Page 115 - 《中国药房》2021年2期
P. 115
后,进行加热变性处理。取变性蛋白适量,进行 10%十 (P<0.05),详见表2。
二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE),转
膜,于 4 ℃下用 5%脱脂奶粉封闭 2 h;加入 NF-κB p65、
p-NF-κB p65、IκBα、p-IκBα一抗(稀释度 1 ∶ 1 000),于
4 ℃下孵育过夜;用 TBST 缓冲液洗膜,加入二抗(稀释
度 1 ∶ 2 000),室温孵育 2 h;用 TBST 缓冲液洗膜,采用
ECL 法曝光,在凝胶成像分析系统中进行成像、拍照。
A.正常对照组 B.模型组
用 Quantity One 4.6.6 软件分析各目标蛋白条带的灰度
值,分别计算 p-NF-κB p65/NF-κB p65 和 p-IκBα/IκBα条
带灰度值的比值,用以表示相应蛋白的磷酸化水平。
2.6 统计学方法
采用SPSS 19.0软件对数据进行统计分析。所有数
据均用x±s表示,组间比较采用t检验。P<0.05表示差
C.水飞蓟素组 D.滨蒿内酯高剂量组
异有统计学意义。
3 结果
3.1 滨蒿内酯对急性肝损伤模型小鼠血清中AST、ALT
活性的影响
与正常对照组比较,模型组小鼠血清中 AST、ALT
活性均显著升高(P<0.05);与模型组比较,水飞蓟素组
E.滨蒿内酯低剂量组
和滨蒿内酯高、低剂量组小鼠血清中 AST、ALT 活性均
图1 各组小鼠肝组织病理性改变的显微图(HE染色,×
显著降低(P<0.05),详见表1。
100)
表 1 各组小鼠血清中 AST、ALT 活性比较(x±±s,n=
Fig 1 Micrographs of pathological changes in liver tis-
10)
sue of mice in each group(HE staining,×100)
Tab 1 Comparison of serum activities of AST and
ALT in mice of each group(x±±s,n=10) 表 2 各组小鼠血清中 SOD、CAT 活性和 MDA 含量比
较(x±±s,n=10)
组别 剂量,mg/kg AST,U/L ALT,U/L
正常对照组 66.53±8.65 44.74±6.39 Tab 2 Comparison of SOD and CAT activities and
模型组 114.67±14.04 * 125.11±13.17 * MDA contents in serum of mice in each group
水飞蓟素组 120 82.32±11.54 # 87.59±10.34 # (x±±s,n=10)
滨蒿内酯高剂量组 60 93.96±10.83 # 95.47±12.30 #
滨蒿内酯低剂量组 30 98.40±12.72 # 102.62±9.41 # 组别 剂量,mg/kg SOD,U/L CAT,U/L MDA,nmol/L
正常对照组 19.45±2.56 35.09±5.12 12.69±1.73
#
注:与正常对照组比较,P<0.05;与模型组比较,P<0.05
*
模型组 9.76±1.15 * 14.51±2.44 * 40.51±6.12 *
*
#
Note:vs. normal control group, P<0.05;vs. model group,P<
水飞蓟素组 120 17.93±2.77 # 30.18±4.52 # 15.29±2.63 #
0.05
滨蒿内酯高剂量组 60 14.01±1.39 # 26.89±3.83 # 19.62±3.85 #
3.2 滨蒿内酯对急性肝损伤模型小鼠肝组织病理性改 滨蒿内酯低剂量组 30 13.28±2.03 # 22.43±3.18 # 24.16±2.70 #
变的影响 注:与正常对照组比较,P<0.05;与模型组比较,P<0.05
#
*
镜下可见,正常对照组小鼠肝细胞形态正常,肝小 Note:vs. normal control group, P<0.05;vs. model group,P<
*
#
叶结构清晰,肝细胞索规则排列,肝组织结构未见病理 0.05
性改变;模型组小鼠肝组织中炎性细胞浸润明显,肝细 3.4 滨蒿内酯对急性肝损伤模型小鼠血清中 IL-1β、
胞索排列紊乱,肝小叶界限模糊,肝组织结构可见明显 IL-6、TNF-α含量的影响
病理性改变;与模型组比较,水飞蓟素组和滨蒿内酯高、 与正常对照组比较,模型组小鼠血清 IL-1β、IL-6、
低剂量组小鼠肝组织病理性改变程度明显减轻,炎性细 TNF-α含量均显著升高(P<0.05);与模型组比较,水飞
胞浸润减少,肝细胞形态及肝小叶结构基本正常,结果 蓟素组和滨蒿内酯高、低剂量组小鼠血清中IL-1β、IL-6、
详见图1(图中箭头所指为炎性反应点)。 TNF-α含量均显著降低(P<0.05),详见表3。
3.3 滨蒿内酯对急性肝损伤模型小鼠血清中 SOD、 3.5 滨蒿内酯对急性肝损伤模型小鼠肝组织中 NF-κB
CAT活性及MDA含量的影响 通路相关蛋白表达的影响
与正常对照组比较,模型组小鼠血清中 SOD、CAT 与正常对照组比较,模型组小鼠肝组织中 NF-κB
活性均显著降低,MDA 含量显著升高(P<0.05);与模 p65和IκBα蛋白的磷酸化水平均显著升高(P<0.05);与
型组比较,水飞蓟素组和滨蒿内酯高、低剂量组小鼠血 模型组比较,水飞蓟素组及滨蒿内酯高、低剂量组小鼠
清中SOD、CAT活性均显著升高,MDA含量均显著降低 肝组织中 NF-κB p65 和 IκBα蛋白的磷酸化水平均显著
中国药房 2021年第32卷第2期 China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 2 ·233 ·