Page 66 - 《中国药房》2020年第24期

290 表4 10批怀牛膝饮片样品共有峰的相对峰面积
270
250 Tab 4 Relative peak area of common peak of 10
230
210
190 batches of A. bidentata decoction pieces
mV 170
150
U， 130 峰号 S1 S2 S3 S4 S5 S6 S7 S8 S9 S10 RSD，％
110
90 1 5.286 4.712 6.094 8.506 5.081 4.729 3.410 3.552 6.129 5.421 27.42
70
50 2 1.588 1.588 1.560 2.081 1.404 1.522 1.368 1.292 1.831 1.526 14.64
30
10 3 1.707 0.652 0.744 0.557 1.642 1.368 1.495 1.629 1.263 1.941 37.39
0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 4 1.288 1.000 1.000 1.588 3.120 1.211 1.103 1.732 1.666 1.404 41.30
t，min 5 0.361 0.584 0.514 0.398 0.484 0.321 0.276 0.416 0.254 0.280 28.66
图3 怀牛膝样品的HPLC对照指纹图谱 6 0.041 0.059 0.032 0.161 0.092 0.048 0.045 0.056 0.064 0.061 56.77
Fig 3 HPLC fingerprint of A. bidentata decoction pieces 7 0.036 0.066 0.075 0.109 0.095 0.046 0.040 0.093 0.101 0.092 35.83
8 0.050 0.076 0.071 0.055 0.079 0.052 0.055 0.063 0.058 0.056 16.97
450
400 9 0.043 0.079 0.058 0.051 0.057 0.044 0.052 0.060 0.048 0.051 18.79
β-蜕皮甾酮
350 10（s） 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 0.00
300 11 0.160 0.180 0.166 0.177 0.168 0.166 0.164 0.165 0.165 0.166 3.76
mAU 250 12 0.331 0.322 0.298 0.316 0.308 0.316 0.312 0.309 0.317 0.338 3.63
200
13 0.011 0.017 0.029 0.031 0.033 0.014 0.012 0.017 0.014 0.020 41.63
150
14 0.013 0.022 0.029 0.043 0.024 0.018 0.022 0.020 0.025 0.021 33.67
100
15 0.077 0.081 0.201 0.143 0.179 0.073 0.068 0.118 0.115 0.112 39.15
50
16 0.141 0.169 0.253 0.173 0.237 0.119 0.108 0.103 0.151 0.142 31.85
0
0 10 20 30 40 50 60 17 0.043 0.142 0.189 0.125 0.089 0.025 0.016 0.049 0.050 0.133 67.72
t，min 18 0.517 0.766 1.003 1.515 1.076 0.551 0.404 0.978 1.009 0.985 37.39
图4 对照品的HPLC图 19 0.280 0.295 0.345 0.454 0.312 0.292 0.264 0.187 0.447 0.440 26.88
Fig 4 HPLC chromatogram of substance control 20 0.214 0.256 0.287 0.441 0.214 0.184 0.143 0.166 0.314 0.165 37.80
21 0.470 0.354 0.437 0.362 0.376 0.556 0.414 0.390 0.413 0.418 14.24
2.5.8 共有峰的指认 本研究前期试验结果显示，怀牛
22 0.086 0.052 0.070 0.078 0.076 0.104 0.067 0.071 0.074 0.079 17.66
膝饮片中β-蜕皮甾酮含量较高，且出峰稳定，分离度较 23 0.120 0.119 0.088 0.084 0.076 0.107 0.070 0.091 0.092 0.128 20.51
好，故以其为参照（s），计算其余各共有峰的相对保留时 24 0.074 0.014 0.008 0.010 0.010 0.038 0.018 0.048 0.012 0.062 82.94
间和相对峰面积。通过与对照品保留时间（图 4）对比，
2.6 聚类分析
指认 10 号峰为β-蜕皮甾酮。各共有峰的相对保留时间
以 10 批样品的 24 个共有峰峰面积为变量，采用
和相对峰面积见表3、表4。
SPSS 21.0 软件对峰面积进行标准化处理，采用组间联
表3 10批怀牛膝饮片样品共有峰的相对保留时间
接，以平方 Euclidean 距离为测度进行聚类分析。结果，
Tab 3 Relative retention time of common peak of 10
10 批样品可聚为 4 类，其中 S1、S3、S6、S10 为一类，S2、
batches of A. bidentata decoction pieces
S7、S8为一类，S4、S9 为一类，S5为一类，详见图5。
峰号 S1 S2 S3 S4 S5 S6 S7 S8 S9 S10 RSD，％
1 0.136 0.137 0.134 0.134 0.133 0.135 0.135 0.135 0.135 0.135 0.66 平方Euclidean距离
2 0.150 0.150 0.148 0.116 0.148 0.149 0.149 0.149 0.149 0.149 7.13 0 5 10 15 20 25
3 0.163 0.164 0.163 0.162 0.161 0.163 0.163 0.162 0.163 0.163 0.40 S1
S6
4 0.230 0.231 0.229 0.228 0.228 0.229 0.230 0.230 0.229 0.230 0.40 S10
5 0.326 0.324 0.320 0.326 0.318 0.324 0.325 0.317 0.326 0.324 1.05 S3
S7
6 0.566 0.566 0.564 0.565 0.570 0.566 0.568 0.566 0.567 0.566 0.29
S8
7 0.617 0.618 0.616 0.618 0.622 0.623 0.619 0.618 0.619 0.618 0.35 S2
8 0.843 0.844 0.841 0.840 0.842 0.843 0.843 0.843 0.843 0.843 0.15 S5
9 0.883 0.884 0.881 0.880 0.880 0.882 0.882 0.882 0.882 0.883 0.13 S4
S9
10（s） 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 0.00 图5 10批样品的聚类分析树状图
11 1.040 1.039 1.040 1.040 1.040 1.040 1.040 1.040 1.040 1.040 0.03
12 1.058 1.058 1.059 1.059 1.058 1.058 1.059 1.058 1.059 1.059 0.05 Fig 5 Dendrogram of cluster analysis of 10 batches of
13 1.222 1.222 1.225 1.225 1.224 1.225 1.224 1.224 1.226 1.222 0.12 A. bidentata decoction pieces
14 1.580 1.584 1.583 1.578 1.579 1.582 1.584 1.584 1.583 1.581 0.14
15 1.795 1.810 1.792 1.781 1.781 1.788 1.791 1.792 1.789 1.793 0.44 2.7 主成分分析
16 1.824 1.840 1.821 1.810 1.809 1.817 1.819 1.821 1.821 1.821 0.47 采用 SPSS 21.0软件对样品中15 个共有峰（6～12、
17 1.931 1.950 1.925 1.906 1.900 1.907 1.910 1.913 1.909 1.927 0.79 15～16、18～23 号峰，剔除溶剂峰以及峰面积较小的不
18 2.016 2.036 2.013 1.995 1.999 2.006 2.008 2.014 2.003 2.011 0.56
19 2.043 2.072 2.046 2.024 2.031 2.037 2.038 2.044 2.027 2.037 0.66 稳定峰对于分析结果的影响）峰面积进行标准化处理
20 2.119 2.145 2.114 2.097 2.096 2.106 2.107 2.111 2.109 2.115 0.65 后，进行主成分分析（以特征值＞1 为标准 [16-17] ）。结
21 2.910 2.923 2.892 2.874 2.873 2.889 2.895 2.899 2.896 2.904 0.53 果，得到4个主成分因子，累积方差贡献率为86.774％＞
22 2.940 2.953 2.922 2.903 2.902 2.918 2.924 2.929 2.926 2.934 0.53
23 2.957 2.964 2.934 2.916 2.916 2.933 2.940 2.944 2.942 2.951 0.53 80％，即这4个主成分因子能反映样品80％以上的质量
24 3.033 3.041 3.009 2.984 2.992 3.009 3.016 3.021 3.018 3.019 0.56 信息，故以这 4 个主成分因子为指标，对 10 批样品进行

·3004 · China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 24 中国药房 2020年第31卷第24期