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1 2 3 4 S 5 1 2 3 4 S 5
A.日光 B.紫外光（365 nm）
注：1～3 为样品（依次为 190501、181101、180401）；4 为模拟阳性 1 2 3 4 5 S 6
注：1～3 为样品（依次为 190501、181101、180401）；4 为模拟阳性
样品；S为熊果酸对照品；5为阴性样品
Note：1-3 are samples（190501，181101，180401，respectively）；4 is 样品；5.莱菔子对照药材；S为芥子碱硫氰酸盐对照品；6为阴性样品
simulated positive sample；S is ursolic acid control；5 is negative sample Note：1-3 are samples（190501，181101，180401，respectively）；4 is
simulated positive sample；5 is Semen Raphani reference substance；S is
图2 山楂药材的薄层鉴别图
sinapine thiocyanate control；6 is negative sample
Fig 2 TLC chromatograms of Crataegi Fructus
图3 莱菔子药材的薄层鉴别图
子碱硫氰酸盐对照品，加甲醇溶解稀释制成每1 mL含1 Fig 3 TLC Chromatogram of Semen Raphani
mg的溶液，作为对照品溶液。取处方量的1/10，按照十
2.4.5 专属性考察 分别取“2.4.2”“2.4.3”“2.4.4”项下
味益脾颗粒处方工艺制备模拟阳性样品和缺莱菔子药
对照品溶液（28.85 μg/mL）、供试品溶液（批号：190501）
材的阴性样品，按上述供试品溶液制备方法制成模拟阳
和阴性样品溶液，按照“2.4.1”项下色谱条件进样测定，
性样品溶液和阴性样品溶液。按照2015年版《中国药典》 记录色谱图。结果，阴性样品对芥子碱硫氰酸盐的含量
（四部）中TLC法 ，吸取上述溶液各3 μL，分别点于同一 测定无干扰，理论板数按芥子碱硫氰酸盐峰计不低于
[18]
硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-甲酸-水（10∶2∶3，V/V/V）的 8 000，详见图4。
上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置于紫外光灯 50 200
（365 nm）下检视。结果，供试品和模拟阳性样品在与莱 40 160
菔子对照药材和芥子碱硫氰酸盐对照品相应位置处显 30 芥子碱硫氰酸盐 120
mAU mAU
相同的荧光斑点，且阴性样品无干扰，详见图3。 20 80
2.4 莱菔子药材中芥子碱硫氰酸盐的含量测定 10 40 芥子碱硫氰酸盐
0 0
2.4.1 色谱条件 色谱柱：Waters Xterra-RP C18 （250
0 5 10 15 20 25 0 5 10 15 20 25
mm×4.6 mm，5 μm）；流动相：乙腈-0.08 mol/L 磷酸二氢 t，min t，min
A.对照品溶液 B供试品溶液
钾溶液（10 ∶ 90，V/V）；流速：1.0 mL/min；检测波长：326
200
nm，柱温：30 ℃，进样量：10 μL。
160
2.4.2 系列对照品溶液的制备 称取芥子碱硫氰酸盐 120
对照品适量，精密称定，置于10 mL量瓶中，加流动相溶 mAU 80
解并稀释至刻度，制成质量浓度分别为 2.33、7.76、 40
28.85、86.17、287.23、957.44 μg/mL的系列对照品溶液。 0
2.4.3 供试品溶液的制备 取十味益脾颗粒，研成粉 0 5 10 15 20 25
t，min
末，取约 5 g，精密称定，置于具塞锥形瓶中，精密加入 C.阴性样品溶液
70％甲醇50 mL，称定质量，超声处理30 min，取出放凉， 图4 高效液相色谱图
Fig 4 HPLC chromatograms
再次称定质量，用 70％甲醇补足减失质量，摇匀，滤过，
取续滤液用0.45 μm滤膜滤过，即得供试品溶液。 2.4.6 线性关系、检测限、定量限考察 精密吸取
2.4.4 阴性样品溶液的制备 取处方量的1/10，按照十 “2.4.2”项下的系列对照品溶液，按照“2.4.1”项下色谱条
味益脾颗粒处方工艺，制备缺莱菔子药材的阴性样品， 件进样测定，记录峰面积。各样品平行进样2次。以峰
再按照“2.4.3”项下方法制成阴性样品溶液。 面积的平均值为纵坐标（y）、进样量为横坐标（x，ng）进

·2216 · China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 18 中国药房 2020年第31卷第18期