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XDB-C18 （250 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相：甲醇-0.1％
               350
               300
               250                                         磷酸水溶液（80 ∶ 20，V/V）；流速：1 mL/min；检测波长：
              mAU  200                                     254 nm；柱温：30 ℃；进样量：10 μL。
               150
               100
               50                                            表1 二苯乙烯苷的加样回收率试验测定结果（n＝6）
                0
                                                           Tab 1 Rresults of recovery tests of stilbene glycoside
                    1  2   3  4  5   6  7  8   9
                                t，min                            （n＝6）
                             A.空白对照溶液
                                                           已知含量，mg  加入量，mg  测得量，mg  加样回收率，％  平均加样回收率，％ RSD，％
               350              1                          2.251 3   2.230  4.504 9  101.06
               300
               250                                         2.250 9   2.230  4.482 1  100.05
              mAU  200                                     2.255 1   2.230  4.473 9   99.50     100.14  0.63
               150
               100                                         2.252 9   2.230  4.496 8  100.62
               50                                          2.253 1   2.230  4.486 9  100.17
                0
                                                           2.248 9   2.230  4.466 3   99.43
                    1  2   3  4  5   6  7  8   9
                                t，min                      2.3.2  混合对照品溶液的制备            取大黄素、大黄素甲醚
                             B.对照品溶液
                                                           对照品适量，精密称定，加入甲醇溶解并定容，制成大黄
               350
               300                                         素、大黄素甲醚质量浓度分别为63.0、38.4 µg/mL的混合
               250              1
              mAU  200                                     对照品溶液。
               150
               100                                         2.3.3  供试品溶液的制备          取“2.1”项下何首乌九蒸九
               50
                0                                          晒样品粉末 1 g，精密称定，置于具塞锥形瓶中，加入甲
                    1  2   3  4  5   6  7  8   9
                                t，min                      醇50 mL，密塞，称定质量，加热回流提取1 h，放冷，再次
                          C.供试品溶液（编号：S5）
                                                           称定质量，用甲醇补足减失的质量，摇匀，滤过，取续滤
           注：1.二苯乙烯苷
                                                           液，即得。
           Note：1. stilbene glycoside
            图1   二苯乙烯苷含量测定的高效液相色谱图                         2.3.4 阴性对照溶液        以甲醇为阴性对照溶液。
        Fig 1  HPLC chromatograms of content determina-    2.3.5  系统适用性试验         取上述阴性对照溶液、混合对
               tion of stilbene glycoside                  照品溶液、供试品溶液各适量，按“2.3.1”项下色谱条件
                                                           进样测定，记录色谱图，详见图 2。由图 2 可知，大黄素
        晒样品（编号：S5，星点设计序号：5）粉末 0.2 g，共 6 份，
                                                           对应色谱峰的分离度为2.32，理论板数为13 513；大黄素
        按“2.2.3”项下方法制备供试品溶液，再按“2.2.1”项下色
                                                           甲醚对应色谱峰的分离度为 20.33，理论板数为 16 212；
        谱条件进样测定，记录峰面积并按标准曲线法计算样品
                                                           与其余成分均基线分离，且阴性对照对测定无干扰。
        含量。结果，二苯乙烯苷含量的 RSD 为 0.99％（n＝6），
                                                           2.3.6  线性关系考察        取“2.3.2”项下混合对照品溶液
        表明方法重复性良好。
                                                           1、2、4、8、10 mL，分别置于10 mL量瓶中，加入甲醇稀释
        2.2.9  稳定性试验      取“2.2.3”项下供试品溶液（编号：
                                                           并定容，制得不同质量浓度的标准溶液，按“2.3.1”项下
        S5，星点设计序号：5）适量，分别于室温下放置0、2、4、6、
                                                           色谱条件进样测定，记录色谱图。以各待测成分进样量
        8、10、12、24 h时按“2.2.1”项下色谱条件进样测定，记录                 （X，µg）为横坐标、峰面积（Y）为纵坐标进行线性回归。
        峰面积。结果，二苯乙烯苷峰面积的RSD为1.08％（n＝
                                                           结 果 ，大 黄 素 、大 黄 素 甲 醚 的 回 归 方 程 分 别 为 Y＝
        8），表明供试品溶液于室温下放置24 h内稳定性良好。                        202.04X－0.652 2（r＝0.999 9），Y＝56.176X+0.311 9（r＝
        2.2.10  加样回收率试验        精密称取已知含量的“2.1”项             0.990 9），表明大黄素、大黄素甲醚检测进样量的线性范
        下何首乌九蒸九晒样品（编号：S5，星点设计序号：5）粉                        围分别为0.063～0.63、0.038～0.38 µg。
        末 0.2 g，共 6 份，加入二苯乙烯苷对照品 2.230 mg，按                2.3.7  精密度试验       精密吸取“2.3.2”项下混合对照品
       “2.2.3”项下方法制备供试品溶液，再按“2.2.1”项下色谱                    溶液适量，按“2.3.1”项下色谱条件连续进样测定6次，记
        条件进样测定，记录峰面积并计算加样回收率，结果见                           录峰面积。结果，大黄素、大黄素甲醚峰面积的 RSD 分
        表1。                                                别为1.19％、0.99％（n＝6），表明仪器精密度良好。
        2.2.11  样品含量测定        取 20 批“2.1”项下九蒸九晒样           2.3.8  重复性试验       取“2.1”项下何首乌九蒸九晒样品
        品粉末适量，按“2.2.3”项下方法制备供试品溶液，再按                       （编号：S5，星点设计序号：5）粉末 1 g，共 6 份，按“2.3.3”
       “2.2.1”项下色谱条件进样测定，记录峰面积并按标准曲                        项下方法制备供试品溶液，再按“2.3.1”项下色谱条件进
        线法计算样品含量。                                          样测定，记录峰面积并按标准曲线法计算样品含量。结
        2.3  游离蒽醌的含量测定                                     果，大黄素、大黄素甲醚含量的 RSD 分别为 1.62％、
        2.3.1  色谱条件       色谱柱：Agilent ZORBAX Eclipse       1.31％（n＝6），表明方法重复性良好。


        中国药房    2020年第31卷第22期                                            China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 22  ·2715 ·
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