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味益脾颗粒中麦芽通过显微鉴别进行控制，山药、莲子
通过薄层色谱（TLC）鉴别进行控制，山楂以熊果酸的含
量进行控制。但由于上述质量控制标准过于简单，难以
全面反映和控制十味益脾颗粒的质量。莱菔子作为十
味益脾颗粒处方中的臣药，处方量为 165/2 075 g，具有 A1（190501） A2（181101） A3（180401）
降气除胀、化痰消食的作用 [6-7] ，其主要含有芥子碱、莱菔
素、芥酸等成分，其中芥子碱硫氰酸盐具有降压、消食除
胀、润肠通便等作用，是莱菔子发挥药效的关键成
分 [8-11] 。鉴于此，本文在前期研究 [12-13] 和现行质量标准的
B1（190501） B2（181101） B3（180401）
基础上，参考文献方法 [14-16] ，建立了十味益脾颗粒中六神
曲和鸡内金药材的显微鉴别法，山楂和莱菔子药材的
TLC鉴别法，莱菔子中芥子碱硫氰酸盐含量测定的高效
液相色谱法（HPLC），旨在为十味益脾颗粒质量标准的
提高和改进提供依据。 C1（190501） C2（181101） C3（180401）
1 材料 注：A1～A3 为种皮栅状细胞（六神曲）；B1～B3 为种皮石细胞
1.1 仪器 （六神曲）；C1～C3为不规则碎块（鸡内金）
Note：A1-A3 are palisade cells of testa（Massa Medicata Fermenta-
1260 型 HPLC 仪，包括 Agilent Chemstation C.01.07
ta）；B1-B3 are stone cells of testa（Massa Medicata Fermentata）；C1-C3
SR2 [255]色谱工作站（美国 Agilent 公司）；e2695 型 are irregular fragments（Galli Gigerii Endothelium Corneum）
HPLC仪（美国Waters公司）；DM3000型生物显微镜（德 图1 六神曲和鸡内金药材的显微鉴别图（×400）
国Leica公司）；SK8200Hp型科导超声仪（上海五久自动 Fig 1 Microscopic identification maps of Massa Medi-
化设备有限公司）；ML204T型万分之一、XPE205型十万 cata Fermentata and Galli Gigerii Endothelium
分之一电子分析天平（瑞士Mettler Toledo公司）。 Corneum（×400）
1.2 药品与试剂 2.2 山楂药材的TLC鉴别
十味益脾颗粒（山东步长制药有限公司，批号： 取 3 个批次的十味益脾颗粒，研成粉末，各取 15 g，
190501、181101、180401，规格：每袋装 5 g）；熊果酸对照 分别加入乙酸乙酯 30 mL，超声（功率：500 W，频率：53
品（批号：110742-200517，纯度：100％）、莱菔子对照药 kHz，下同）处理 30 min，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇 1
材（批号：121074-201805，供鉴别使用）、芥子碱硫氰酸 mL使溶解，作为供试品溶液。另取熊果酸对照品，加甲
盐对照品（批号：111702-201605，纯度：98.3％）均购自中 醇溶解稀释制成每1 mL含熊果酸0.2 mg的溶液。取处
国食品药品检定研究院；乙腈（美国 Fisher 公司，色谱 方量的1/10，按照十味益脾颗粒处方工艺制备模拟阳性
纯）；磷酸二氢钾（阿法埃莎天津化学有限公司）；硅胶G 样品和缺山楂药材的阴性样品，再按上述供试品溶液制
薄层板（德国Merck公司、青岛海洋化工厂、烟台化学工 备方法制成模拟阳性样品溶液和阴性样品溶液。按照
业研究所）；甲苯、乙酸乙酯、甲醇、环己烷、甲酸、硫酸、 2015 年版《中国药典》（四部）中 TLC 法 ，吸取上述溶
[18]
乙醇等（国药集团化学试剂上海有限公司）均为分析纯， 液 5～8 μL，分别点于同一硅胶 G 薄层板上，以甲苯-乙
水为超纯水。 酸乙酯-甲酸（20 ∶ 4 ∶ 0.5，V/V/V）为展开剂，展开，取出，晾
2 方法与结果 干，喷洒 10％硫酸乙醇试液，在 105 ℃加热至斑点显色
2.1 六神曲、鸡内金药材的显微鉴别 清晰，分别置于日光和紫外光灯（365 nm）下检视。结
取3个批次的十味益脾颗粒，研成粉末，取少许置于 果，供试品和模拟阳性样品在与熊果酸对照品相应位置
载玻片上，使用水合氯醛进行透化，加稀甘油后装盖玻 处显相同的荧光斑点，且阴性样品无干扰，详见图2。
片，置于显微镜下观察，结果见图1。其中，图1A为六神 2.3 莱菔子药材的TLC鉴别
曲中的种皮栅状细胞，胞腔内含淡红棕色物；图1B为六 取 3 个批次的十味益脾颗粒，研成粉末，各取 10 g，
神曲中的种皮石细胞，数个相连或单个散在，呈类圆形、 分别加甲醇50 mL，超声处理30 min，滤过，滤液蒸干，残
贝壳形、类多角形，纹孔甚密，二者可共同作为炒六神曲 渣加水 20 mL 使溶解，再用水饱和的正丁醇振摇萃取 2
[17]
药材的专属性显微鉴别特征 。图 1C 为鸡内金中不规 次，每次 20 mL，合并正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇 1 mL
则的无色或棕黄色碎块，其沟纹样可以作为鸡内金药材 使溶解，作为供试品溶液。另取莱菔子对照药材1 g，按
的专属性显微鉴别特征 。 上述供试品溶液制备方法制成对照药材溶液。再取芥
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中国药房 2020年第31卷第18期 China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 18 ·2215 ·