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表 6 SFI 对 LPS 诱导的 RAW264.7 细胞上清液中炎症                 游炎症因子（TNF-α、IL-1β）作为考察指标。
              因子水平的影响（x±±s，n＝3，μg/mL）                           本课题组前期研究表明，SFI 对内毒素休克模型大
        Tab 6 Effects of SFI on inflammatory factors in the  鼠肺组织有较好的保护作用，且能抑制大鼠肺组织中
               supernatant of LPS-induced RAW264.7 cells    NF-κB、HMGB1 的表达，推测 SFI 可能通过抑制免疫细
              （x±±s，n＝3，μg/mL）                              胞 HMGB1 的表达、迁移和分泌来抑制 NF-κB 信号通路

        组别          HMGB1          IL-1β         TNF-α      的活化和炎症介质的产生，从而发挥对器官起到保护的
        空白对照组       0.059±0.012  0.069±0.014   0.081±0.011  作用  [7-8] 。基于此，本研究通过建立细胞炎症模型，以具
        LPS组        0.146±0.025 ＊＊  0.273±0.023 ＊＊  0.295±0.026 ＊＊
        阳性对照组       0.077±0.009 ##  0.091±0.014 ##  0.089±0.016 ##  有确切炎症反应抑制作用的组蛋白去乙酰化酶抑制剂
        SFI低剂量组     0.081±0.021 ##  0.161±0.008 ##  0.145±0.009 ##  RGFP966 为阳性对照，对 SFI 治疗内毒素休克的机制
                                                                    [22]
        SFI中剂量组     0.072±0.019 ##  0.134±0.007 ##  0.112±0.008 ##
        SFI高剂量组     0.069±0.008 ##  0.125±0.006 ##  0.107±0.007 ##  进 行 进 一 步 研 究 。 结 果 显 示 ，在 LPS 的 诱 导 下 ，
                            ＊＊
            注：与空白对照组比较， P＜0.01；与LPS组比较，P＜0.01               RAW264.7细胞内HMGB1 mRNA及蛋白的表达均显著
                                              ##
            Note：vs. blank control group， P＜0.01；vs. LPS group，P＜0.01  上调，且上调的 HMGB1 主要分布于胞浆，而核内的
                                ＊＊
                                                  ##
        臣药，可补火助阳，尚能温经止痛、通痹散结；两药配伍，                          HMGB1 则显著减少，提示核内 HMGB1 大量向核外迁
        共奏回阳救逆、益气固脱之效，故临床上将其用于治疗                            移，甚至大量分泌到细胞上清液中；与此同时，HMGB1
        外感阳气脱失的外感厥脱证，即感染性休克、失血性休                            的特异性受体 TLR4 的蛋白表达量亦显著增加，提示胞
        克等  [13-16] ，但其具体作用机制还有待深入研究和完善。                    外 HMGB1 可 能 与 受 体 结 合 激 活 炎 症 通 路 ；随 着
            HMGB1 是由 215 个氨基酸构成的高度保守的核内                     HMGB1分泌增加，细胞上清液中炎症因子IL-1β、TNF-α
        结构蛋白，具有稳定核小体结构、修复及重组DNA、调控                          也显著上调，提示炎症通路被激活，大量致炎因子产
        基因转录、调节细胞增殖和分化等多种生理功能                        [2-4] 。  生。经 SFI 作用后，各给药组细胞中 HMGB1 mRNA 及
        1999 年，Wang H 首次通过脓毒症小鼠模型证实，胞外                      其蛋白的表达量，阳性对照组和SFI中、高剂量组细胞中
                      [17]
        HMGB1是一种重要的炎症介质，且具有较强的致死性，                          TLR4 的 蛋 白 表 达 量 以 及 各 给 药 组 细 胞 上 清 液 中

        这一发现使得学者们开始认识到HMGB1作为晚期炎症                           HMGB1、IL-1β、TNF-α水平均较LPS组显著降低；同时，
        因子的重要意义。后续研究发现，胞外 HMGB1 与特异                         阳性对照组和 LPS 中、高剂量组细胞核中 HMGB1 蛋白
        性受体 RAGE 和 TLRs 家族结合，可激活 NF-κB 信号通                  表达量均显著升高，各给药组细胞胞浆中 HMGB1 蛋白
        路，导致促炎因子如TNF-α、IL-1β等大量产生，而这些促                      表达量均显著降低。由此可见，SFI不仅抑制了HMGB1
        炎因子又可激活单核/巨噬细胞主动分泌 HMGB1                     [2-4] 。  的转录、翻译、核转位及分泌，同时还增加了细胞核内
        可见，HMGB1的分泌是一个正反馈过程，其可作为促炎                          HMGB1 的蛋白表达，从源头上降低了 HMGB1 出胞作
        因子在细胞因子级联放大效应中不断触发并维持下游                             为致死性炎症因子及诱导后续炎症反应的可能性，这可
                                    [18]
        炎症反应，加速脓毒血症的进程 。由此可见，HMGB1                          能是 SFI 发挥“扶阳固脱”功效的具体体现。此外，本研
        是重症炎症相关性疾病发病机制中的关键调控因子。                             究还观察到 SFI 抑制了 HMGB1 特异性受体 TLR4 蛋白
            有研究表明，核内 HMGB1 在炎症反应过程中可能                       的表达，并同时抑制了 HMGB1/TLR4 信号通路下游的
        扮演着与胞内 HMGB1 完全不同的角色，如髓源性                           炎症因子的分泌，提示SFI可通过抑制HMGB1/TLR4信
        HMGB1 编码基因敲除小鼠对 LPS 的敏感性增加，其肺                       号通路的活化从而减少炎症因子的产生。
        内巨噬细胞分泌的炎症因子水平显著高于野生型小鼠，                                综上所述，SFI 可通过抑制巨噬细胞中 HMGB1 核
        肺组织损伤也更为严重 。类似的情况在胰腺HMGB1                           移位，从而减少HMGB1分泌出胞，避免炎症通路的进一
                             [19]
        编码基因敲除小鼠和肝脏HMGB1编码基因敲除小鼠体                           步激活和炎症因子的产生，这可能是其治疗危急重症的
        内得以证实      [20-21] 。上述研究结果提示，一方面，HMGB1              关键机制。但 SFI 为什么可抑制 HMGB1 出核、这种作

        迁移到细胞外，可作为致死性炎症因子促发炎症“瀑布                            用是否跟抑制HMGB1的乙酰化水平有关等问题均有待
        效应”；另一方面，核内HMGB1丢失，又可导致细胞对损                         后续深入研究。
        伤因素的刺激反应更为剧烈，这可能是组织器官受损和                            参考文献
        功能障碍的重要原因。因此，抑制 HMGB1 的核移位显                         [ 1 ]  MARSHALL JC. Sepsis definitions：a work in progress[J].
        得尤为重要。基于上述原因，本研究以HMGB1为对象，                               Crit Care Clin，2018，34（1）：1-14.
        并将可反映炎症严重程度的HMGB1/TLR4信号通路下                         [ 2 ]  INGELS C，DERESE I，WOUTERS PJ，et al. Soluble


        ·2590 ·  China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 21                                 中国药房    2020年第31卷第21期
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