Page 39 - 2020年17期

异虎耳草素对 PCPA 致松果体损伤模型大鼠的改善作用及生物

钟基因表达的影响 Δ

＊
王丹妮 ，杨 钤，仲启明，宋美卿，仝立国，贾力莉，牛艳艳，冯玛莉（山西省中医药研究院，太原 030012）
#
中图分类号 R285 文献标志码 A 文章编号 1001-0408（2020）17-2081-06
DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2020.17.07

摘 要 目的：研究异虎耳草素对对氯苯丙氨酸（PCPA）致松果体损伤模型大鼠的改善作用及其对生物钟基因表达的影响。方
法：将60只大鼠随机分为空白对照组（2％聚山梨酯80溶液）、模型对照组（2％聚山梨酯80溶液）、阳性对照组（褪黑素，10 mg/kg）
和异虎耳草素高、中、低剂量组（3、1.5、0.75 mg/kg），每组 10 只。除空白对照组外，其余各组大鼠均采用腹腔注射 PCPA（450
mg/kg）的方法构建松果体损伤模型。造模结束后，各组大鼠灌胃给药，每天1次，连续7 d。在给药第6天，通过戊巴比妥钠协同睡
眠实验考察各组大鼠的入睡潜伏期和睡眠持续时间；末次给药后，采用酶联免疫吸附法测定大鼠血清中褪黑素水平，分别在荧光
显微镜和电子显微镜下观察大鼠松果体组织的病理变化和细胞超微结构改变，并采用实时荧光定量-聚合酶链式反应法测定大鼠
松果体中生物钟基因Clock、Bmal1、Per1、Per2、Per3、Cry1、Cry2 mRNA表达水平。结果：与空白对照组比较，模型对照组大鼠的
入睡潜伏期显著延长（P＜0.05）；血清中褪黑素水平和松果体中Bmal1、Per1 mRNA表达水平显著降低（P＜0.05或P＜0.01），Per3
mRNA表达水平显著升高（P＜0.05）；松果体细胞排列紊乱、核固缩，空泡变性明显增多，数目明显减少，线粒体多见肿胀、嵴断裂、
固缩。与模型对照组比较，异虎耳草素高剂量组大鼠的入睡潜伏期显著缩短（P＜0.05）、睡眠持续时间显著延长（P＜0.05），血清
中褪黑素水平和松果体中Clock、Bmal1、Per1、Cry1、Cry2 mRNA表达水平显著升高（P＜0.05或P＜0.01）；异虎耳草素中剂量组大
鼠的入睡潜伏期显著缩短（P＜0.05），血清中褪黑素水平和松果体中 Clock、Bmal1、Per1、Cry1、Cry2 mRNA 表达水平显著升高
（P＜0.05或P＜0.01），Per3 mRNA表达水平显著降低（P＜0.05）；异虎耳草素低剂量组大鼠Clock、Bmal1、Per2、Cry2 mRNA表达
水平显著升高（P＜0.05），Per3 mRNA表达水平显著降低（P＜0.05）；异虎耳草素各剂量组大鼠松果体细胞排列紊乱均有一定程度
改善、核固缩空泡变性减少，线粒体肿胀、嵴断裂、固缩均有一定程度减少。结论：异虎耳草素对PCPA致大鼠松果体损伤具有一
定的改善作用；其可上调松果体正向调节因子 Clock、Bmal1 和负向调节因子 Per1、Per2、Cry1、Cry2 的表达，下调负向调节因子
Per3的表达。
关键词 异虎耳草素；松果体；生物钟基因；大鼠

B7-H1 influences the accumulation of virus-specific tis- et al. The relationship between B7 homologous 1 with in-
sue resident memory T cells in the central nervous sys- terleukin-4，interleukin-17 and interferon gamma in pa-
tem[J]. Front Immunol，2017. DOI：10.3389/fimmu. 2017. tients with allergic rhinitis[J]. Expert Rev Clin Immunol，
01532. 2019，15（8）：897-901.
[20] JUN W，RUIRONG Y，WENRU S，et al. PD-1，PD-L1 [24] LI N，WANG J，ZHANG N，et al. Cross-talk between
（B7-H1）and tumor-site immune modulation therapy：the TNF-α and IFN-γ signaling in induction of B7-H1 expres-
historical perspective[J]. J Hematol Oncol，2017. DOI：10. sion in hepatocellular carcinoma cells[J]. Cancer Immunol
1186/s13045-017-0403-5.
Immunother，2018，67（2）：271-283.
[21] OTT PA，HODI FS. The B7-H1/PD-1 pathway in cancers
[25] QIAN J，WANG C，WANG B，et al. The IFN-γ/PD-L1
associated with infections and inflammation：opportunities
axis between T cells and tumor microenvironment：hints
for therapeutic intervention[J]. Chin Clin Oncol，2013. for glioma anti-PD-1/PD-L1 therapy[J]. J Neuroinflamma-
DOI：10.3978/j.issn.2304-3865.2012.11.05.
tion，2018. DOI：10.1186/s12974-018-1330-2.
[22] 昭日格图，张梅华，贺艳霞，等.口腔扁平苔藓外周血T细
[26] LUCAS ED，FINLON JM，BURCHILL MA，et al. Type 1
胞 B7-H1/PD-1 信号的表达及其作用[J].中国临床研究，
IFN and PD-L1 coordinate lymphatic endothelial cell ex-
2017，30（11）：1479-1480.
pansion and contraction during an inflammatory immune
[23] KALMARZI RN，FAKHIMI R，MANOUCHEHRI F，
response[J]. J Immunol，2018，201（6）：1735-1747.
Δ 基金项目：国家自然科学基金资助项目（No.81173574）；山西省
[27] CHEN L，FLIES DB. Molecular mechanisms of T cell co-
自然科学基金资助项目（No.201901D111427）
stimulation and co-inhibition[J]. Nat Rev Immunol，2013，
＊硕士研究生。研究方向：中药药理。E-mail：wdn0125@163.
13（4）：227-242.
com
# 通信作者：主任医师，硕士生导师，硕士。研究方向：中药药 （收稿日期：2020-02-05 修回日期：2020-06-05）
理。E-mail：fengmali1@163.com （编辑：张元媛）

中国药房 2020年第31卷第17期 China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 17 ·2081 ·