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            冯了性风湿跌打药酒是传承400余年的传世名方 ，                        对照品（批号：17061401）、异绿原酸 A 对照品（批号：
        该药原方仅有丁公藤、麻黄、桂枝、陈皮、黄精等5味中药                          19061201）、异绿原酸 B 对照品（批号：17121201）、异绿
        材，经多次修改后，方中添加了具有祛风活络功效的中                            原酸C对照品（批号：18070401）均购自上海圻明生物科
        药，现已演变成含有27味中药材的复方，但仍以丁公藤、                          技有限公司，纯度均大于98％；冯了性风湿跌打药酒（批
        麻黄、桂枝为主 。冯了性风湿跌打药酒被收载于 2015                         号：170114，规格：500 mL）购自国药集团冯了性（佛山）
                      [2]
        年版《中国药典》（一部），方中丁公藤祛风湿为方中君                           药业有限公司；甲酸[LC-MS级，批号：182088，赛默飞世
        药，配以桂枝、麻黄、羌活、蚕沙、白芷发散风寒、祛风湿、                         尔科技（中国）有限公司]；甲醇为色谱纯，其余试剂均为
        舒筋络，香附、木香、厚朴、枳壳、陈皮、苍术、苦杏仁、猪                         分析纯，水为纯净水。
        牙皂行气、燥湿、化痰，茴香、当归、川芎、乳香、没药、五                         2 方法与结果
        灵脂、牡丹皮温经、活血、祛瘀，白术、山药、补骨脂、黄                          2.1 试验条件
        精、菟丝子、泽泻补肝肾、强腰膝             [3-4] ，主要用于临床治疗         2.1.1  色谱条件       色谱柱：Thermo Accucore aQ RP18
                                                 [5]
        风寒湿痹、手足麻木、跌扑损伤、瘀滞肿痛等症 。现代                          （150 mm×2.1 mm，2.6 μm）；流动相：0.1％甲酸水溶液
        药理研究表明，冯了性风湿跌打药酒具有改善微循环、                           （A）-甲醇（B），梯度洗脱（0～5 min，5％A；5～60 min，
                      [6]
        抗炎消肿等作用 。                                           5％A→95％A）；流速：0.3 mL/min；柱温：30 ℃；进样量：
            目前，对于冯了性风湿跌打药酒的研究主要集中在                          2 μL。
        含量测定方面 。但由于其组方构成复杂、化学成分众                            2.1.2  质谱条件     离子源：加热电喷雾离子源（HESI）；
                     [7]
        多、分析方法单一，且尚未有关于该药化学成分分析的                            离子模式：正、负离子模式；鞘气、辅助气：氮气。正离子
        报道。近年来，液质联用技术在中药化学成分系统分                             模式——喷雾电压：3.5 kV，毛细管加热温度：350 ℃，鞘
        析、快速辨识领域中得到了越来越广泛的应用，具有选                            气压力：35 psi，辅气压力：15 arb，离子源加热温度：
        择性强、灵敏度高、分离能力好等优点，适用于复杂体系                           320 ℃；负离子模式——喷雾电压：3.2 kV，毛细管加热
        的成分分析，并能够提供化合物的大量结构信息，可弥                            温度：350 ℃，鞘气压力：35 psi，辅气压力：15 arb，离子源
        补紫外检测的定量灵敏度不高以及高效液相色谱无法                             加热温度：300 ℃。质量轴校准：外标法（质量误差小于
        对“全成分”定性分析的不足 。为此，本研究采用超高                           5 ppm）；一级质谱扫描范围：m/z 80.0～1 200.0，分辨率：
                                 [8]
        效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱联用技术                           70 000；二级质谱扫描范围：m/z 80.0～1 200.0，分辨率：
        （UPLC-Q-Exactive-MS）对冯了性风湿跌打药酒的化学                   17 500；碰撞电压：20、40、60 eV。
        成分进行鉴别，旨在为其药效物质辨识、质量控制、作用                           2.2  溶液的制备
        机制研究提供依据。                                           2.2.1  单一对照品溶液        精密称取东莨菪苷、东莨菪内
        1 材料                                                酯、伞形花内酯、秦皮乙素、咖啡酸、绿原酸、新绿原酸、
        1.1  仪器                                             隐绿原酸、异绿原酸 A、异绿原酸 B、异绿原酸 C 对照品
            Q-Exactive-Focus 型静电场轨道阱高分辨质谱系统                 适量，分别置于 10 mL 量瓶中，加甲醇溶解并定容，混
        （包括离子源、离子透镜系统、质量分析器、高能碰撞池、                          匀，经 0.22 μm 微孔滤膜滤过，取续滤液，即得适宜质量
        检测器）和UltiMate 3000型UPLC系统（包括分离单元、                   浓度的单一对照品溶液。
        检测器、Chromeleon 7 色谱工作站）均由美国 Thermo                  2.2.2  供试品溶液      取冯了性风湿跌打药酒5 mL，置于
        Fisher Scientific 公司提供；KQ-400DE 型数控超声波清             蒸发皿中，水浴蒸干，残渣加 80％甲醇溶解，稀释并用
        洗器（昆山市超声仪器有限公司）；HH-S6A 型电热恒温                        80％甲醇定容至50 mL量瓶中，混匀；精密量取5 mL，置
        水浴锅（北京科伟永兴仪器有限公司）；BS210S 型、                         于25 mL量瓶中，加80％甲醇稀释至刻度，混匀，经0.22
        Max210g 型万分之一电子分析天平，BT25S、Max21g 型                  μm微孔滤膜滤过，取续滤液，即得。
        十万分之一电子分析天平[赛多利斯科学仪器（北京）有                           2.3 化学成分数据库的建立
        限公司]。                                                   检索中国知网、维普网、PubMed 等数据库，收集冯
        1.2 药品与试剂                                           了性风湿跌打药酒中组方药材的化学成分信息。以麻
            东莨菪苷对照品（批号：16040805）、东莨菪内酯对                     黄 [9-11] 、枳壳  [12-14] 、桂枝  [15-16] 、丁公藤 [17-20] 、陈皮  [21-23] 等（由于
        照 品（批 号 ：161208）、伞 形 花 内 酯 对 照 品（批 号 ：              其余药材用量比例极少，且前期预试验发现这些药材相
        18010202）、秦皮乙素对照品（批号：18092803）、咖啡酸                  应的一级质谱信号响应不强，故仅检索上述5味主要药
        对 照 品（批 号 ：17122804）、绿 原 酸 对 照 品（批 号 ：              材）为主，建立包括化合物名称、分子式、相对分子量的
        1701904）、新绿原酸对照品（批号：17062003）、隐绿原酸                  化学成分数据库。采用 Xcalibur 2.0 软件计算相关化合


        ·2474 ·  China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 20                                 中国药房    2020年第31卷第20期
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