Page 64 - 《中国药房》2020年第24期

醇稀释至刻度，混匀；另取甲醇为空白对照溶液。分别
于 200～400 nm 波长范围内进行全波长扫描。结果，对
照品溶液与供试品溶液均在243 nm波长处有最大吸收，
故选择243 nm为检测波长（图略）。
2.3.4 线性关系考察 精密吸取“2.3.2”项下对照品溶
液0.10、0.15、0.20、0.25、0.30、0.45、0.55、0.60、0.65、0.70、
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13
0.80 mL，分别置于 5 mL 量瓶中，加甲醇稀释至刻度，
注：1～10.饮片样品（S1～S10）；11.人参皂苷 Ro 对照品；12. β-蜕
混匀，于 243 nm 波长处测定吸光度。以质量浓度（X，
皮甾酮对照品；13.阴性对照
mg/mL）为横坐标、吸光度（Y）为纵坐标进行线性回归。
Note：1- 10. samples（S1-S10）；11. ginsenoside Ro control；12. β-ec-
2
dysterone control；13. negative control 结果，β-蜕皮甾酮的回归方程为Y＝25.74X－0.036（R ＝
图1 薄层色谱图 0.999 2），表明β-蜕皮甾酮检测质量浓度的线性范围为
Fig 1 TLC chromatograms 0.01～0.08 mg/mL。
2.3.5 精密度试验 取“2.3.1”项下供试品溶液（编号：
版《中国药典》（四部）通则“0832 水分测定法烘干法”
S4）适量，于243 nm波长处连续测定吸光度6次。结果，
“2302灰分测定法”“2201醇溶性浸出物测定法”（以水饱
β-蜕皮甾酮吸光度的RSD 为 0.57％（n＝6），表明方法精
[15]
和的正丁醇作溶剂） 测定，每批样品平行测定 3 次，取
密度良好。
平均值。结果，水分含量为 4.07％～6.33％，平均值为
2.3.6 重复性试验 取样品（编号：S4）粉末，约1 g，共6
5.27％；总灰分含量为5.04％～6.43％，平均值为5.63％；
份，按“2.3.1”项下方法制备供试品溶液，于 243 nm 波长
醇 溶 性 浸 出 物 含 量 为 6.57％ ～11.12％ ，平 均 值 为
处测定吸光度并按标准曲线法计算样品含量。结果，β-
8.78％，详见表2。
蜕皮甾酮含量的RSD为0.02％（n＝6），表明方法重复性
表2 10批怀牛膝饮片的水分、总灰分、醇溶性浸出物含
良好。
量测定结果（n＝3）
2.3.7 稳定性试验 取供试品溶液（编号：S4）适量，分
Tab 2 Results of content determination of moisture，
别于室温下放置0、1、2、3、4、5 h时于243 nm波长处测定
total ash and ethanol-soluble extract in 10
吸光度。结果，β-蜕皮甾酮吸光度的RSD 为 0.55％（n＝
batches of A. bidentata decoction pieces（n＝3）
6），表明供试品溶液于室温下放置5 h内稳定性良好。
编号 水分，％ 总灰分，％ 醇溶性浸出物，％ 2.3.8 加样回收率试验 取已知含量的样品（编号：S4）
S1 6.17 5.63 11.12
S2 5.50 5.28 8.95 粉末，约 0.5 g，共 6 份，置于具塞锥形瓶中，加入 0.572
S3 4.07 6.43 7.64 mg/mL 对照品溶液（精密称取β-蜕皮甾酮对照品 5.72
S4 4.27 6.42 7.69 mg，按“2.3.2”项下方法制得）4.2 mL，按“2.3.1”项下方法
S5 6.33 5.31 7.34
S6 6.00 5.85 8.81 制备供试品溶液，于243 nm波长处测定吸光度并计算加
S7 4.83 5.04 8.35 样回收率。结果，总甾酮的平均加样回收率为 98.85％
S8 4.33 5.13 6.57 （RSD＝1.89％，n＝6）。
S9 5.50 5.63 10.27
S10 5.66 5.53 11.04 2.3.9 样品含量测定 取10批样品粉末适量，按“2.3.1”
平均值 5.27 5.63 8.78 项下方法制备供试品溶液，取 2 mL，置于 5 mL 量瓶中，
2.3 总甾酮的含量测定 加甲醇稀释至刻度，混匀，于243 nm波长处测定吸光度
2.3.1 供试品溶液的制备 取样品粉末约 1 g，精密称 并按标准曲线法计算样品含量。每样品平行测定3次。
定，置于具塞三角瓶中，加 80％乙醇 50 mL，超声提取 2 结果，10批样品中总甾酮的平均含量（以β-蜕皮甾酮计）
次，每次 1 h，滤过，收集滤液，水浴（65 ℃）加热浓缩至无 分别为 0.50％、0.37％、0.56％、0.34％、0.38％、0.50％、
醇味，过 D101 型大孔吸附树脂柱（内径：1.2 cm，柱高： 0.34％、0.47％、0.41％、0.52％。
10 cm），依次用水 50 mL、5％乙醇 30 mL、80％乙醇 50 2.4 β-蜕皮甾酮的含量测定
mL 洗脱，收集 80％乙醇洗脱液，蒸干，残渣用甲醇稀释 2.4.1 供试品溶液的制备 取样品粉末约 1 g，精密称
并定容至25 mL，即得 。 定，置于具塞三角瓶中，加入水饱和的正丁醇 40 mL，密
[7]
2.3.2 对照品溶液的制备 精密称取β-蜕皮甾酮对照 塞，称定质量，浸泡过夜，超声处理 45 min，冷却至室温，
品5.01 mg，置于10 mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻 再次称定质量，用水饱和的正丁醇补足减失的质量，滤
度，混匀，制得质量浓度为0.501 mg/mL的对照品溶液。 过，用甲醇 10 mL 分数次洗涤容器及残渣，合并滤液和
2.3.3 检测波长的确定 取上述供试品溶液（编号： 洗液，蒸干，残渣加甲醇溶解，移至5 mL量瓶中，加甲醇
[11]
S4）、对照品溶液各0.2 mL，分别置于5 mL 量瓶中，加甲 定容，混匀，即得 。

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