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测无法全面评价药物的质量，因此为了提高该药的质 一对照品母液5 mL，置于20 mL量瓶中，摇匀，即得莫诺
量、保证用药的安全有效，本研究采用高效液相色谱法 苷、马钱苷、松果菊苷、毛蕊花糖苷质量浓度分别为
（HPLC）同时测定了还少胶囊中莫诺苷、马钱苷、松果菊 105.80、89.88、325.25、326.25 μg/mL的混合对照品溶液。
苷、毛蕊花糖苷的含量，以期为全面评价该药质量、提高 2.2.2 供试品溶液 取样品10粒，研细，混合均匀，精密
其质量标准提供参考。 称取粉末 1.0 g，置于三角瓶中，用移液管加入 50％甲醇
1 材料 20 mL，称定质量，超声（功率：250 W，频率：40 kHz）处理
1.1 仪器 30 min，放至室温后，再次称定质量，用50％甲醇补足减
LC-20AT 型 HPLC 仪 ，包 括 LC-20AT 型 四 元 泵 、 失的质量，摇匀，经0.45 μm微孔滤膜滤过，取续滤液，作
SIL-20A 型进样器、SPD-20A 型检测器、CTO-20A 型柱 为供试品溶液。
温箱（日本Shimadzu公司）；Agilent 1260型 HPLC仪，包 2.2.3 阴性样品溶液 参照还少胶囊的配方比例和制
括G1311C型四元泵、G1329B型进样器、G1316A型柱温 备工艺，制备缺山茱萸、熟地黄和肉苁蓉的阴性样品，并
箱、G1314F型检测器（美国Agilent公司）；AB204A/S型万 按“2.2.2”项下方法制备阴性样品溶液。
分之一分析天平（瑞士Mettler Toledo公司）；KH-2000DB 2.3 专属性考察
型超声波清洗器（昆山禾创超声仪器有限公司）；SCI- 分别精密吸取“2.2”项下混合对照品溶液、供试品溶
20-D型超纯水机（重庆科润水处理设备有限公司）。 液和阴性样品溶液各 10 μL，按“2.1”项下色谱条件进样
1.2 药品与试剂 测定，记录色谱图，详见图 1。由图 1 可知，各成分峰形
莫诺苷对照品（批号：MRS-106634，纯度：100％）购 较好且均能达到基线分离，分离度均大于1.5；理论板数
自美国 Stanford 公司；马钱苷对照品（批号：111640-
按莫诺苷峰计均不低于8 000；阴性样品对测定无干扰。
201707，纯度：99.2％）、松果菊苷对照品（批号：111670-
2.4 线性关系考察
200503，纯 度 ：100％）、毛 蕊 花 糖 苷 对 照 品（批 号 ：
取“2.2.1”项下混合对照品溶液 0.25、0.5、1.0、2.0、
111530-201713，纯度：92.5％）均购自中国食品药品检定
4.0、5.0 mL，分别置于 5 mL 量瓶中，加 50％甲醇稀释至
研究院；甲酸、甲醇、乙腈均为色谱纯，其余试剂均为分
刻度，摇匀，即得系列线性工作溶液。取上述工作溶液
析纯，水为纯化水。11 批还少胶囊（重庆三峡云海药业
各适量，按“2.1”项下色谱条件进样测定，记录色谱图。
股份有限公司，批号：170602No·058，规格：0.42 g/粒；批
以各成分质量浓度（X，μg/mL）为横坐标、峰面积（Y）为
号：180601No·132，规格：0.38 g/粒；批号：181101No·004，
纵坐标进行线性回归，结果见表1。
规格：0.38 g/粒；批号：181205，规格：0.38 g/粒；批号：
2.5 精密度试验
190101No·081，规格：0.38 g/粒；批号：190602No·035，规
取“2.4”项下线性工作溶液（莫诺苷、马钱苷、松果菊
格：0.42 g/粒；批号：190802No·003，规格：0.38 g/粒；批
苷、毛蕊花糖苷的质量浓度分别为 21.16、17.96、65.04、
号：190903No·101，规格：0.42 g/粒；批号：191005，规格：
65.24 μg/mL）适量，按“2.1”项下色谱条件重复进样测定
0.42 g/粒；批号：191006，规格：0.42 g/粒；批号：191007，
6 次，记录峰面积。结果，莫诺苷、马钱苷、松果菊苷、毛
规格：0.42 g/粒）。
2 方法与结果 蕊花糖苷峰面积的 RSD 分别为 0.46％、0.53％、0.62％、
0.66％（n＝6），表明仪器精密度良好。
2.1 色谱条件
2.6 稳定性试验
色谱柱：中谱红RD-C18 （250 mm×4.6 mm，5 μm）；流
动相：乙腈（A）-0.1％甲酸水溶液（B），梯度洗脱（0～10 精密吸取“2.2.2”项下供试品溶液（批号：191006）适
min，10％A；10～20 min，10％A→15％A；20～50 min， 量，分别于室温下放置 0、2、4、6、8、12、24 h 时按“2.1”项
15％A）；检测波长：240 nm（莫诺苷、马钱苷）、330 nm（松 下色谱条件进样测定，记录峰面积。结果，莫诺苷、马钱
果菊苷、毛蕊花糖苷）；流速：1.0 mL/min；柱温：35 ℃；进 苷、松果菊苷、毛蕊花糖苷峰面积的RSD分别为0.82％、
样量：10 μL。 0.39％、0.48％、0.69％（n＝7），表明供试品溶液于室温下
2.2 溶液的制备 放置24 h内稳定性良好。
2.2.1 混合对照品溶液 称取莫诺苷对照品 0.010 58 2.7 重复性试验
g、马钱苷对照品 0.009 06 g，分别置于 25 mL 量瓶中，加 精密称取还少胶囊粉末（批号：191006）1.0 g，共 6
50％甲醇溶解并稀释至刻度，得莫诺苷、马钱苷质量浓 份，按“2.2.2”项下方法制备供试品溶液，再按“2.1”项下
度分别为0.423 2、0.359 5 mg/mL的单一对照品母液；另 色谱条件进样测定，记录峰面积并按外标法计算样品中
称取松果菊苷对照品 0.013 01 g、毛蕊花糖苷对照品 4种成分的含量。结果，莫诺苷、马钱苷、松果菊苷、毛蕊
0.014 11 g，分别置于 10 mL 量瓶中，加 50％甲醇溶解并 花糖苷的平均含量分别为0.441、0.585、2.886、0.721 mg/g，
稀释至刻度，得松果菊苷、毛蕊花糖苷质量浓度分别为 RSD 分别为 0.52％、0.75％、0.49％、0.83％（n＝6），表明
1.301、1.305 mg/mL 的单一对照品母液。吸取上述各单 方法重复性良好。
中国药房 2020年第31卷第20期 China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 20 ·2509 ·
