Page 63 - 《中国药房》2020年第24期
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牛膝为苋科植物牛膝Achyranthes bidentata Bl.的干           司）；KQ-250E型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公
        燥根，其性平，味苦、甘、酸，具有逐瘀通经、补肝肾、强筋                        司）；硅胶 G 薄层板（粒径：10～40 µm；青岛海洋化工有
        骨、利尿通淋、引血下行的功效，常用于治疗经闭、痛经、                         限公司）；D101 型大孔吸附树脂[粒径范围：（0.3～1.25）
                           [1]
        腰膝酸痛、筋骨无力等 。牛膝主产于我国河南、河北、                          mm≥95％；蚌埠市天星树脂有限责任公司]。
        山东、山西、内蒙、安徽等地，其中河南焦作的武陟、温                          1.2 药品与试剂
        县、博爱、沁阳以及新乡的辉县等地所种植的牛膝又被                               β-蜕皮甾酮对照品（南京森贝伽生物科技有限公
                                                     [3]
                  [2]
        称为怀牛膝 ，已成为道地药材品种“四大怀药”之一 。                         司，批号：111903-201805，纯度：≥98％）；人参皂苷Ro对
        有研究发现，怀牛膝除含有皂苷类、甾酮类、多糖类等主                          照品（南京森贝伽生物科技有限公司，批号：111638-
        要化学成分外，还含有少量生物碱类、黄酮类成分 。甾                          201907，纯度：≥98％）；甲醇、乙腈为色谱纯，其余试剂
                                                  [4]
        酮类成分具有促进骨质增生、调节糖代谢、抗脂质过氧                           均为分析纯，水为纯化水。10 批怀牛膝饮片（编号：
                [5]
        化等作用 ；β-蜕皮甾酮作为该药材主要的甾酮类成分                          S1～ S10），经中国药科大学中药学院杨中林教授鉴定
        之一，具有抑制破骨细胞分化、促成骨样细胞增殖活性，                          为苋科植物牛膝 A. bidentata Bl.的干燥根（去芦头后润
                                                                                    [10]
        促进蛋白质的合成，抑制由药物引起的血糖升高和降胆                           软，切 3 mm 厚片，低温烘干 后，将样品粉碎，过 40 目
        固醇的作用，与牛膝“补肝肾、强筋骨”功效相吻合                   [6-7] 。  筛，粉末密封于自封袋中，置于干燥器内保存于中国药
            中药饮片是指基于中医药理论，依据药物效用、应                         科大学中药学院）。样品信息来源见表1。
        用方式，对药材进行炮制处理，使其变成具备一定规格                                           表1 样品信息来源
        及形状的成品 。目前，关于怀牛膝质量控制的研究主                                    Tab 1 Sample information source
                    [8]
        要集中于原药材的含量测定和指纹图谱研究方面                      [7，9-10] ，  编号  品名  产地      规格     批号         生产厂家
                                                           S1    怀牛膝  河南博爱县    头肥    190712  先声再康江苏药业有限公司
        关于饮片质量评价的研究较少；加之中药饮片的质量检
                                                           S2    怀牛膝  河南沁阳县    段     190724  浙江景岳堂药业有限公司
        测基本上还沿袭传统的饮片检测标准，其检验方法相对                           S3    怀牛膝  河南武陟县    统段    190701  安徽佳凯药业股份有限公司
        简单，仅通过外观、气味、口尝等方式检测，无法实现对                          S4    怀牛膝  河南武陟县    统段    190501  安徽佳凯药业股份有限公司
                                                           S5    怀牛膝  河南武陟县    统段    190712  亳州市永刚饮片厂有限公司
                                         [11]
        中药饮片有效成分及整体质量的评价 。指纹图谱是
                                                           S6    怀牛膝  河南焦作县    统     190119  河北金草药业有限公司
        目前中药饮片质量控制的有效手段，可全面反映中药饮                           S7    怀牛膝  河南温县     段     190123  安徽省六安市绿丰中药材有限公司
        片炮制前后的变化，能有效控制中药饮片的质量，具有                           S8    怀牛膝  河南沁阳县    段     191112  六品叶商贸有限公司
                                                           S9    怀牛膝  河南博爱县    统段    191115  桦甸市栢晟商贸有限公司
                      [11]
        特征性和整体性 。目前，关于怀牛膝饮片质量标准的                           S10   怀牛膝  河南温县     统段    191101  吉林省品茸堂商贸有限公司
                               [12]
        研究较少且不全面，仇立志 仅探讨了硫磺熏蒸对怀牛                           2 方法与结果
                                [13]
        膝饮片质量的影响；王博等 虽然采用高效液相色谱
                                                           2.1  TLC鉴别
       （HPLC）指纹图谱技术对不同厂家怀牛膝饮片进行了质                              取各批样品粉末约 4 g，加入 80％甲醇 50 mL，超声
        量评价，但缺乏详细的分析，信息量有限。为此，本研究                          （功率：300 W，频率：40 kHz，下同）提取 2 次，每次 30
        采用薄层鉴别法（TLC）对怀牛膝饮片进行鉴别，按2015                       min，滤过，滤液蒸干，残渣加水15 mL，微热（30 ℃）使溶
        年版《中国药典》（四部）方法对其水分、总灰分、醇溶性                         解，过 D101 型大孔吸附树脂柱（内径：1.5 cm，柱高：15
        浸出物等进行考察；采用紫外分光光度法（UV）测定总                          cm），依次用水 100 mL、20％乙醇 100 mL、80％乙醇 100
        甾酮含量，采用HPLC法测定β-蜕皮甾酮含量；同时建立                        mL 洗脱，收集 80％乙醇洗脱液，蒸干，残渣加 80％甲醇
        怀牛膝饮片的指纹图谱，并进行聚类分析和主成分分                            2 mL 使溶解，作为供试品溶液。取β-蜕皮甾酮对照品、
        析，旨在为怀牛膝饮片的质量标准完善和总体质量评价                           人参皂苷 Ro 对照品适量，加甲醇分别制成每 l mL 含 1
        提供参考。                                              mg 的单一对照品溶液；以甲醇作为阴性对照溶液。
        1 材料                                               按 2015 年版《中国药典》（四部）通则“0502 薄层色谱
        1.1 仪器                                             法”  [14-15] ，吸取供试品溶液、对照品溶液和阴性对照溶液
            1800 PC 型 UV 计（上海菁华科技仪器有限公司）；                  各4 μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲
        1260 型 HPLC 仪，包括 G1312C 型双元泵、G1329B 型检             醇-水-甲酸（7 ∶ 3 ∶ 0.5 ∶ 0.05，V/V/V/V）为展开剂，展开，取
        测器、G1316A型柱温箱、G1315D型进样器（美国Agilent                 出，晾干，喷以 5％香草醛硫酸溶液，于 105 ℃加热至斑
        公司）；QE-300型万能粉碎机（浙江屹立工贸有限公司）；                      点显色清晰。结果，在供试品色谱中，与β-蜕皮甾酮、人
        DZF-6020 型真空干燥箱（上海一恒科学仪器有限公                        参皂苷Ro对照品色谱相应位置上有相同颜色的斑点且
        司）；SHB-Ⅲ型循环水式多用真空泵（郑州长城科工贸有                        阴性对照无干扰，详见图1。
        限公司）；BSA124S 型电子天平[赛多利斯科技仪器（北                      2.2 水分、总灰分、醇溶性浸出物的含量测定
        京）有限公司]；SX2型箱式电阻炉（上海博讯实业有限公                            水分、总灰分和醇溶性浸出物的测定分别按2015年


        中国药房    2020年第31卷第24期                                            China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 24  ·3001 ·
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