Page 115 - 《中国药房》2021年2期
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后,进行加热变性处理。取变性蛋白适量,进行 10%十                         (P<0.05),详见表2。
        二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE),转
        膜,于 4 ℃下用 5%脱脂奶粉封闭 2 h;加入 NF-κB p65、
        p-NF-κB p65、IκBα、p-IκBα一抗(稀释度 1 ∶ 1 000),于
        4 ℃下孵育过夜;用 TBST 缓冲液洗膜,加入二抗(稀释
        度 1 ∶ 2 000),室温孵育 2 h;用 TBST 缓冲液洗膜,采用
        ECL 法曝光,在凝胶成像分析系统中进行成像、拍照。
                                                                      A.正常对照组             B.模型组
        用 Quantity One 4.6.6 软件分析各目标蛋白条带的灰度
        值,分别计算 p-NF-κB p65/NF-κB p65 和 p-IκBα/IκBα条
        带灰度值的比值,用以表示相应蛋白的磷酸化水平。
        2.6 统计学方法
            采用SPSS 19.0软件对数据进行统计分析。所有数
        据均用x±s表示,组间比较采用t检验。P<0.05表示差
                                                                     C.水飞蓟素组          D.滨蒿内酯高剂量组
        异有统计学意义。
        3 结果
        3.1  滨蒿内酯对急性肝损伤模型小鼠血清中AST、ALT
        活性的影响
            与正常对照组比较,模型组小鼠血清中 AST、ALT
        活性均显著升高(P<0.05);与模型组比较,水飞蓟素组
                                                                             E.滨蒿内酯低剂量组
        和滨蒿内酯高、低剂量组小鼠血清中 AST、ALT 活性均
                                                           图1    各组小鼠肝组织病理性改变的显微图(HE染色,×
        显著降低(P<0.05),详见表1。
                                                                 100)
        表 1  各组小鼠血清中 AST、ALT 活性比较(x±±s,n=
                                                           Fig 1  Micrographs of pathological changes in liver tis-
             10)
                                                                  sue of mice in each group(HE staining,×100)
        Tab 1 Comparison of serum activities of AST and
               ALT in mice of each group(x±±s,n=10)        表 2   各组小鼠血清中 SOD、CAT 活性和 MDA 含量比
                                                                 较(x±±s,n=10)
        组别           剂量,mg/kg      AST,U/L     ALT,U/L
        正常对照组                     66.53±8.65   44.74±6.39  Tab 2   Comparison of SOD and CAT activities and
        模型组                      114.67±14.04 *  125.11±13.17 *    MDA contents in serum of mice in each group
        水飞蓟素组          120        82.32±11.54 #  87.59±10.34 #    (x±±s,n=10)
        滨蒿内酯高剂量组       60         93.96±10.83 #  95.47±12.30 #
        滨蒿内酯低剂量组       30         98.40±12.72 #  102.62±9.41 #  组别     剂量,mg/kg  SOD,U/L  CAT,U/L  MDA,nmol/L
                                                           正常对照组                19.45±2.56  35.09±5.12  12.69±1.73
                                            #
           注:与正常对照组比较,P<0.05;与模型组比较,P<0.05
                           *
                                                           模型组                   9.76±1.15 *  14.51±2.44 *  40.51±6.12 *
                                 *
                                                    #
           Note:vs. normal control group, P<0.05;vs. model group,P<
                                                           水飞蓟素组         120    17.93±2.77 #  30.18±4.52 #  15.29±2.63 #
        0.05
                                                           滨蒿内酯高剂量组      60     14.01±1.39 #  26.89±3.83 #  19.62±3.85 #
        3.2  滨蒿内酯对急性肝损伤模型小鼠肝组织病理性改                         滨蒿内酯低剂量组      30     13.28±2.03 #  22.43±3.18 #  24.16±2.70 #
        变的影响                                                   注:与正常对照组比较,P<0.05;与模型组比较,P<0.05
                                                                                                #
                                                                               *
            镜下可见,正常对照组小鼠肝细胞形态正常,肝小                             Note:vs. normal control group, P<0.05;vs. model group,P<
                                                                                     *
                                                                                                        #
        叶结构清晰,肝细胞索规则排列,肝组织结构未见病理                           0.05
        性改变;模型组小鼠肝组织中炎性细胞浸润明显,肝细                           3.4  滨蒿内酯对急性肝损伤模型小鼠血清中 IL-1β、
        胞索排列紊乱,肝小叶界限模糊,肝组织结构可见明显                           IL-6、TNF-α含量的影响
        病理性改变;与模型组比较,水飞蓟素组和滨蒿内酯高、                              与正常对照组比较,模型组小鼠血清 IL-1β、IL-6、
        低剂量组小鼠肝组织病理性改变程度明显减轻,炎性细                           TNF-α含量均显著升高(P<0.05);与模型组比较,水飞
        胞浸润减少,肝细胞形态及肝小叶结构基本正常,结果                           蓟素组和滨蒿内酯高、低剂量组小鼠血清中IL-1β、IL-6、
        详见图1(图中箭头所指为炎性反应点)。                                TNF-α含量均显著降低(P<0.05),详见表3。
        3.3  滨蒿内酯对急性肝损伤模型小鼠血清中 SOD、                        3.5  滨蒿内酯对急性肝损伤模型小鼠肝组织中 NF-κB
        CAT活性及MDA含量的影响                                     通路相关蛋白表达的影响
            与正常对照组比较,模型组小鼠血清中 SOD、CAT                          与正常对照组比较,模型组小鼠肝组织中 NF-κB
        活性均显著降低,MDA 含量显著升高(P<0.05);与模                      p65和IκBα蛋白的磷酸化水平均显著升高(P<0.05);与
        型组比较,水飞蓟素组和滨蒿内酯高、低剂量组小鼠血                           模型组比较,水飞蓟素组及滨蒿内酯高、低剂量组小鼠
        清中SOD、CAT活性均显著升高,MDA含量均显著降低                        肝组织中 NF-κB p65 和 IκBα蛋白的磷酸化水平均显著


        中国药房    2021年第32卷第2期                                               China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 2  ·233 ·
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