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(以生药量计,根据前期预实验结果设计),备用。 2.3 水提物得率测定
2.1.3 分组与给药 取健康小鼠60只,随机分为模型组 精密称取郁金饮片粉末2 g,置于圆底烧瓶中,加水
[12]
(等体积生理盐水)、阳性对照组(阿司匹林0.25 g/kg )、 50 mL,浸泡 1 h,称定质量,加热回流 1 h,冷却后,再次
温郁金水提液组(10 g/kg,相当于人用量的 7.7 倍,以生 称定质量,加水补足减失的质量,滤过,用移液管量取续
药量计,下同)、桂郁金水提液组(10 g/kg)、绿丝郁金水 滤液25 mL,置于已经恒定质量的蒸发皿中,将蒸发皿放
提液组(10 g/kg)、黄丝郁金水提液组(10 g/kg),每组 10 于水浴锅上蒸干,再置于烘箱中烘3 h,放冷,称定质量,
只,雌雄各半。每日灌胃相应药物 1 次,给药体积为 20 计算水提物得率,水提物得率=[(蒸发皿质量+浸出物
mL/kg,连续7 d。 质量)-蒸发皿质量]×2/[郁金质量×(1-水分含量)]×
2.1.4 检测指标 于第 7 天给药后 30 min,各组小鼠腹 100%,结果见表4。
腔注射1%醋酸溶液(20 mL/kg),观察记录第1次扭体反 表4 40批郁金饮片水提物得率的测定结果(%%)
应时间(扭体潜伏期)和15 min内扭体次数。采用SPSS Tab 4 Determination results of water extract yield of
13.0 软件对数据进行统计分析;计量资料均以 x±s 表 40 batches of Curcumae Radix decoction pieces
示,组间比较采用 t 检验。P<0.05 为差异有统计学意 (%%)
义。结果,与模型组比较,阳性对照组和郁金4种基源水 编号 水提物得率 编号 水提物得率 编号 水提物得率 编号 水提物得率
提液组小鼠的扭体潜伏期均显著延长,温郁金水提液组 S1 49.50 S11 72.02 S21 37.18 S31 42.88
S2 52.77 S12 60.72 S22 42.89 S32 43.38
和绿丝郁金水提液组小鼠的扭体次数均显著减少(P<
S3 53.15 S13 58.18 S23 44.07 S33 43.24
0.05 或 P<0.01),说明郁金 4 种基源均具有一定的止痛 S4 40.03 S14 51.01 S24 39.24 S34 47.50
作用,但作用强度有所差异,详见表2。 S5 30.72 S15 62.86 S25 33.62 S35 40.53
S6 34.62 S16 60.69 S26 35.05 S36 44.85
表 2 各组小鼠扭体潜伏期和扭体次数比较(x±±s,n=
S7 45.72 S17 57.40 S27 37.02 S37 40.09
10) S8 45.95 S18 66.47 S28 41.24 S38 47.16
Tab 2 Comparison of writhing latency and writhing S9 51.95 S19 56.08 S29 40.72 S39 41.63
S10 58.57 S20 58.57 S30 35.43 S40 38.66
times of mice in each group(x±±s,n=10)
均值 46.30 均值 60.40 均值 38.65 均值 42.99
组别 剂量,g/kg 扭体潜伏期,s 扭体次数 2.4 水提物中莪术烯醇的含量测定
模型组 173.5±30.9 31.2±15.6
阳性对照组 0.25 276.3±134.3 * 19.3±9.7 2.4.1 色谱条件 色谱柱:Thermo Scientific Syncronis
温郁金水提液组 10. 274.8±40.6 ** 16.0±8.4 * C18 (250 mm×4.6 mm,5 μm),流动相:0.1%磷酸水溶液-
桂郁金水提液组 10. 231.6±35.5 ** 26.2±13.1 乙腈(52 ∶ 48,V/V),流速:1.0 mL/min,柱温:30 ℃,检测
绿丝郁金水提液组 10. 257.7±57.6 ** 18.5±10.0 *
黄丝郁金水提液组 10. 223.1±45.9 * 28.8±18.4 波长:210 nm,进样量:10 μL。
**
*
注:与模型组比较,P<0.05, P<0.01 2.4.2 对照品溶液的制备 精密称取莪术烯醇对照品
*
Note:vs. model group,P<0.05, P<0.01 5.95 mg,置于10 mL量瓶中,加甲醇溶解,定容,摇匀,作
**
2.2 水分含量测定 为对照品贮备液;精密吸取上述对照品贮备液1 mL,置
精密称取郁金饮片适量,粉碎后,过40目筛,取粉末 于 25 mL 量瓶中,加甲醇稀释,定容,摇匀,制成质量浓
各约 2 g,参照 2015 年版《中国药典》(四部)通则“0832” 度为0.023 8 mg/mL的对照品溶液。
[13]
项下第二法(烘干法)进行水分测定 ,结果见表3。 2.4.3 供试品溶液的制备 取郁金4种基源饮片,粉碎,
表3 40批郁金饮片水分含量的测定结果(%%) 取粉末各约1.0 g,精密称定,分别置于100 mL圆底烧瓶
Tab 3 Determination results of moisture contents of 中,加水 25 mL,称定质量后密塞,浸泡 1 h,加热回流 1
40 batches of Curcumae Radix decoction pieces h,冷却后,再次称定质量,加水补足减失的质量,滤过,
(%%) 将药液转移到离心管中,12 000 r/min 离心 10 min,取上
编号 水分 编号 水分 编号 水分 编号 水分 清液,过0.45 µm微孔滤膜,取续滤液,即得。
S1 7.85 S11 7.88 S21 7.66 S31 8.05
S2 7.39 S12 9.88 S22 8.18 S32 8.75 2.4.4 系统适用性考察 精密吸取“2.4.2”“2.4.3”项下
S3 8.80 S13 8.56 S23 8.42 S33 7.68 对照品溶液和郁金4种基源饮片的供试品溶液,并以水
S4 7.57 S14 9.52 S24 9.08 S34 9.49 作为空白对照溶液,按“2.4.1”项下色谱条件进样测定,
S5 8.46 S15 9.33 S25 8.00 S35 8.59
S6 8.60 S16 8.40 S26 8.68 S36 8.71 记录色谱图,详见图1。结果表明,对照品溶液与供试品
S7 8.65 S17 7.95 S27 9.86 S37 8.58 溶液在相同的保留时间有相应的色谱峰,峰形对称,无
S8 8.17 S18 9.78 S28 7.86 S38 10.20 拖尾现象,空白对照溶液不干扰其测定。
S9 8.59 S19 9.45 S29 8.59 S39 8.84
S10 8.42 S20 9.05 S30 8.87 S40 8.37 2.4.5 线性关系考察 精密称取莪术烯醇对照品适量,
均值 8.25 均值 8.98 均值 8.52 均值 8.73 用甲醇溶解稀释制成质量浓度分别为0.000 476、0.004 76、
中国药房 2020年第31卷第18期 China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 18 ·2211 ·