Page 39 - 2020年20期

该方法精密度良好。
320
2.3.2 稳定性试验 精密称取同一批生延胡索饮片粉 280
240
末（编号：A3）约0.5 g，按“2.1.2”项下方法制备供试品溶
200
液，分别于室温下放置 0、2、4、8、12、24 h 时按“2.2”项下 mV U， 160
色谱条件进样测定，记录色谱图。以盐酸巴马汀（峰 5） 120
80
作为参照，计算得到各共有峰相对保留时间和相对峰面 40
0
积的RSD均小于1.50％（n＝6），表明供试品溶液在室温
0 4 8 12 16 20 24 28 32 36 40 44 48 52 56 60 64 68 72 76
下放置24 h内稳定性良好。 t，min
A.生延胡索饮片
2.3.3 重复性试验 分别精密称取同一批生延胡索饮 320
片粉末（编号：A3）6份，每份约0.5 g，按“2.1.2”项下方法 280
240
制备供试品溶液，再按“2.2”项下色谱条件进样测定，记
200
录色谱图。以盐酸巴马汀（峰 5）作为参照，计算得到各 mV 160
U，
共有峰相对保留时间和相对峰面积的 RSD 均小于 120
80
1.50％（n＝6），表明该方法重复性良好。
40
2.3.4 HPLC 指纹图谱生成及共有峰指认 取 41 批生/ 0
醋延胡索饮片及配方颗粒适量，按“2.1.2”项下方法制备 0 4 8 12 16 20 24 28 32 36 40 44 48 52 56 60 64 68 72 76 80 84
t，min
供试品溶液，再按“2.2”项下色谱条件进样测定，记录色 B.生延胡索配方颗粒
谱图。利用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2012 440
400
[19]
版）》 ，分别以A1、B1、C1、D1为参照样品，设置时间窗 360
320
宽度为0.2 min，图谱间距为50，通过多点校正及自动峰 280
mV 240
匹配生成叠加指纹图谱，采用中位数法生成生/醋延胡索 U， 200
饮片和配方颗粒样品的对照指纹图谱（R），详见图2。在 160
120
80
上述指纹图谱中，分别确定了共有峰12个（生延胡索饮 40
0
片）、20个（生延胡索配方颗粒）、14个（醋延胡索饮片）、
0 4 8 12 16 20 24 28 32 36 40 44 48 52 56 60 64 68 72 76
16个（醋延胡索配方颗粒）。通过与对照品（见图1A）比 t，min
C.醋延胡索饮片
对，指认了其中5个色谱峰，即峰1、2、3、4、5分别为原阿 320
片碱、延胡索乙素、延胡索甲素、盐酸小檗碱、盐酸巴 280
240
马汀。
200
2.3.5 HPLC 指纹图谱相似度分析 利用《中药色谱指 mV 160
U，
纹图谱相似度评价系统（2012 版）》 对 41 批生/醋延胡 120
[20]
80
索饮片及配方颗粒的 HPLC 指纹图谱以及对照指纹图
40
谱（R）进行相似度评价。结果，11批生延胡索饮片的相 0
0 4 8 12 16 20 24 28 32 36 40 44 48 52 56 60 64 68 72 76
似度为0.529～0.981，7批生延胡索配方颗粒的相似度为 t，min
0.342～0.985，12 批醋延胡索饮片的相似度为 0.711～ D.醋延胡索配方颗粒
图2 HPLC指纹图谱共有模式和对照指纹图谱
0.999，11 批 醋 延 胡 索 配 方 颗 粒 的 相 似 度 为 0.437～
Fig 2 HPLC fingerprint common mode and control
0.998。可见，不同产地及批次的生/醋延胡索饮片及颗
fingerprint
粒纹图谱相似度有所差异，详见表2～表5。综合“2.3.4”
项下共有峰指认情况发现，延胡索饮片经过醋制后成分 度分别为 2.2、4.4、11.0、22.0、44.0 μg/mL，盐酸小檗碱质
谱有明显变化；制成颗粒后，成分谱也有明显增加的趋 量浓度分别为 2.6、5.2、13.0、26.0、52.0 μg/mL，盐酸巴马
势，可能与浓缩、干燥、制粒等产地加工工艺不同有关。 汀质量浓度分别为 2.3、4.6、11.5、23.0、46.0 μg/mL 的系
2.4 含量测定 列混合对照品溶液，按“2.2”项下色谱条件进样测定，记
2.4.1 线性关系考察 精密吸取“2.1”项下混合对照品 录峰面积。以质量浓度为横坐标（x，μg/mL）、峰面积为
溶液适量，加甲醇逐级稀释，制成原阿片碱质量浓度分 纵坐标（y）进行回归分析，结果见表6。
别为 1.9、3.8、9.5、19.0、38.0 μg/mL，延胡索乙素质量浓 2.4.2 精密度试验 精密吸取“2.1”项下混合对照品溶
度分别为 2.0、4.0、10.0、20.0、40.0 μg/mL，延胡索甲素浓 液，用甲醇稀释后，按“2.2”项下色谱条件连续测定6次，

中国药房 2020年第31卷第20期 China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 20 ·2465 ·