Page 110 - 《中国药房》2021年2期

苷、黄芩苷、淫羊藿苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素含量
的 RSD 分别为 2.25％、1.56％、2.85％、1.89％、2.91％、
2.12％（n＝6），表明方法重复性良好。
2.6.5 加样回收率试验 取同一批次扶正固本颗粒（批
号 20170806），共 9 份，3 份 1 组，每份约 1 g，分别精密加
入“2.3”项下 2，3，5，4′-四羟基二苯乙烯基葡萄糖苷、黄
芩苷、淫羊藿苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素单一对照
品贮备液适量，加入量为供试品中各待测成分已知量的
80％、100％、120％；随后精密加入 80％甲醇适量，使总
体积为 50 mL，按“2.2”项下方法处理后，再按“2.1”项下
色谱条件进样测定，记录峰面积并计算回收率，结果见
表2。
2.6.6 耐用性试验 分别考察流动相各梯度点比例变
化±5％、水相磷酸浓度变化±0.05％、柱温变化±5 ℃、
检测波长变化±5 nm、流速变化±20％以及不同色谱柱
[Dimak Diamonsil C18、TIANHE Kromasil C18、ELITE
SinaChrom C18 （均为250 mm×4.6 mm，5 µm）]，其余色谱
条件同“2.1”项时分离度和理论板数的变化。结果，各梯
度点比例变化±5％、检测波长变化±5 nm 以及采用 3
根色谱柱时，2，3，5，4′-四羟基二苯乙烯基葡萄糖苷、黄
芩苷、淫羊藿苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素色谱峰的
分离度均大于 1.5，理论板数（分别以各待测成分计）均
大于15 000；而在水相磷酸浓度变化为－0.05％、柱温变
化±5 ℃、流速变化±20％时，淫羊藿色谱峰的分离度不
能满足分析要求，其余5个待测成分色谱峰的分离度均大
于 1.5，理论板数（分别以各待测成分计）均大于 15 000。
这表明水相磷酸浓度、柱温以及流速对淫羊藿苷的检测
具有较大影响，即该成分检测条件要求较为严格、耐用
性稍差；而其余5个待测成分在上述条件变动的情况下
仍具有较好的分离度及理论板数，耐用性较好。
2.7 相对校正因子计算
2.7.1 多点校正法 参考文献方法 [5－6] ，以多个质量浓
度点计算所得校正因子的平均值作为相对校正因子。
计算公式为：
cs ·Ak
fk/s＝ … … … … … … … … … … … … … … … ①
ck ·As
待测成分质量浓度计算公式为：
cs ·Ak
ck′＝ … … … … … … … … … … … … … … … ②
fk/s′As
两式中，fk/s为相对校正因子；cs为参照物质质量浓
度；As为参照物质峰面积；ck为其他对照组分质量浓度；
Ak 为其他对照组分峰面积；ck′为待测组分质量浓度；
Ak′为待测组分峰面积。应用此法需先获得一个参照物
质的质量浓度cs和峰面积As。
以黄芩苷为基准峰（即参照物质，黄芩苷含量高且
与其他色谱峰的分离度良好，下同），取6种待测成分的
·228 · China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 2
表2 扶正固本颗粒中6种成分的加样回收率试验结果
Tab 2 Results of sample recovery tests of 6 compo-
nents in Fuzheng guben granules
待测成分 已知量， 加入量， 测得量， 回收率， 平均回收率，RSD，
mg mg mg ％ ％ ％
2，3，5，4′-四羟基二苯乙烯基葡萄糖苷 0.239 0.191 0.427 98.43 99.08 1.10
0.247 0.191 0.434 97.91
0.238 0.191 0.430 100.52
0.240 0.239 0.478 99.58
0.242 0.239 0.483 100.84
0.230 0.239 0.465 98.33
0.254 0.286 0.535 98.25
0.251 0.286 0.532 98.25
0.255 0.286 0.540 99.65
黄芩苷 3.310 2.608 5.889 98.89 98.82 0.89
3.419 2.608 5.986 98.43
3.297 2.608 5.891 99.46
3.326 3.260 6.506 97.55
3.356 3.260 6.593 99.29
3.179 3.260 6.388 98.44
3.516 3.912 7.451 100.59
3.474 3.912 7.312 98.11
3.524 3.912 7.382 98.62
淫羊藿苷 0.163 0.130 0.291 98.46 98.72 0.90
0.169 0.130 0.298 99.23
0.163 0.130 0.289 96.92
0.164 0.162 0.324 98.77
0.166 0.162 0.326 98.77
0.157 0.162 0.318 99.38
0.174 0.195 0.367 98.97
0.172 0.195 0.363 97.95
0.174 0.195 0.369 100.00
汉黄芩苷 0.371 0.302 0.673 100.00 99.50 1.01
0.383 0.302 0.683 99.34
0.369 0.302 0.671 100.00
0.373 0.378 0.745 98.41
0.376 0.378 0.748 98.41
0.356 0.378 0.739 101.32
0.394 0.454 0.843 98.90
0.389 0.454 0.845 100.44
0.395 0.454 0.843 98.68
黄芩素 0.079 7 0.068 0 0.148 100.44 98.78 1.12
0.082 3 0.068 0 0.149 98.09
0.079 4 0.068 0 0.146 97.94
0.080 1 0.085 7 0.164 97.90
0.080 8 0.085 7 0.165 98.25
0.076 6 0.085 7 0.162 99.65
0.084 7 0.102 0.184 97.35
0.083 7 0.102 0.185 99.31
0.084 9 0.102 0.187 100.10
汉黄芩素 0.048 0 0.036 8 0.084 2 98.37 99.82 1.24
0.049 6 0.036 8 0.086 5 100.27
0.047 8 0.036 8 0.084 1 98.64
0.048 3 0.046 0 0.094 2 99.78
0.048 7 0.046 0 0.095 1 100.87
0.046 1 0.046 0 0.092 4 100.65
0.051 0 0.055 2 0.105 97.83
0.050 4 0.055 2 0.106 100.72
0.051 1 0.055 2 0.107 101.27
混合对照品溶液按“2.1”项下色谱条件进样测定，进样量
分别为0.5、1、2、5、10、15 μL，记录峰面积，按公式①计算
中国药房 2021年第32卷第2期