Page 59 - 202014

2.4 标准曲线绘制
取“2.2.2”项下单一对照品贮备液 0.1、0.5、1.0、5.0、
10.0 mL，分别置于100 mL量瓶中，用混合溶剂稀释至刻
度，摇匀，制成相应质量浓度的系列对照品溶液，按“2.1”
项下色谱条件进样测定，记录峰面积。以待测成分质量
浓度（x，μg/mL）为横坐标、峰面积（y）为纵坐标进行线性
回归，得回归方程与线性范围，详见表1。
表1 5种成分的回归方程与线性范围
Tab 1 Regression equation and linear range of 5 com-
ponents
待测成分 回归方程 r 线性范围，μg/mL
7-羟基香豆素 y＝141 180x+22 400 0.999 9 1.875～187.5
6，7-二甲氧基香豆素 y＝118 500x+40 734 0.999 9 1.075～107.5
5，7-二甲氧基香豆素 y＝145 070x+93 889 0.999 9 1.261～126.1
欧前胡素 y＝98 969x+50 722 0.999 9 0.875～87.5
佛手柑内酯 y＝50 654x+60 556 0.999 8 2.033～203.3
2.5 精密度试验
精密量取“2.2.2”项下混合对照品溶液，按“2.1”项下
色谱条件连续进样测定6次，记录峰面积。结果，7-羟基
香豆素、6，7-二甲氧基香豆素、5，7-二甲氧基香豆素、欧
前胡素和佛手柑内酯等 5 种成分峰面积的 RSD 分别为
0.93％、1.17％、1.04％、0.88％、0.75％（n＝6），表明仪器
精密度良好。
2.6 稳定性试验
取“2.2.1”项下供试品溶液（批号：18032500）适量，
分别在室温下放置0、4、8、12、24 h时按“2.1”项下色谱条
件进样测定，记录峰面积。结果，7-羟基香豆素、6，7-二
甲氧基香豆素、5，7-二甲氧基香豆素、欧前胡素和佛手
柑内酯等5种成分峰面积的RSD分别为0.77％、1.24％、
0.62％、1.43％、1.05％（n＝5），表明供试品溶液在室温下
放置24 h内稳定性良好。
2.7 重复性试验
取同一批舒肝和胃丸（批号：18032500）适量，共 6
份，按“2.2.1”项下方法制备供试品溶液，再按“2.1”项下
色谱条件进样测定，记录峰面积并按标准曲线法计算含
量。结果，7-羟基香豆素、6，7-二甲氧基香豆素、5，7-二
甲氧基香豆素、欧前胡素和佛手柑内酯等5种成分含量
的 RSD 分别为 1.42％、1.31％、1.27％、1.12％、1.05％
（n＝6），表明方法重复性良好。
2.8 加样回收率试验
精密称取已知含量的舒肝和胃丸（批号：18032500）
1.0 g，共 6 份，置于圆底烧瓶中，分别精密加入 5 种待测
成分单一对照品贮备液240 μL，按“2.2.1”项下方法制备
供试品溶液，再按“2.1”项下色谱条件进样测定，记录峰
面积并计算加样回收率，结果见表2。
中国药房 2020年第31卷第14期
表2 加样回收率试验结果（n＝6）
Tab 2 Results of recovery tests（n＝6）
取样量， 已知量， 加入量， 测得量， 加样回收率， 平均加样回收率， RSD，
待测成分
g mg mg mg ％ ％ ％
7-羟基香豆素 1.021 6 0.422 9 0.450 0 0.865 9 98.44 96.52 1.27
1.050 7 0.435 0 0.450 0 0.863 3 95.18
1.006 2 0.416 6 0.450 0 0.846 2 95.47
1.085 3 0.449 3 0.450 0 0.886 7 97.20
1.024 4 0.424 1 0.450 0 0.855 2 95.80
1.073 1 0.444 3 0.450 0 0.880 9 97.02
6，7-二甲氧基香豆素 1.021 6 0.269 7 0.258 0 0.515 7 95.35 96.57 1.16
1.050 7 0.277 4 0.258 0 0.526 2 96.43
1.006 2 0.265 6 0.258 0 0.518 8 98.14
1.085 3 0.286 5 0.258 0 0.536 0 96.71
1.024 4 0.270 4 0.258 0 0.521 7 97.40
1.073 1 0.283 3 0.258 0 0.529 4 95.39
5，7-二甲氧基香豆素 1.021 6 0.294 2 0.302 6 0.583 8 95.70 95.75 0.83
1.050 7 0.302 6 0.302 6 0.591 9 95.60
1.006 2 0.289 8 0.302 6 0.584 3 97.32
1.085 3 0.312 6 0.302 6 0.601 2 95.37
1.024 4 0.295 0 0.302 6 0.583 1 95.21
1.073 1 0.309 1 0.302 6 0.597 5 95.31
欧前胡素 1.021 6 0.199 2 0.210 0 0.403 2 97.14 96.37 0.76
1.050 7 0.204 9 0.210 0 0.408 1 96.76
1.006 2 0.196 2 0.210 0 0.400 1 97.10
1.085 3 0.211 6 0.210 0 0.412 5 95.67
1.024 4 0.199 8 0.210 0 0.400 2 95.43
1.073 1 0.209 3 0.210 0 0.411 2 96.14
佛手柑内酯 1.021 6 0.486 3 0.487 9 0.956 0 96.27 96.61 1.35
1.050 7 0.500 1 0.487 9 0.971 8 96.68
1.006 2 0.479 0 0.487 9 0.953 5 97.25
1.085 3 0.516 6 0.487 9 0.998 4 98.75
1.024 4 0.487 6 0.487 9 0.951 7 95.12
1.073 1 0.510 8 0.487 9 0.977 1 95.57
2.9 耐用性试验
取同一批舒肝和胃丸（批号：18032500）适量，共 3
份，按“2.2.1”项下方法制备供试品溶液，在“2.1”项色谱
条件下，分别以不同仪器（Agilent 1200 型和 Shimadzu
LC20A 型 HPLC 仪）、色谱柱[Capcell pak C18 （250 mm×
4.6 mm，5 μm）和Venusil MP C 18 （250 mm×4.6 mm，5 μm）]、
检测波长（268、270、272 nm）、柱温（25、30、40℃）和流速
（0.95、1.00、1.05 mL/min）进样测定，记录峰面积并按标
准曲线法计算含量。结果，改变上述色谱条件后，5种成
分的色谱峰分离度良好，含量的 RSD 均不大于 1.5％
（n＝6或n＝9），表明本方法的耐用性良好。
2.10 含量测定
取舒肝和胃丸 3 批，按“2.2.1”项下方法制备供试品
溶液，再按“2.1”项下色谱条件进样测定，每批样品平行
测定2次，记录峰面积并按标准曲线法计算含量。结果，
3批舒肝和胃丸中，7-羟基香豆素、6，7-二甲氧基香豆素、
5，7-二甲氧基香豆素、欧前胡素、佛手柑内酯的平均含
量分别为 0.424、0.239、0.305、0.180、0.459 mg/g（n＝2），
详见表3。
China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 14 ·1717 ·