Page 53 - 2020年20期

以化合物51为例，在正离子模式下其准分子离子为
m/z 203.033 7[M+H] ，推测可能的分子式为 C11H6O4。二
+
级质谱结果显示，分子离子峰丢失 1 分子 CO 得到碎片
+
m/z 353.087 6 离子 m/z 175.039 0[M－CO+H] ，丢失 2 分子 CO、3 分子
CO 分别得到碎片离子 m/z 147.043 8[M－2CO+H] 、m/z
+
－C7H10O5 －C9H6O3
+
119.085 6[M－3CO+H] ，丢失 1 分子 CO2得到碎片离子
+
m/z 159.044 0[M－CO2+H] ，丢失1分子CO2和1分子CO
得到碎片离子 m/z 131.048 4[M－CO2－CO+H] 。根据
+
[12]
m/z 179.034 8 m/z 191.056 0 该裂解规律并参考化合物成分数据库及相关文献 ，推
测化合物51为花椒毒酚（其裂解途径图略）。
在香豆素类成分的二级裂解碎片中发现，其母核上
的内酯位置有相似的中性基因丢失，主要为丢失 CO 或
CO2至氧失尽；同时，母核苯环上的取代基，烷基先丢失，
m/z 135.045 0
m/z 173.045 2 有甲氧基取代时易丢失甲基产生碎片，有较大基团时易
图6 隐绿原酸的裂解途径 发生氢重排而产生中性基因丢失。
Fig 6 Fragment pathways of cryptochlorogenic acid 2.5.5 其他 （1）酯类成分。本研究共鉴别出 4 种酯类
尼酸类化合物相似的裂解途径，碎片离子m/z 191或m/z 成分，分别为化合物20、44、50、59，丁公藤、枳壳、陈皮为
173 表明存在奎尼酸基团，碎片离子 m/z 179 或 m/z 135 上述成分的主要来源药材。（2）氨基酸类成分。本研究
表明存在咖啡酸基团，提示内部取代基位置的不同可能 共鉴别出 4 种氨基酸类成分，分别为化合物 1～3、7，枳
是区别的关键点。根据该裂解规律，经与对照品比对后 壳为上述成分的主要来源药材。（3）其他类化合物。本
推测化合物 36、33、43 分别为异绿原酸 A、B、C（其裂解 研究共鉴别出 15 种其他类化合物，包括 4 种挥发油类
途径图略）。 （化合物 10、18～19、26），2 种萜类（化合物 47、49），2 种
2.5.4 香豆素类 本研究共鉴别出 7 种香豆素类化合 酰胺类（化合物41～42），1种酚类（化合物46），6种不确
物，其结构简单，取代基均在苯环上，属于简单香豆素类 定分类的成分（化合物9、17、22、27、32、55），桂枝、枳壳、
化合物，分别为化合物 21、23、28～29、48、51、58，丁公 丁公藤、陈皮、麻黄为上述成分的主要来源药材（裂解途
藤、枳壳为上述成分的主要来源药材。其中，化合物 21 径略）。
秦皮乙素和5，7-二羟基香豆素互为同分异构体，秦皮乙 3 讨论
素来源于丁公藤，5，7-二羟基香豆素来源于枳壳。
本研究前期分别考察了 60％甲醇、70％甲醇、80％
以化合物 29 为例，在正离子模式下准分子离子为
甲醇、无水甲醇等不同溶剂的溶解效果。结果发现，以
m/z 193.049 5[M+H] ，推测可能的分子式为 C10H8O4。二
+
80％甲醇为溶剂时，仪器响应较高，图谱基线较为平稳，
级质谱结果显示，苯环上的甲氧基丢失甲基后形成碎片
得到峰数较多，故选择 80％甲醇为溶剂。同时，又考察
+
离子m/z 178.025 8[M－CH3+H] ，内酯位置处失去CO形
了水-甲醇、0.1％甲酸水溶液-甲醇和 0.1％甲酸水溶液-
成 m/z 165.054 5[M － CO + H] 碎 片 ，碎 片 离 子 m/z
+
乙腈等不同流动相系统。结果发现，流动相中加入少量
+
133.028 2[M－CO－CH3OH+H] 推断由 m/z 193.049 5
的酸，能有效改善峰形，提高分离度，且甲醇、乙腈均未
[M+H] 内酯环上丢失 CO，苯环上甲氧基上丢失 CH3并
+
影响色谱峰峰形，故选择 0.1％甲酸水溶液-甲醇为流动
脱去邻位的 OH 形成的特征碎片。根据该裂解规律，经
相进行梯度洗脱。
与对照品比对后确定化合物29为东莨菪内酯，其可能的
UPLC-Q-Exactive-MS 技术能通过正负离子切换和
裂解途径见图7。
全扫描模式进行测定，根据精确质量进行定性研究，再
根据二级质谱数据提高研究的准确性 。为更好地检
[31]
测与解析样品成分和低丰度的化合物，鉴别更多的分子
m/z 178.025 8 离子峰，本研究采用正、负离子模式进行监测，该方法不
仅可系统、全面地对冯了性风湿跌打药酒中的主要活性
m/z 193.049 5
成分进行快速识别，还可对有效成分化学谱进行探索，
m/z 165.054 5 m/z 133.028 2 为其药效物质、质量控制及作用机制研究奠定了基础。
图7 东莨菪内酯的裂解途径 本研究共鉴别出 59 种化合物，包括 12 种黄酮类、8
Fig 7 Fragment pathways of scopoletin 种生物碱、9种有机酸类、7种香豆素类、4种酯类、4种氨

中国药房 2020年第31卷第20期 China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 20 ·2479 ·