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进样测定，记录色谱图，详见图 1。由图 1 可知，各色谱                       积。结果，原阿片碱、盐酸小檗碱、延胡索乙素峰面积的
        峰均能实现基线分离，分离度均大于1.5；理论板数按延                         RSD分别为1.1％、1.6％、0.7％（n＝6），表明供试品溶液
        胡索乙素峰计均不低于 3 000；阴性对照溶液对测定无                        于室温下放置12 h内基本稳定。
        干扰。                                                2.3.9  重复性试验       取“2.1.2”项下微波炮制酒制延胡
               140                                         索样品粉末 0.5 g，共 6 份，按“2.3.3”项下方法制备供试
               120
               100       1                                 品溶液，再按“2.3.1”项下色谱条件进样测定，记录峰面
              mAU  80                                      积并按标准曲线法计算各待测成分的含量。结果，原阿
               60
               40            2
               20                  3                       片碱、盐酸小檗碱、延胡索乙素的平均含量分别为
                0
                 0   10  20  30  40  50  60  70  80        0.051％、0.003％、0.051％，RSD 分别为 0.8％、1.0％、
                               t，min                       1.5％（n＝6），表明方法重复性良好。
                           A.混合对照品溶液
               140                                         2.3.10  加样回收率试验         精密称取已知含量的微波炮
               120
               100                                         制酒制延胡索样品粉末0.25 g，共6份，分别按质量比1∶1
              mAU  80                                      精密加入“2.3.2”项下混合对照品溶液适量，按“2.3.3”项
                60
                40       1
                20           2     3                       下方法制备供试品溶液，再按“2.3.1”项下色谱条件进样
                0
                 0   10  20  30  40  50  60  70  80        测定，记录峰面积并计算加样回收率。结果，原阿片碱、
                               t，min
                             B.供试品溶液                       盐酸小檗碱、延胡索乙素的加样回收率分别为99.15％～
               140                                         100.34％（RSD＝0.54％，n＝6）、99.52％～100.78％（RSD＝
               120
               100                                         0.69％，n＝6）、99.26％～99.79％（RSD＝0.28％，n＝6）。
              mAU  80                                      2.3.11  样品含量测定        分别取传统酒制法、微波炮制
                60
                40
                20                                         法制得的酒制延胡索样品粉末各适量，按“2.3.3”项下方
                0
                 0   10  20  30  40  50  60  70  80        法制备供试品溶液，再按“2.3.1”项下色谱条件进样测
                               t，min
                            C.阴性对照溶液                       定，平行操作3次，记录峰面积并按标准曲线法计算各待
           注：1.原阿片碱；2.盐酸小檗碱；3.延胡索乙素                        测成分的含量。
           Note：1. opioid alkaloid；2. berberine hydrochloride；3. tetrahydro-  2.4  单因素试验
        palmatine                                          2.4.1  黄酒量考察       取延胡索饮片，每份 20 g，共 5 份，
                      图1   高效液相色谱图
                                                           分别加入黄酒 1、2、4、6、8 g（约药材量的 5％～40％）和
                   Fig 1  HPLC chromatograms
                                                           适量水，拌匀，待辅料（水和黄酒，下同）吸尽后闷润2 h，
        2.3.6  线性关系考察        分别精密量取“2.3.2”项下混合             单层铺于微波炉托盘上，设定微波炉火力大小为 30％，
        对照品溶液0.5、1、2、3、4、5、7.5 mL，置于10 mL量瓶中，              炮制时间为 3 min，加热后取出，放凉。按“2.3.11”项下
        用甲醇稀释至刻度，得系列线性标准溶液。取上述系列
                                                           方法测得3种生物碱类成分的总含量分别为0.104 5％、
        线性标准溶液适量，按“2.3.1”项下色谱条件进样测定，                       0.112 1％、0.112 4％、0.115 7％、0.109 8％[3种生物碱类
        记录峰面积。以进样量为横坐标（X，μg）、峰面积（Y）为                       成分的总含量＝（原阿片碱质量+盐酸小檗碱质量+延胡
        纵坐标进行线性回归，结果见表1。                                   索乙素质量）/饮片质量×100％，下同]。结果，当黄酒量
                    表1 回归方程与线性范围                           为 6 g 时，3 种生物碱类成分的总含量最高，故选择黄酒
            Tab 1 Regression equations and linear ranges
                                                           量4～8 g进行后续研究。
        待测成分        回归方程            R  2      线性范围，μg      2.4.2  闷润时间考察        取延胡索饮片，每份 20 g，共 5
        原阿片碱      Y＝0.058X－1.093   0.999 6    0.100～1.500
        盐酸小檗碱     Y＝0.023X+0.617   0.999 5    0.012～0.188  份，加入黄酒6 g和适量水，拌匀，待辅料吸尽后，分别闷
        延胡索乙素     Y＝0.046X－1.813   0.999 8    0.050～0.750  润 0.5、1、2、3、4 h，单层铺于微波炉托盘上，设定微波炉
        2.3.7  精密度试验      取“2.3.2”项下混合对照品溶液适               火力大小为 30％，炮制时间为 3 min，加热后取出，放
        量，加甲醇稀释5倍，按“2.3.1”项下色谱条件连续进样测                      凉。按“2.3.11”项下方法测得 3 种生物碱类成分的总含
        定6次，记录峰面积。结果，原阿片碱、盐酸小檗碱、延胡                         量分别为 0.106 8％、0.110 5％、0.114 6％、0.114 3％、
        索乙素峰面积的RSD分别为0.5％、1.1％、1.4％（n＝6），                  0.110 4％。结果，当闷润时间为 2 h 时，3 种生物碱类成
        表明仪器精密度良好。                                         分的总含量最高，故选择闷润时间 1～3 h 进行后续
        2.3.8  稳定性试验      取“2.3.3”项下微波炮制酒制延胡               研究。
        索样品的供试品溶液适量，分别于室温下放置0、2、4、6、                       2.4.3  火力大小考察        取延胡索饮片，每份 20 g，共 5
        8、12 h 时按“2.3.1”项下色谱条件进样测定，记录峰面                    份，加入黄酒 6 g 和适量水，拌匀，待辅料吸尽后闷润 2


        中国药房    2020年第31卷第20期                                            China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 20  ·2505 ·
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