用脂质体温敏凝胶的溶蚀曲线（n＝3）                         2.8.3  离体角膜透过性实验           取“2.8.2”项下准备好的
        Fig 3  Dissolution curve of Ligustrazine opthalmic li-
                                                            离体角膜，固定于改良 Franz 扩散池的供给池和接受池
               posome thermosensitive gel（n＝3）
                                                            之间，将角膜上皮层面向供给池；接受池内装满人工泪
            分别吸取上述凝胶溶蚀曲线每个时间点对应的人                           液（内含一个搅拌子）。在供给池内先加入恒温35 ℃的
        工泪液 1 mL 至 10 mL 量瓶中，以甲醇超声（频率 40                    人工泪液 50 μL 以模拟眼部湿润环境，再分别加入 pH
        kHz，功率 100 W）破乳并定容，经 0.22 μｍ微孔滤膜滤                   6.8 的川芎嗪水溶液（取川芎嗪对照品适量加入含 0.1％
        过，按“2.1.1”项下色谱条件测定人工泪液中川芎嗪的含                        二甲亚砜的 PBS 溶液，制得 1.00 mg/mL 的川芎嗪水溶
        量，平行测定3次。以某时间点累计释放药物总量除以                            液）、川芎嗪脂质体、川芎嗪眼用脂质体温敏凝胶各 0.5
        加入药物总量可得该时间点的体外累计释放率，再以体                            mL，将整个装置置于（35±1）℃的恒温磁力搅拌器上搅
        外累计释放率（Y）为纵坐标、时间（X）为横坐标绘制体外                         拌并开始计时，分别于 1、2、3、4、5、6 h 时从接受池取样
        释药曲线，详见图4。由图4可知，川芎嗪眼用脂质体温                           0.65 mL（同时补加等体积同温度的人工泪液）。从接受
        敏凝胶的体外释药亦呈零级动力学特征，计算得回归方                            池取出的样品经甲醇（取样液与甲醇体积比为1∶1）破乳
        程为Y＝0.256 8X+7.630 8（R ＝0.987 6）。                   并经 0.22 μm 微孔滤膜滤过后，按“2.1.1”项下色谱条件
                                2
                  100
                                                            进样分析，平行 3 次，记录峰面积，代入“2.1.2”项下回归
                  80                                        方程计算待测样品中川芎嗪的质量浓度，再分别按下述
                 ％                                          公式计算各样品的累计透过量（Qn ）：
                 体外累计释放率，  60                                   Qn＝V0 （cn+  V n－1       n－1
                  40
                                                                            ∑ci ）＝V0cn+V ∑ci
                  20                                                      V0  i＝1        i＝1
                                                                式中，V0为接受池中溶液体积，cn 为t时间下测定的
                   0
                    0  40  80  120 160 200 240 280 320 360 400  药物浓度，V为取样体积，ci 为第i个（i＝n－1）时间点测
                                时间，min
                                                            定的药物浓度。以累计透过量对时间作图，详见图 5。
        图 4   川芎嗪眼用脂质体温敏凝胶的体外释药曲线
                                                            由图5可知，川芎嗪水溶液在前3 h透过离体角膜较快，
             （n＝3）
                                                            3 h后透过速率降低，6 h内累计透过量为56.8％；川芎嗪
        Fig 4 in vitro drug release curves of Ligustrazine op-
                                                            脂质体总体上以恒定的速率（即曲线斜率）透过离体角
               thalmic liposome thermosensitive gel（n＝3）
                                                            膜；川芎嗪眼用脂质体温敏凝胶的透过速率较脂质体和
            以凝胶溶蚀率（Y）对体外累计释放率（X）进行线性                        水溶液更慢，6 h 内累计透过量为 43.3％，且实验结束时


        ·324 ·  China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 3                                    中国药房    2021年第32卷第3期
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