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行回归分析，得回归方程为 y＝3.296 2x+22.047（r＝                  PAK MG Ⅱ 、Shimadzu Shim-pack GIS 和 Welch Ulti-
        1.000 0）。结果显示，芥子碱硫氰酸盐检测进样量的                        mate XB-C18 ）对芥子碱硫氰酸盐含量的影响。结果，芥
                                                               ®
        线性范围为 23.27～9 574.42 ng。以信噪比 3 ∶ 1 得检              子 碱 硫 氰 酸 盐 含 量 的 RSD 分 别 为 0.92％ 、0.93％ 、
        测限为 0.50 μg/mL，以信噪比 10 ∶ 1 得定量限为 1.68              1.05％、1.22％（n＝3或n＝5），表明该方法耐用性良好。
        μg/mL。                                             2.4.13  样品含量测定        取 3 个批次的十味益脾颗粒样
        2.4.7  精密度试验       分别精密吸取质量浓度为 28.85               品，按照“2.4.3”项下方法制成供试品溶液，每批平行制
        μg/mL的对照品溶液，按照“2.4.1”项下色谱条件重复测                     备2份，再按照“2.4.1”项下色谱条件进样测定，记录峰面
        定峰面积 6 次。结果，峰面积的 RSD 为 0.24％（n＝6），                 积并按标准曲线法计算含量，结果见表2。3批样品中芥
        表明仪器的精密度良好。                                        子碱硫氰酸盐的平均含量为0.168 4 mg/g。
        2.4.8  重复性试验      精密称取批号为 190501 的十味益                         表2 样品含量测定结果（n＝2）
        脾颗粒 5.0 g，共 6 份，按照“2.4.3”项下方法制成供试品                 Tab 2 Results of content determination of samples
        溶液，再按照“2.4.1”项下色谱条件进样测定，记录峰面                              （n＝2）
        积并按标准曲线法计算含量。结果，芥子碱硫氰酸盐的                           批号                   含量，mg/g                SD，％
        平均含量为 0.225 8 mg/g，RSD 为 0.29％（n＝6），表明该            190501                0.220 6               2.15
                                                           181101                0.086 4               1.07
        方法的重复性良好。
                                                           180401                0.198 1               1.10
        2.4.9  中间精密度试验        按“2.4.8”项下方法，由同一实
        验室的不同分析人员在不同时间分别制备十味益脾颗                            3 讨论
                                                           3.1 显微鉴别的药材选择
        粒（批号：190501）供试品溶液6份，并按“2.4.1”项下色谱
                                                               在十味益脾颗粒的生产工艺中，有 3 味药材是经粉
        条件以不同仪器测定其中芥子碱硫氰酸盐的含量。结
                                                           碎后入药，分别是麦芽、六神曲和鸡内金，现行标准 中
                                                                                                        [1]
        果，芥子碱硫氰酸盐的平均含量为0.221 2 mg/g，RSD为
                                                           仅对麦芽药材进行了显微鉴别。显微鉴别是中药粉末
        1.15％（n＝6），表明该方法的中间精密度良好。
                                                           的专属性鉴别方法，具有操作简单、专属性强的优点，常
        2.4.10  稳定性试验      取“2.4.8”项下的供试品溶液（批
                                                           用于处方工艺中药材的粉末鉴别控制，同时也有助于研
        号：190501），分别于室温下放置 0、1、2、4、8、12、16、20、
                                                           究者优化其生产工艺，因此笔者在现行质量标准的基础
        24 h 时按照“2.4.1”项下色谱条件进样测定，记录峰面
                                                           上增加了六神曲和鸡内金药材的显微鉴别，从而保证药
        积。结果，芥子碱硫氰酸盐峰面积的RSD为0.57％（n＝
                                                           品的质量。
        9），表明该溶液在24 h内稳定性良好。
                                                           3.2  TLC鉴别的药材选择
        2.4.11  加样回收率试验        精密称取批号为190501的十
                                                               由于十味益脾颗粒的现行标准 中仅有山药和莲子
                                                                                          [1]
        味益脾颗粒粉末2.5 g，共9份，置于具塞锥形瓶中，分别
                                                           的 TLC 鉴别，同时除了方中对麦芽进行显微鉴别以外，
        精密加入质量浓度为 304.73 μg/mL 的芥子碱硫氰酸盐
                                                           其余药材均未有质量控制的方法，因此本课题组在前期
        对照品溶液 1、2、3 mL，每个量 3 份，然后按照“2.4.3”项
        下方法制成供试品溶液，再按照“2.4.1”项下色谱条件进                       的预试验中分别对茯苓、薏苡仁、山楂、鸡内金、大枣、莱
                                                           菔子等药材进行了 TLC 鉴别考察。结果发现，茯苓、薏
        样测定，记录峰面积并计算加样回收率，结果见表1。
                    表1 加样回收率试验结果                           苡仁、大枣等药材的 TLC 鉴别阴性样品均有较大的干
                  Tab 1 Results of recovery tests          扰，且无法通过调整展开剂、显色剂和供试品的制备方
                                                           法等予以排除，故未列入正文；本课题组只发现山楂、莱
        称样量，g 样品含量，μg  加入量，μg  测得值，μg  回收率，％  平均回收率，％ RSD，％
        2.502 9  565.2  304.7  871.2  100.43  100.89  0.41  菔子药材的 TLC 鉴别具有专属性强、斑点显色清晰、分
        2.502 3  565.0  304.7  872.6  100.95               离良好的特点，故增加了山楂和莱菔子药材的TLC鉴别
        2.502 8  565.1  304.7  873.7  101.28
        2.502 4  565.0  609.5  1 174.2  99.95  99.40  0.49  进行质量控制，从而完善十味益脾颗粒的质量标准。
        2.502 1  565.0  609.5  1 168.4  99.00              3.3 色谱条件的选择
        2.503 5  565.3  609.5  1 170.3  99.26                  芥子碱硫氰酸盐是莱菔子药材中的主要活性成分，
        2.503 8  565.4  914.2  1 478.0  99.82  99.63  0.18
        2.503 7  565.3  914.2  1 475.7  99.58              具有下气、降压和消食的作用，2015年版《中国药典》（一
                                                                                                [4]
        2.504 0  565.4  914.2  1 475.0  99.50              部）对其测定主要是采用苯基柱进行测定 。由于苯基
        2.4.12  系统耐用性考察        取“2.4.3”项下的供试品溶液            柱的适用范围较窄，且耐用性较差，因此选择通用的C18
       （批号：190501），按“2.4.1”项下色谱条件进样测定，分别                   柱进行分析测定具有更广泛的适用性。在色谱条件的
        考察不同检测波长（324、326、328 nm）、不同流速（0.8、                 选择时，本课题组分别对流动相的组成及比例进行了考
        1.0、1.2 mL/min）、不同柱温（20、30、40 ℃）、不同色谱柱             察，曾采用乙腈-3％冰醋酸溶液（15 ∶ 85，V/V）、甲醇-1％
       （Waters XTERRA RP、Agilent Eclipse XDB、CAPCELL       冰醋酸溶液（30 ∶ 70，V/V）、乙腈-0.08 mol/L 磷酸二氢钾
                       ®

        中国药房    2020年第31卷第18期                                            China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 18  ·2217  ·
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