Page 87 - 2020年17期

浙贝母 UPLC-Q-TOF-MS/MS 指纹图谱的建立及其抗炎质量标

志物的分析 Δ

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程 斌 ，周爱珍 ，彭 昕 ，王昕蕾 ，王 娟（1.浙江医药高等专科学校中药学院，浙江 宁波 315000；2.浙江
1＊
大学宁波研究院，浙江 宁波 315000；3.哈尔滨商业大学药学院，哈尔滨 150076）
中图分类号 R284.1；R282 文献标志码 A 文章编号 1001-0408（2020）17-2129-07
DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2020.17.15

摘 要 目的：建立浙贝母超高效液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱（UPLC-Q-TOF-MS/MS）指纹图谱，并确定其抗炎质量标志
物。方法：色谱柱为 Eclipse Plus C18，流动相为甲醇-0.1％甲酸水溶液（梯度洗脱），流速为 0.4 mL/min，柱温为 30 ℃，进样量为 2
µL；采用电喷雾离子源，以正、负离子模式检测，在质荷比（m/z）50～1 200范围内进行扫描。采用《中药色谱指纹图谱相似度评价
系统》（2004A版）建立10批不同产地浙贝母的UPLC-Q-TOF-MS/MS指纹图谱。以小鼠耳肿胀度和血清中丙二醛（MDA）、一氧化
氮（NO）水平为抗炎指标，采用双变量相关分析法和灰色关联度分析法对浙贝母指纹图谱中各共有峰相对峰面积与抗炎指标的相
关性进行分析，筛选质量标志物并进行结构鉴定。结果：在正、负离子模式下，10批浙贝母药材分别各有共有峰26、10个。综合双
变量相关分析和灰色关联度分析结果，共发现与抗炎作用相关的质量标志物9个，经鉴定分别为贝母素乙、贝母素甲、环巴胺、胡
萝卜苷、Polyphyllin Ⅴ、苦鬼臼毒素、植物甾醇、Ent-kaur-15-en-17-ol、Ent-17-norkauran-16-one。结论：所建立的UPLC-Q-TOF-MS/
MS指纹图谱可用于评价浙贝母药材的质量；贝母素乙、贝母素甲、环巴胺等可能是浙贝母具有抗炎作用的质量标志物。
关键词 浙贝母；抗炎作用；超高效液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱；双变量相关分析；灰色关联度分析；质量标志物

Establishment of UPLC-Q-TOF-MS/MS Fingerprint of Fritillaria thunbergii and Analysis of Anti-
inflammatory Quality Markers
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CHENG Bin ，ZHOU Aizhen ，PENG Xin ，WANG Xinlei ，WANG Juan （1. School of TCM， Zhejiang
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Pharmaceutical College，Zhejiang Ningbo 315100，China；2. Ningbo Research Institute of Zhejiang University，
Zhejiang Ningbo 315000，China；3. College of Pharmacy，Harbin University of Commerce，Harbin 150076，
China）
ABSTRACT OBJECTIVE： To establish UPLC-Q-TOF-MS/MS fingerprint of Fritillaria thunbergii， and to define its
anti-inflammatory quality markers. METHODS：The determination was performed on Eclipse Plus C18 column with mobile phase
consisted of methanol-0.1％ formic acid solution（gradient elution）at the flow rate of 0.4 mL/min. The column temperature was set
at 30 ℃，and injection volume was 2 µL. The electrospray ion source was used to scan in the range of m/z 50-1 200 with positive
and negative ion detection mode. UPLC-Q-TOF-MS/MS fingerprints of 10 batches of F. thunbergii from different habitats were
established by using the Similarity Evaluation System of TCM Chromatographic Fingerprints（2004A edition）. With ear swelling
degree，the serum levels of MDA and NO as anti-inflammatory indexes，the correlation between the relative area of common peaks
in fingerprint and the anti-inflammatory indexes was analyzed by using bivariate correlation analysis and grey correlation analysis，
and the quality markers were screened and identified. RESULTS：In positive and negative ion mode，10 batches of F. thunbergii
had 26 peaks and 10 peaks. Based on bivariate correlation analysis and grey correlation analysis，nine quality markers related to
anti-inflammatory effect were found，which were identified as peiminine，peimine，cyclobalamine，daucidin，polyphyllin Ⅴ ，
bitumen podophyllotoxin，phytosterol，ent-kaur-15-en-17-ol，ent-17-norkauran-16-one. CONCLUSIONS：Established UPLC-Q-
TOF-MS/MS fingerprint can be used to evaluate the quality of F. thunbergii；peiminine，peimine and cyclobalamine and so on may
be the quality markers of anti-inflammatory effect of F. thunbergii.
KEYWORDS Fritillaria thunbergii；Anti-inflammatory effect； UPLC-Q-TOF-MS/MS； Bivariate correlation analysis； Grey
correlation analysis；Quality markers
Δ 基金项目：浙江省基础公益研究计划项目（No.LGN19H280002）；
浙江省食品药品监督管理局2018年度科技计划项目（No.2018018）；宁 浙贝母是百合科植物浙贝母（Fritillaria thunbergii
波市科技创新2025重大专项（No.2019B10008）
Miq.）的干燥鳞茎，具有清热、化痰、止咳、解毒、散结、消
＊副教授，博士。研究方向：中药质量标准及药效物质。电话：
痈等功效，主治风热犯肺、痰火咳嗽、肺痈、乳痈、瘰疬和
0574-88222783。E-mail：44418972@qq.com
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疮毒等症 。近年来研究表明，浙贝母的化痰、止咳、松
# 通信作者：副教授，博士。研究方向：中药炮制及质量分析。电
话：0574-88830928 。E-mail：79200929@qq.com 弛气管平滑肌、抗炎等作用是其治疗呼吸系统疾病的药
中国药房 2020年第31卷第17期 China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 17 ·2129 ·