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small amount of yellow secretion in the nasal cavity，and serious depilation；the nasal sinus mucosa was seriously damaged，cilia
was exfoliated，and the gland in the submucosa was hyperplasia，lymphocyte infiltration was also found；the relative mRNA
expression of IFN-γ，B7-H1 and PD-1 were significantly increased compared with normal group（P＜0.01）. Compared with model
group，the nasal symptoms，general condition and pathological changes of the nasal sinuses in each administration group were
improved in varying degrees；the relative mRNA expression of IFN-γ and B7-H1 in chemical medicine control group，BYS
medium-dose and high-dose groups，as well as the relative mRNA expression of PD-1 in administration groups were decreased
significantly；above indexes of BYS medium-dose and high-dose groups were significantly lower than BYS low-dose group，while
relative mRNA expression of IFN-γ in BYS high-dose group were significantly higher than BYS medium-dose group. The relative
mRNA expression of IFN-γ in BYS low-dose and medium-dose groups，the relative mRNA expression of B7-H1 in BYS low-dose
group，the relative mRNA expression of PD-1 in BYS groups were significantly higher than chemical medicine control group；
mRNA expression of IFN-γ in BYS high-dose group was significantly higher than chemical medicine control group（P＜0.05 or P＜
0.01）. Above indexes of BYS medium-dose group were similar to those of chemical medicine control group （P＞0.05）.
CONCLUSIONS：BYS oral solution can improve chronic inflammation in nasal sinus mucosa of mice，the mechanism of which
may be associated with intervening mRNA overexpression of B7-H1/PD-1 by inhibiting mRNA expression of IFN-γ.
KEYWORDS Biyuanshu oral solution；Chronic rhinosinusitis；IFN-γ；B7-H1；PD-1；Immune checkpoint；Mice；Mechanism

慢性鼻-鼻窦炎（Chronic rhinosinusitis，CRS）是由环 号：562002，规格：0.125 g]；水合氯醛（成都科龙化工试
境因素、微生物感染、变态反应等多因素所导致的鼻腔 剂厂，批号：20120611）；TRIzol试剂（美国Thermo Fisher
和鼻窦黏膜慢性持续性炎症。目前，CRS的治疗措施虽 Scientific 公司，批号：15596026）；实时荧光定量 PCR 试
有较大改进，但复发率仍较高，严重影响了患者的生活 剂盒（含 TB GreenPremix Ex TaqⅡ等试剂，日本 Takara
[1]
质量 。因此，研究 CRS 发病机制和相关药物作用机制 公司，批号：RR086B）；PCR 扩增引物由生工生物工程
成为鼻科领域的热点方向之一 。临床研究显示，鼻渊舒 （上海）股份有限公司设计、合成（序列见表 1）；苏木精-
[1]
口服液治疗 CRS 的效果较好，但相关机制尚不完全清 伊红（HE）染色试剂盒（上海碧云天生物技术有限公司，
楚 [2-3] 。有研究发现，Th1 细胞因子γ干扰素（IFN-γ）参与 批号：C0105）；氯化钠注射液（四川科伦药业股份有限公
了 CRS 鼻-鼻窦黏膜炎症细胞活化及炎症损伤过程 [4-6] ， 司，批号：H12111906，规格：500 mL ∶ 4.5 g，作生理盐水
且该因子参与调控的协同刺激分子B7同源物l（B7-H1） 用）；绵羊血清（郑州九龙生物制品有限公司）；Luria
是机体防止免疫应答过度致炎症损伤扩大的免疫检查 Broth 液体培养基（青岛高科园海博生物技术有限公
[7]
点的关键分子 。程序性死亡因子 1（PD-1）是 B7-H1 的 司）；其余试剂均为分析纯或实验室常用规格，水为蒸
受体，两者结合后可进一步抑制活化的 T 淋巴细胞，延 馏水。
迟 T 细胞免疫应答，在 CRS 的发生过程中有重要作 表1 PCR引物序列
[8]
用 。基于此，本研究从 IFN-γ及其调控的 B7-H1/PD-1 Tab 1 PCR primer sequence
免疫检查点出发，初步探讨了鼻渊舒口服液对CRS模型 基因 序列 产物长度，bp
小鼠上述因子mRNA表达的影响，为该药治疗CRS的免 IFN-γ 正向：5′-GAGTATTGCCAAGTTTGAGGT-3′ 123
反向：5′-CAGCGACTCCTTTTCCGCT-3′
疫调节机制及其临床应用提供实验依据。
B7-H1 正向：5′-CTGAAAGTCAATGCCCCAT-3′ 129
1 材料 反向：5′-TGGTCACTGTTTGTCCAGAT-3′
1.1 仪器 PD-1 正向：5′-GGATGCCCGCTTCCAGAT-3′ 96
反向：5′-CAGAGGTAGATGCCACTGT-3′
BA310型病理显微图像分析系统[麦克奥迪（厦门） β-actin 正向：5′-GAAGATCAAGATCATTGCTCCT-3′ 111
医疗诊断系统有限公司]；NanoDrop ND-2000 型超微量 反向：5′-TACTCCTGCTTGCTGATCCACA-3′
分光光度计、Micro 17R 型冷冻离心机（美国 Thermo 1.3 动物
Fisher Scientific 公司）；FTC 3000 型实时荧光定量聚合 SPF级雄性C57小鼠140只，6～8周龄，体质量18～
酶链式反应（PCR）仪（加拿大 Funglyn Biotech 公司）； 22 g，由四川大学实验动物中心提供，生产许可证号：
RM2265 型 切 片 机（ 德 国 Leica 公 司 ）；SAESHIN SCXK（川）2018-026。所有小鼠均饲养于成都中医药大
207A-107型牙科打磨机（东莞耐信五金有限公司）。 学 SPF 级实验动物研究室内。本研究动物实验方案遵
[9]
1.2 药品与试剂 循《关于善待实验动物的指导性意见》的相关要求 。
鼻渊舒口服液（成都泰合健康科技集团股份有限公 1.4 细菌
司华神制药厂，批号：20121010，规格：每支装10 mL）；克 肺炎链球菌（ATCC 49619）由上海川翔生物科技有
拉霉素片[阳性对照，重庆科瑞制药（集团）有限公司，批 限公司提供。

中国药房 2020年第31卷第17期 China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 17 ·2077 ·