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值，计算细胞中 MDA 含量和 ROS 水平以及上清液中 主成分、多次迭代后，拟合出22个共有峰所对应的化学
LDH含量。试验重复3次。 成分对抗心肌细胞缺氧/复氧损伤的重要程度（即标准化
2.2.5 数据处理及结果分析 使用SPSS 17.0软件对数 回归系数）并排序，结果见表4。
据进行统计分析。计量资料以x±s表示，多组间比较采 表 3 金莲花不同提取物中 22 个共有峰与药效的 GRA

用单因素方差分析，组间两两比较采用t检验。P＜0.05 结果
表示差异有统计学意义。各组细胞的存活率、MDA 含 Tab 3 GRA results of 22 common peaks of different
量、ROS水平、LDH含量的检测结果见表2。 extracts of T. chinensis with drug effects
表 2 各组细胞的存活率、MDA 含量、ROS 水平、LDH 峰号 保留时间，min 关联度 排序 峰号 保留时间，min 关联度 排序
含量的检测结果（x±±s，n＝3） 1 22.943 0.816 0 21 12 50.036 0.863 9 7
2 24.162 0.817 0 20 13 57.927 0.820 5 19
Tab 2 Determination results of survival rate，MDA 3 26.681 0.840 1 12 14 58.615 0.823 4 18
content，ROS level and LDH content of cells 4 31.709 0.883 3 3 15 68.639 0.847 8 9
5 33.508 0.882 2 4 16 71.026 0.830 4 14
in each group（x±±s，n＝3） 6 36.133 0.902 9 1 17 72.703 0.833 4 13
组别 细胞存活率，％ MDA，μmol/g ROS，U/mL LDH，U/L 7 37.847 0.815 9 22 18 74.173 0.843 2 10
正常对照组 99.98±4.05 1.78±0.34 1.28±0.22 40.58±2.66 8 39.819 0.873 4 5 19 78.108 0.840 8 11
缺氧/复氧组 38.69±3.85 ＊ 4.66±0.32 ＊ 7.86±0.85 ＊ 167.25±10.68 ＊ 9 40.77 0.866 3 6 20 82.031 0.826 8 15
缺氧/复氧+S1组 54.26±3.72 # 3.75±0.28 # 5.25±0.33 # 135.27±8.83 # 10 45.171 0.857 0 8 21 84.232 0.824 8 17
缺氧/复氧+S2组 69.65±4.02 # 2.25±0.36 # 3.05±0.28 # 99.58±7.13 # 11 46.646 0.887 1 2 22 90.046 0.825 9 16
缺氧/复氧+S3组 75.86±3.99 # 2.45±0.19 # 2.88±0.42 # 82.65±10.12 # 表 4 金莲花不同提取物中 22 个共有峰与药效的 PLS
缺氧/复氧+S4组 78.69±3.82 # 2.11±0.32 # 1.86±0.52 # 80.25±8.66 #
缺氧/复氧+S5组 70.96±3.72 # 2.85±0.41 # 2.58±0.41 # 89.27±9.07 # 分析结果
缺氧/复氧+S6组 68.25±3.68 # 3.48±0.52 # 3.08±0.27 # 101.36±10.82 # Tab 4 PLS analysis results of 22 common peaks of dif-
缺氧/复氧+S7组 41.65±3.14 4.48±0.36 7.14±0.29 168.99±9.98
缺氧/复氧+S8组 49.68±3.75 3.99±0.36 5.95±0.35 # 146.89±12.48 # ferent extracts of T. chinensis with drug effects
缺氧/复氧+S9组 92.58±4.08 # 2.04±0.22 # 1.56±0.45 # 69.68±5.95 #
缺氧/复氧+S10组 85.69±4.96 # 2.06±0.50 # 1.77±0.38 # 78.62±6.74 # 峰号 保留时间， 标准化回 排序 峰号 保留时间， 标准化回 排序
缺氧/复氧+S11组 44.69±3.99 4.15±0.36 6.89±0.42 155.88±9.58 min 归系数 min 归系数
1 22.943 －0.010 1 20 12 50.036 0.063 8 7
＊
#
注：与正常对照组比较，P＜0.05；与缺氧/复氧组比较，P＜0.05
2 24.162 －0.015 9 21 13 57.927 －0.004 4 18
＊
Note：vs. normal control group， P＜0.05；vs. hypoxia/reoxygen- 3 26.681 0.036 9 12 14 58.615 －0.005 4 19
#
ation group，P＜0.05 4 31.709 0.102 1 3 15 68.639 0.046 5 9
5 33.508 0.092 1 4 16 71.026 0.031 7 14
由表 2 可见，与正常对照组比较，缺氧/复氧组细胞
6 36.133 0.163 3 1 17 72.703 0.036 1 13
的存活率显著降低，MDA 含量、ROS 水平、LDH 含量均 7 37.847 －0.013 7 22 18 74.173 0.040 8 10
显著升高（P＜0.05）；与缺氧/复氧组比较，除缺氧/复氧+ 8 39.819 0.070 5 5 19 78.108 0.038 7 11
9 40.770 0.065 9 6 20 82.031 0.029 9 15
S7组、缺氧/复氧+S8组、缺氧/复氧+S11组外其余各组细 10 45.171 0.053 6 8 21 84.232 －0.001 1 17
胞的存活率均显著升高，MDA 含量均显著降低（P＜ 11 46.646 0.136 5 2 22 90.046 0.025 4 16
0.05）；除缺氧/复氧+S7组、缺氧/复氧+S11组外其余各组 由表4可见，22个共有峰所对应化学成分对药效的
细胞的ROS水平、LDH含量均显著降低（P＜0.05）。 贡献程度与GRA结果基本一致。除峰1、2、7、13、14、21

2.3 金莲花化学成分与抗心肌细胞缺氧/复氧损伤的 外，其余各峰与抗心肌细胞缺氧/复氧损伤活性的标准化
谱-效分析 回归系数均大于0，即成正相关；贡献排名前9位的共有
2.3.1 GRA 利用 DPS-3.01 软件，根据细胞存活率、 峰依次为峰6＞11＞4＞5＞8＞9＞12＞10＞15。
MDA含量、ROS水平、LDH含量计算金莲花抗心肌细胞 3 讨论
缺氧/复氧损伤的综合活性数据，加权系数均为0.25。将 据文献报道，谱-效关系的统计学分析有多种方法，
[5]
共有峰峰面积数据与综合活性数据进行关联，通过对原 如相关分析法、GRA法、聚类分析法及PLS法 。本文应
始数据进行标准化转化处理后，计算关联度并排序，以 用了GRA法和PLS法联合分析了金银花11种不同溶剂
评估各共有峰对药效的贡献，结果见表3。由表3可见， 提取物中22个共有峰对应成分与抗心肌细胞缺氧/复氧
22 个共有峰所对应的化学成分与药效的关联度均大于 损伤（药效）的谱-效关系。GRA法主要分析两种因素在
0.8，贡献排名前 9 位的共有峰依次为峰 6＞11＞4＞5＞ 发展过程中的关联度大小，但其只能单独考察各成分的
8＞9＞12＞10＞15。 重要性，并不能反映各成分对药效的综合作用 [6-7] ，故本
2.3.2 PLS 分析 利用 SIMCA-11 软件，经过多次提取 文又采用了PLS法，通过拟合药效与色谱峰之间的相关

·2222 · China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 18 中国药房 2020年第31卷第18期