Page 57 - 2020年19期

（P＜0.05 或 P＜0.01），其相对活性分别下降约 61％、 3.5 GAC2 对 HL-7702 细胞中 SREBPs 及其下游基因
19％、30％、34％，有随 GAC2 剂量增加而降低的趋势， mRNA表达的影响
详见表4。 与空白对照组比较，25-HC组和GAC2中、高剂量组
细 胞 中 HMGCS1、MVK、SCD、HMGCR 基 因 mRNA，
25-HC组细胞中DHCR7基因mRNA，GAC2高剂量组细
胞中 SREBP-2 基因 mRNA 以及 25-HC 组和 GAC2 高剂
量组细胞中 DHCR24、MSMO1 基因 mRNA 的相对表达
量均显著降低（P＜0.05或P＜0.01），详见表5。
3.6 GAC2 对 HL-7702 细胞中 S6K/SREB 通路相关蛋
A. 空白对照组 B. 洛伐他汀组 白表达的影响
与空白对照组比较，25-HC 组和 GAC2 低、中、高剂
量组细胞中 n-SREBP-1 蛋白的相对表达量，25-HC 组和
GAC2高剂量组细胞中n-SREBP-2蛋白的相对表达量以
及雷帕霉素组和GAC2各剂量组细胞中p-S6K/S6K比值
均 显 著 降 低（P＜0.05 或 P＜0.01），详 见 图 3（图 中 ，
pre-SREBP-1、pre-SREBP-2 表 示 无 活 性 前 体 蛋 白
C. GAC2低剂量组 D. GAC2中剂量组 SREBP-1、SREBP-2）、表 6（表中，“-”表示没有加入相
应的药物进行干预，故无结果）。
3.7 GAC2与S6K蛋白分子对接情况
分子对接结果显示，GAC2 可完全嵌入 S6K 的结合
口袋中，并以氢键与3个氨基酸残基结合，分别为Arg335、
Arg330、Ala332；结合能为－6.81 kcal/mol（1 kcal＝4.19
kJ），详见图4。
E. GAC2高剂量组 4 讨论
图2 GAC2对HL-7702细胞中脂质堆积影响的显微图 高血脂是指血液中 TC 或 TG 含量过高或低密度脂
（尼罗红染色，×100） 蛋白胆固醇含量异常升高，又或上述多种指标同时增高
Fig 2 Micrographs of the effects of GAC2 on lipid ac- 所引发的全身代谢性疾病，现代医学表明，血脂异常会
cumulation of HL-7702 cells（Nile red staining， [2-3]
加速动脉粥样硬化、冠心病等心脑血管疾病的进程 。
×100）
因此，如何维持血脂平衡成为亟待解决的重要问题。
表 4 GAC2 对 HL-7702 细胞中 SREBPs 荧光素酶相对 SREBPs 是调节细胞脂质代谢平衡的核转录因子，包括
活性的影响（x±±s，n＝3） SREBP-1（含 SREBP-1c、SREBP-1a）、SREBP-2 等亚型。
Tab 4 Effects of GAC2 on the relative viability of 其中，SREBP-1c 主要参与调控内源性游离脂肪酸的从
SREBPs luciferase in HL-7702 cells（x ±± s， 头合成，SREBP-2 主要调节胆固醇的生产，而目前有关
n＝3） SREBP-1a 转录活性的研究较少 。SREBPs 首先在内
[22]
组别 SREBPs荧光素酶相对活性 组别 SREBPs荧光素酶相对活性 质网上形成无活性前体（pre-SREBP），当细胞内TC水平
空白对照组 1.00±0.07 GAC2中剂量组 0.70±0.05 ＊＊ 较低时，pre-SREBP 与剪切激活蛋白（SCAP）形成复合
25-HC组 0.39±0.02 ＊＊ GAC2高剂量组 0.66±0.03 ＊＊ [23]
GAC2低剂量组 0.81±0.04 ＊ 物 ；该复合物由细胞质被膜复合体Ⅱ（CopⅡ）转运至高
＊＊
＊
注：与空白对照组比较，P＜0.05， P＜0.01 尔基体，再经蛋白水解成核内成熟 SREBP（n-SREBPs）
＊
＊＊
Note：vs. blank control group，P＜0.05， P＜0.01 后，与细胞核中转录结合区域结合，并启动下游HMGCS1、
表5 GAC2对HL-7702细胞中SREBPs及其下游基因mRNA表达的影响（x±±s，n＝3）
Tab 5 Effects of GAC2 on mRNA expression of SREBPs and their downstream genes in HL7702 cells（x±±s，n＝3）
组别 HMGCS1 MVK DHCR7 SCD SREBP-2 HMGCR DHCR24 MSMO1
空白对照组 1.00±0.05 1.00±0.07 1.00±0.05 1.00±0.02 1.00±0.10 1.00±0.10 1.00±0.09 1.00±0.08
25-HC组 0.39±0.01 ＊＊ 0.45±0.01 ＊＊ 0.71±0.02 ＊＊ 0.41±0.10 ＊＊ 0.83±0.02 0.65±0.06 ＊ 0.56±0.01 ＊＊ 0.51±0.05 ＊＊
GAC2中剂量组 0.68±0.04 ＊＊ 0.47±0.01 ＊＊ 1.02±0.03 0.50±0.04 ＊＊ 0.83±0.02 0.49±0.01 ＊＊ 0.84±0.12 1.80±0.07
GAC2高剂量组 0.62±0.01 ＊＊ 0.52±0.05 ＊＊ 0.95±0.02 0.55±0.09 ＊＊ 0.61±0.06 ＊ 0.38±0.01 ＊＊ 0.49±0.03 ＊＊ 0.68±0.01 ＊
＊
＊＊
注：与空白对照组比较，P＜0.05， P＜0.01
＊＊
＊
Note：vs. blank control group，P＜0.05， P＜0.01
中国药房 2020年第31卷第19期 China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 19 ·2355 ·