Page 72 - 《中国药房》2021年3期

溶解并定容，得川芎嗪对照品贮备液。分别精密量取 2.3 川芎嗪脂质体制备工艺考察
0.05、0.10、0.15、0.20、0.25、0.30 mL 对照品贮备液置于 2.3.1 单因素试验 以包封率为指标，按“2.2”项下方法
10 mL量瓶中，加甲醇定容，制成系列对照品溶液；摇匀， 考察药脂比（1 ∶ 5、1 ∶ 10、1 ∶ 15、1 ∶ 20，m/m）、孵育温度
各取1 mL，以0.22 µm微孔滤膜滤过后取续滤液10 µL， （25、35、45、55 ℃）、孵育时间（10、20、30、40 min）、硫酸
按上述色谱条件进样测定，记录峰面积。以峰面积（Y） 铵溶液浓度（0.1、0.2、0.3、0.4 mol/L）、卵磷脂与胆固醇质
对川芎嗪质量浓度（X）进行线性回归，得回归方程为Y＝ 量比（1 ∶ 1、2 ∶ 1、3 ∶ 1、4 ∶ 1）、磷脂质量分数（0.8％、1.0％、
13 532X－10 531（R ＝0.999 5）。结果表明，川芎嗪的质 1.2％、1.5％）、超声功率（300、400、500、600 W）和超声时
2
量浓度在 5.08～30.48 µg/mL 范围内与其峰面积线性关 间（2、4、6、8 min）等因素对川芎嗪脂质体包封率的影
系良好。 响[包封率（％）＝W 包封/W 总量×100％，式中 W 包封为被脂质
分别取川芎嗪对照品溶液、川芎嗪眼用脂质体温敏 体包封的药物量，W 总量为实际加入的总药物量]。结果，
凝胶、人工泪液（空白）各 1 mL，以 0.22 µm 微孔滤膜滤 在药脂比为 1 ∶ 15（m/m）、孵育温度为 45 ℃、孵育时间为
过后取续滤液10 µL，按上述色谱条件进样测定，记录色 20 min、硫酸铵溶液浓度为 0.3 mol/L、卵磷脂与胆固醇
谱图。结果可得，川芎嗪的保留时间约为 3.8 min，理论 质量比为 4 ∶ 1、磷脂质量分数为 1.2％、超声功率为 400
板数按川芎嗪峰计算应不低于3 000，空白无干扰，详见 W、超声时间为2 min时，所制脂质体包封率较高。
图1。 2.3.2 正交试验 根据单因素试验结果，选择对包封率
100 影响较大的因素[药脂比（A）、硫酸铵浓度（B）、卵磷脂与
75 4
mV 50 胆固醇质量比（C）、孵育温度（D）]设计 L9 （3）正交试
U，
25 验。川芎嗪脂质体制备工艺的正交试验因素与水平见
0 表1；正交试验设计及结果见表2；方差分析结果见表3。
0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5 4.0 4.5 5.0 5.5
t，min 表1 川芎嗪脂质体制备工艺的正交试验因素与水平
A.川芎嗪对照品
Tab 1 Orthogonal experiment factors and levels of
100
75 preparation technology of Ligustrazine opthal-
mV 50
U， mic liposome
25
因素
0 水平
0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5 4.0 4.5 5.0 5.5 A（m/m） B，mol/L C D，℃
t，min 1 1∶10 0.1 2∶1 25
B.川芎嗪眼用脂质体温敏凝胶 2 1∶12 0.2 3∶1 35
100
3 1∶15 0.3 4∶1 45
75
mV 50 表2 川芎嗪脂质体制备工艺的正交试验设计及结果
U，
25 Tab 2 Orthogonal experiment design and results of
0 preparation technology of Ligustrazine opthal-
0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5 4.0 4.5 5.0 5.5
t，min mic liposome
C.人工泪液（空白）
因素
图1 川芎嗪含量测定的HPLC图 试验号 包封率，％
A（m/m） B，mol/L C D，℃
Fig 1 HPLC chromatogram of content determination 1 1∶10 0.1 2∶1 25 8.12
of ligustrazine 2 1∶10 0.2 3∶1 35 16.58
3 1∶10 0.3 4∶1 45 17.20
2.2 川芎嗪脂质体的制备 4 1∶12 0.1 3∶1 45 7.64
根据川芎嗪的理化性质，采用硫酸铵梯度法制备川 5 1∶12 0.2 4∶1 25 14.88
6 1∶12 0.3 2∶1 35 9.03
芎嗪脂质体 [16－17] 。精密称取处方量的卵磷脂、胆固醇置
7 1∶15 0.1 4∶1 35 10.91
于 250 mL 茄形瓶中，加入约 10 mL 三氯甲烷溶解，于 8 1∶15 0.2 2∶1 45 13.82
37 ℃水浴减压旋蒸形成均匀薄膜，再加入8 mL 0.2 mol/L 9 1∶15 0.3 3∶1 25 11.15
13.967 8.890 10.323 11.383
的硫酸铵溶液，水化脱膜形成多室脂质体后置于冰浴 K1
K2 10.517 15.093 11.790 12.173
（0±0.5）℃中超声2 min（功率400 W，频率40 kHz，每超
K3 11.960 12.460 14.330 12.887
声 3 s 后暂停 3 s），然后装入透析袋于生理盐水中透析 R 3.45 6.20 4.00 1.50
24 h，每隔4 h更换生理盐水，得到空白脂质体。在空白 由表1、表2可知，各因素对川芎嗪包封率影响的大
脂质体中按一定药脂比[即川芎嗪与脂类（磷脂和胆固 小顺序为：B＞C＞A＞D，即硫酸铵浓度＞卵磷脂与胆固
醇）的质量比]加入川芎嗪对照品溶液，于 45 ℃下孵育 醇质量比＞药脂比＞孵育温度。由表 3 可知，4 种因素
20 min，得到川芎嗪脂质体。 对川芎嗪包封率均无显著性影响（P＞0.05）。结合表

·322 · China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 3 中国药房 2021年第32卷第3期