Page 41 - 2020年21期

a. 空白对照 择性地分布在细胞核内。各组细胞中荧光强度的大小
b. 香豆素胶束
800 c. 香豆素/ART胶束
d. PFV修饰香豆素/ART共载靶向胶束 顺序为PFV修饰香豆素/ART共载靶向胶束组＞香豆素/
c
600 ART 胶束组＞香豆素胶束组＞空白对照组，结果见
％ a b 图 4。
细胞存活率， 400 d 2.7 PFV 修饰 PTX/ART 共载靶向胶束对 BGC-823 细

200 胞侵袭的影响
采用Transwell小室法进行测定。按“2.1”项下方法
0
10 3.4 10 4 10 5 10 6 10 7.1 分别制备空白胶束（空白对照）、PTX 胶束、ART 胶束、
FL1-A
A.不同胶束中香豆素的荧光强度曲线 PTX/ART 胶束和 PFV 修饰 PTX/ART 共载靶向胶束，各
50 1. 空白对照 含药胶束中 PTX 浓度均为 10 μmol/L，ART 浓度均为
2. 香豆素胶束
（ ×100 000 ） 40 3. 香豆素/ART胶束 ＊ 100 μmol/L。取对数生长期 BGC-823 细胞，以 0.25％胰 5
4. PFV修饰香豆素/ART共载靶向胶束
蛋白酶溶液消化后，接种在 Transwell 小室中（1.5×10
30
荧光强度 20 个/孔），分为不同胶束给药组，各小室中加入相应含药培
养基[200 μL/室，给药量为20 μL/室]。在24孔板中加入
10
0 含 10％胎牛血清的培养基（700 μL/孔），将上述 Tran-
1 2 3 4
B.不同胶束中香豆素的荧光强度值 swell 小室放在 24 孔板中培养 10 h 后，用棉球擦去小室
＊
注：PFV修饰香豆素/ART共载靶向胶束与其他各样品比较，P＜ 中未侵袭的细胞，并用 4％多聚甲醛固定小室下方侵袭
0.05
的细胞25 min，然后用0.1％结晶紫染色15 min。采用显
Note：PFV modified PTX/ART co-loaded targeting micelles vs.
微镜观察，并随机选取1个视野拍照，镜下紫色信号的强
＊
other micelles，P＜0.05
度与侵袭通过小室基底膜的细胞数量成正比。
图3 BGC-823细胞对胶束的摄取情况
结果显示，与空白对照组比较，ART 胶束组、PTX/
Fig 3 Uptake of micelles by BGC-823 cells
ART胶束组以及PFV修饰PTX/ART共载靶向胶束组的
进行细胞分组、给药，继续培养3 h后，以PBS洗板，加入 紫色信号强度依次减弱，表明侵袭的细胞数量依次减
4％多聚甲醛固定细胞8 min，在避光处用Hoechst 33258 少。各胶束对细胞的侵袭抑制作用强弱顺序为 PFV 修
对细胞进行染色。采用荧光显微镜观察细胞中药物的 饰 PTX/ART 共载靶向胶束＞PTX/ART 胶束＞ART 胶
分布情况，其中蓝色荧光区域代表 BGC-823 细胞核，绿 束＞PTX胶束＞空白对照，结果见图5。
色荧光区域代表香豆素，蓝绿色荧光区域为细胞与香豆 3 讨论
素分布的叠加处。 近年来，胶束作为化疗药物的运送载体在抗肿瘤方
结果显示，在各胶束样品中，PFV 修饰香豆素/ART 面的应用受到越来越多的关注，其疏水嵌段组成的聚合
共载靶向胶束在细胞中的荧光强度最大，说明药物可选 物胶束内核能够为难溶性药物提供贮藏空间，而疏水性

细胞核

香豆素

叠加

空白对照 香豆素胶束 香豆素/ART胶束 PFV修饰香豆素/ART共载靶向胶束
图4 胶束在BGC-823细胞中的分布显微图
Fig 4 Micrographs of the distribution of micelles in BGC-823 cells

中国药房 2020年第31卷第21期 China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 21 ·2595 ·