Page 16 - 《中国药房》2020年22期
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表2 USP43、EP10.0、JP17和ChP2020中关于中药饮片控制菌检查方法的比较
         Tab 2 Comparison of specified microorganisms of TCM decoction pieces among USP43，EP10.0，JP17 and ChP2020
                                                               具体要求
        控制菌        步骤
                             USP43“2021”和“2022”     EP10.0“2.6.31”          JP17“5.02”    ChP2020“通则1108”
        耐胆盐革兰阴性菌 前处理及 取相当于l g 或l mL供试品的供试液至pH 取相当于l g 或l mL供试品的供试液至TSB 取相当于l g 或l mL供试品的供试液至TSB培养 取相当于l g 或l mL供试品的供试液
                  一次增菌 7.2 PBS或TSB培养基；20～25 ℃，2～5 h  培养基；20～25 ℃，2～3 h  基；20～25 ℃，2～5 h   至TSB培养基；20～25 ℃，约2 h
                  二次增菌 3浓度接种于肠道增菌液体（MEEB）培养基； 4 浓度接种于 MEEB 培养基；30～35 ℃， 3浓度接种于MEEB培养基；35～37 ℃，18～24 h  3浓度接种于MEEB培养基；与EP相
                        35～37℃，24～48 h       24～48 h                                      同
                  分离    紫红胆盐葡萄糖琼脂（VRGBA）培养基； 与USP43相同             VRGBA培养基；35～37 ℃，18～24 h  与USP43相同
                        30～35 ℃，18～24 h
        大肠埃希菌     前处理及 定性检验：取10 g或10 mL供试品至TSB培 定性检验：与USP43 定量检验：3浓度接 定性检验：与USP43相同  定量检验：与  定性检验：取相当于l g 或l mL供试品
                  一次增菌 养基；30～35℃，24～48 h     相同         种于 TSB 培养基；             EP10.0相同  的供试液至TSB培养基；30～35 ℃，
                                                        30～35℃，18～24 h                    18～24 h
                  二次增菌 麦康凯肉汤培养基；42～44 ℃，24～48 h  与USP43相同         麦康凯肉汤培养基；（44±0.5）℃，24～48 h  与USP43相同
                  分离    麦康凯琼脂培养基；30～35 ℃，18～24 h  麦康凯琼脂培养基；30～35℃，18～72 h  与EP10.0相同；增加显色琼脂培养基  与EP10.0相同
                  鉴定    伊红美蓝琼脂（EMB）培养基；30～35 ℃， 适宜的鉴定方法           与EP10.0相同               与EP10.0相同
                        24～48 h
        沙门菌       前处理及 取10 g或10 mL供试品至TSB培养基；30～ 25 g或25 mL供试品至225 mL缓冲蛋白胨 与USP43相同       与USP43相同
                  一次增菌 35 ℃，18～24 h          水溶液；30～35 ℃，18～24 h
                  二次增菌 沙门增菌液体（RV）培养基；30～35℃，18～ 与USP43相同          RV培养基；（42±0.5）℃，18～24 h  与USP43相同
                        24 h
                  分离    亮绿琼脂（BGA）、木糖赖氨酸脱氧胆酸盐琼 XLD培养基；30～35 ℃，18～48 h  与EP10.0相同；可选用显色琼脂培养基  与EP10.0相同
                        脂（XLD）或Hektoen Enteric琼脂（HE）培养
                        基（任选1个或多个）；30～35 ℃，24～48 h
                  鉴定    三糖铁试验                适宜的方法                与EP10.0相同               三糖铁试验或其他适宜的方法
        金黄色葡萄球菌   前处理及 取10 g或10 mL供试品至TSB培养基；30～                  取相当于l g 或l mL供试品的供试液至TSB培养
                  一次增菌 35 ℃，18～24 h                               基，30～35 ℃，24～48 h，再转接至含7.5％氯化钠
                                                                  的TSB培养基，30～35 ℃，24～48 h
                  分离    Vogel-Johnson 琼脂（VJ）、Baird-Parker 琼脂 未规定  与USP43相同                未规定
                       （BP）或甘露醇氯化钠琼脂（MS）培养基（任
                        选1个或多个）；30～35 ℃，24～48 h
                  鉴定    血浆凝固酶试验                                   适宜的鉴定方法
        梭菌        前处理   取样2份，单份80 ℃加热10 min
                  增菌    梭菌增菌肉汤培养基；厌氧35～37℃，48 h
                                             未规定                  未规定                     未规定
                  分离    哥伦比亚琼脂培养基；厌氧35～37℃，48 h
                  鉴定    氧气利用试验、氧化酶试验
        行大肠埃希菌鉴定；其余3部药典则要求选用麦康凯琼                            USP43通过三糖铁试验筛选目标菌；EP10.0和JP17则采
        脂培养基分离培养18～72 h，并采用适宜的鉴定方法确                         用适宜的方法判断；ChP2020 整合了上述两种鉴别方

        定目标菌。JP17 可额外选用大肠埃希菌显色琼脂培养                          式，更为灵活、合理。
        基替代麦康凯琼脂培养基对样品进行分离培养。在定                             2.4  其他控制菌
        量检验方法中，EP10.0 和 JP17 均采用 0.1、0.01、0.001 g               JP17 和 USP43 均规定了金黄色葡萄球菌的检验方
        （或mL）等3个供试品接种浓度的MPN法检查样品中大                          法，而EP10.0和ChP2020则未规定该项目。JP17规定供
        肠埃希菌，为控制菌检查提供了更多的方法选择。                              试品经 TSB 培养基培养后，需转接至含 7.5％氯化钠的
        2.3 沙门菌                                             TSB 培养基再培养，以抑制背景菌；USP43 则仅采用
            在取样量上，除 EP10.0 要求取样 25 g（或 25 mL）至              TSB培养基单次增菌。在选择性培养基分离时，JP17和
        225 mL缓冲蛋白胨水溶液中培养外，其余各药典均规定                         USP43 除使用 MS 培养基外，还增加了 VJ 培养基和 BP
        取10 g（或10 mL）供试品加入TSB培养基中。在选择性                      培养基。在可疑菌落鉴定时，USP43选用血浆凝固酶试
        增菌培养阶段，USP43、EP10.0 和 ChP2020 均采用 RV 培              验，而 JP17 则可采用适宜的方法鉴定。此外，USP43 还
        养基在 30～35 ℃条件下培养，而 JP17 则将培养温度升                     提供了梭菌检测方法，与USP43“62”项下的非无菌产品
        高至（42±0.5）℃，以增加选择性。在分离阶段，USP43                      微生物检查方法相同。
        方法可在 BGA、XLD 或 HE 培养基中任选 1 个或多个；                    3 微生物限度标准
        EP10.0 和 ChP2020 则仅规定使用 XLD 培养基，JP17 还              3.1 EP10.0
        可选用沙门菌显色琼脂培养基。在可疑微生物鉴定上，                                EP10.0“5.1.8”将中药饮片及其提取物分成 3 类：用



        ·2698 ·  China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 22                                 中国药房    2020年第31卷第22期
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