Page 34 - 《中国药房》2020年22期

表 2 大黄素、大黄素甲醚的加样回收率试验测定结果
25
20 （n＝6）
mAU 15 Tab 2 Results of recovery tests of emodin and emodin
10
5 methyl ether（n＝6）
0 待测成分 已知含量，mg 加入量，mg 测得量，mg 加样回收率，％ 平均加样回收率，％ RSD，％
5 10 15 20 25 大黄素 1.274 3 1.290 2.550 5 98.93 99.85 1.34
t，min
A.阴性对照溶液 1.285 1 1.290 2.558 9 98.74
1.266 8 1.290 2.556 1 99.95
1 1.279 1 1.290 2.570 1 100.08
25
1.270 5 1.290 2.590 6 102.33
20
1.285 2 1.290 2.562 9 99.05
15
mAU 10 大黄素甲醚 0.804 9 0.890 1.685 8 98.98 100.03 1.49
2 0.799 8 0.890 1.698 4 100.97
5
0.816 2 0.890 1.699 4 99.24
0
5 10 15 20 25 0.813 5 0.890 1.689 2 98.39
t，min 0.804 5 0.890 1.716 2 102.44
B.混合对照品溶液 0.815 2 0.890 1.706 8 100.18
2.4.2 供试品溶液的制备 取“2.1”项下何首乌九蒸九
50
1
25 晒样品粉末 1 g，精密称定，置于具塞锥形瓶中，加入
mAU 0 2 95％乙醇20 mL，加热回流2 h，滤过，滤渣经95％乙醇洗
－25 涤3次并挥干，加水25 mL，于70 ℃超声提取50 min，放
冷，以2 000 r/min离心5 min，取上清液，重复超声提取2
5 10 15 20 25
t，min 次，合并上清液，取 1 mL，加水定容至 100 mL 量瓶中，
C.供试品溶液（编号：S5）
即得。
注：1.大黄素；2.大黄素甲醚
2.4.3 阴性对照溶液 取 6％苯酚溶液 1 mL、硫酸 5
Note：1. emodin；2. emodin methyl ether
图2 大黄素、大黄素甲醚含量测定的高效液相色谱图 mL，置于10 mL具塞比色管中，加水至刻度，混匀，即得。
Fig 2 HPLC chromatograms of content determina- 2.4.4 检测波长的确定 精密吸取上述对照品溶液0.5
tion of emodin and emodin methyl ether mL、供试品溶液1.0 mL，分别置于10 mL具塞比色管中，

2.3.9 稳定性试验 取“2.3.3”项下供试品溶液（编号： 精密加入 6％苯酚溶液 1 mL，混匀；加入硫酸 5 mL，混
S5，星点设计序号：5）适量，分别于室温下放置0、2、4、6、 匀；加水至刻度，混匀。另取阴性对照溶液10 mL。将上
8、10、12、24 h时按“2.3.1”项下色谱条件进样测定，记录 述溶液分别置于水浴中显色 15 min 后，于 300～700 nm
峰面积。结果，大黄素、大黄素甲醚峰面积的 RSD 分别 全波长范围内进行扫描。结果，对照品与供试品在 490
为1.51％、1.27％（n＝8），表明供试品溶液于室温下放置 nm波长处有最大吸收，阴性对照无干扰，故选择检测波
24 h内稳定性良好。 长为490 nm，详见图3。
2.3.10 加样回收率试验 精密称取已知含量的“2.1”项 2.4.5 线性关系考察 分别精密吸取“2.4.1”项下对照
下何首乌九蒸九晒样品（编号：S5，星点设计序号：5）粉 品溶液 0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6 mL，按“2.4.4”项下方法
末1 g，共6份，加入大黄素对照品1.290 mg、大黄素甲醚 显色后，于 490 nm 波长处测定吸光度。以 D-无水葡萄
对照品 0.890 mg，按“2.3.3”项下方法制备供试品溶液， 糖质量浓度（X，µg/mL）为横坐标、吸光度（Y）为纵坐标
再按“2.3.1”项下色谱条件进样测定，记录峰面积并计算 进行线性回归。结果，D-无水葡萄糖的回归方程为 Y＝
加样回收率，结果见表2。 1.225 3X+0.074（r＝0.999 6），表明D-无水葡萄糖检测质
2.3.11 样品含量测定 取 20 批“2.1”项下何首乌九蒸 量浓度的线性范围为2.07～12.42 µg/mL。
九晒样品粉末适量，按“2.3.3”项下方法制备供试品溶 2.4.6 精密度试验 取“2.4.1”项下对照品溶液0.5 mL，
液，再按“2.3.1”项下色谱条件进样测定，记录峰面积并 按“2.4.4”项下方法显色后，于490 nm波长处连续测定6
按标准曲线法计算样品含量。 次吸光度。结果，D-无水葡萄糖吸光度的RSD为1.34％
2.4 总多糖的含量测定 （n＝6），表明仪器精密度良好。
2.4.1 对照品溶液的制备 取干燥至恒定质量的 D-无 2.4.7 重复性试验 精密称取“2.1”项下何首乌九蒸九
水葡萄糖对照品适量，精密称定，加水稀释，制成质量浓 晒样品（编号：S5，星点设计序号：5）粉末 1 g，共 6 份，按
度为0.207 mg/mL的对照品溶液。 “2.4.2”项下方法制备供试品溶液，再按“2.4.4”项下方法

·2716 · China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 22 中国药房 2020年第31卷第22期