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to DPAI in Xinjiang Uygur patients with ACS [OR＝2.314，95％CI（1.569，3.144），P＝0.009]，while age，gender，smoking and
other non-gene factors were not related to DPAI（P＞0.05）. CONCLUSIONS：CYP2C19 gene polymorphism is associated with
antiplatelet reactivity of clopidogrel in Xinjiang Uygur patients with ACS. *2 wild type patients may have higher DPAI，while *17
wild type patients may have lower DPAI.
KEYWORDS Clopidogrel；CYP2C19；Gene polymorphism；Platelet aggregation inhibition rate；Acute coronary syndrome；
Uygur nationality

急性冠脉综合征（Acute coronary syndrome，ACS） 90例为研究对象。
是一种临床上常见的严重的心血管疾病。在西方国家， 1.2 治疗方法与疗效判定
由ACS造成的死亡人数高达总死亡人数的1/3；在我国， 本研究方案经医院医学伦理委员会审核批准，所有
ACS的发病率和病死率呈逐年上升的趋势，已成为严重 受试者均知情同意并签署知情同意书。入院后，所有患
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危害人类健康的流行病之一 。目前，阿司匹林联合氯 者均接受标准的双联抗血小板药物治疗：第1日口服负
吡格雷进行抗血小板治疗是经皮冠状动脉介入术 ACS 荷剂量阿司匹林肠溶片（意大利 Bayer S.p.A.公司，注册
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患者预防术后缺血事件再次发生的经典治疗方案 。然 证号：H20130078，规格：100 mg）300 mg，qd+硫酸氢氯
而由于个体差异，部分患者会出现氯吡格雷抵抗（Clopi- 吡格雷片[深圳信立泰药业股份有限公司，批准文号：国
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dogrel resistance，CR），即疗效不佳 。氯吡格雷是一种 药准字 H20000542，规格：25 mg（以 C16H16ClNO2S 计）]
前体药物，需要经肝脏中的细胞色素 P450酶（CYP）代谢 300 mg，qd；第2日起口服维持剂量阿司匹林肠溶片100
生成活性产物才能发挥药效。有证据表明，CYP同工酶 mg，qd+硫酸氢氯吡格雷片 75 mg，qd，并予出院后持续
亚型CYP2C19编码基因的突变与氯吡格雷疗效差异密 服用1年。
切相关 。针对不同人种的研究发现，该基因*2、*3突变 于治疗第 5 日患者晨起给药前，空腹抽取其外周静
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会降低 CYP2C19 酶的活性，导致氯吡格雷不能被有效 脉血 2 mL，置于含乙二胺四乙酸（EDTA）的采血管中，
激活，从而降低药物的治疗效果；而*17 突变则会增加 于－80 ℃冻存，用于基因型检测。另同法抽取患者静脉
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CYP2C19酶的表达，更有利于药物疗效的发挥 。 血 3 mL，置于含 3.13％枸橼酸钠的采血管中，使用
我国已经开展了有关汉族 ACS 患者氯吡格雷疗效 CFMS LEPU-8800 型血栓弹力图仪[乐普（北京）医疗器
与CYP2C19基因多态性的相关性研究，且初步证实在氯 械股份有限公司]检测血小板聚集抑制率（DPAI），该检
吡格雷疗效不佳的汉族患者中，CYP2C19*1/*2 型的分 测须在采血后2 h内完成，并将最大DPAI＜20％定义为
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布频率较高 。宋博凡 研究了新疆维吾尔族人群 CR 。
CYP2C19*2 基因多态性的分布情况，发现该类人群中 1.3 基因型检测
CYP2C19*2 各型分布频率与我国汉族人群以及欧洲人 取“1.2”项下冻存的外周静脉血样品，采用核酸提取
群均有明显差异；另外，李振 对我国南疆地区维吾尔族 试剂盒（磁珠法）（深圳联合医学科技有限公司）提取
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人群CYP2C19基因型分布情况进行了研究，发现该类人 DNA，采用聚合酶链反应（PCR）-荧光探针法检测患者
群 CYP2C19 慢代谢型（*2/*2、*3/*3、*2/*3）的分布频率 CYP2C19*2（rs4244285）、CYP2C19*3（rs4986893）分型，
为4.17％，明显低于汉族人群的13.64％。但新疆维吾尔 利用PCR-直接测序法检测CYP2C19*17（rs12248560）分
族ACS患者CYP2C19基因多态性与氯吡格雷抗血小板 型。PCR 扩增于 ABI 7500 型荧光 PCR 仪（美国 Applied
反应性是否存在关联尚不清楚。为此，本研究拟初步评 Biosystems公司）上完成，引物由英潍捷基（上海）贸易有
价新疆维吾尔族ACS患者CYP2C19基因多态性与氯吡 限公司设计、合成（序列见表1，其中F、R分别为上、下游
格雷抗血小板反应性的相关性，以期为该药的临床个体 引物，P1、P2分别为野生型、突变型匹配探针）。（1）PCR-
化应用提供参考。 荧光探针法。PCR 反应体系（共 40 μL）：DNA 模板 5.0
1 资料与方法 μL，上、下游引物各 0.8 μL，10×Ex Taq Buffer 4.0 μL，
1.1 研究对象 dNTP Mixture 4.0 μL，野生型匹配探针0.4 μL，突变型匹
纳入标准：符合 2014 年美国心脏协会（AHA）与心 配探针 0.4 μL，Takara Ex Taq 酶 0.5 μL，灭菌 ddH2O 24.1
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脏病学学会（ACC）联合发布的 ACS 诊断标准 ，主要包 μL。反应条件：95 ℃预变性3 min，95 ℃变性15 s，适宜
括非 ST 段抬高型心肌梗死等；入选前均未服用过氯吡 温度下（CYP2C19*2为60 ℃，CYP2C19*3为62 ℃）退火
格雷或噻氯匹定，亦未使用过肝素；年龄＞18岁，性别不 45 s，共 40 个循环。分型鉴定：根据样品在相应检测通
限；维吾尔族。排除标准：具双联抗血小板治疗禁忌证 道内达到特定阈值的循环数（Ct）是否为40～45来判断*2
及器械过敏者；服用非甾体或甾体抗炎药者；出血体质 或者*3 的分型。（2）直接测序法。PCR 反应体系（共 40
者；近1个月内存在大手术史和深部穿刺介入史者；妊娠 μL）：DNA 产物 5.0 μL，上、下游引物各 1.2 μL，10×Ex
期或哺乳期妇女。本研究共选取2018年1月－2019年1 Taq Buffer 4.0 μL，dNTP Mixture 4.0 μL，Takara Ex Taq
月喀什地区第二人民医院心血管内科收治的 ACS 患者 酶 0.5 μL，灭菌 ddH2O 24.1 μL。反应条件：95 ℃预变性

·1888 · China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 15 中国药房 2020年第31卷第15期