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排序为 A＞C＞B，即甲醇体积分数＞料液比＞提取时                          菜碱的含量。结果，上述提取时间的提取液中甜菜碱含
        间。由表4方差分析结果可知，甲醇体积分数对甜菜碱                           量均低于2.00％，均较超声提取法和加热回流提取法的
        含量有显著影响（P＜0.05），提取时间和料液比对甜菜                        含量低，故未将该法列入单因素试验。
        碱含量无显著影响（P＞0.05）。综合考虑极差分析和方                            综上所述，本研究建立了甜菜碱含量测定的 HPLC
        差分析结果，确定最优提取条件为 A1B2C2，即以料液比                       法，并通过单因素试验和正交试验筛选了枸杞子中甜菜
        1∶30投料，甲醇超声提取45 min。                               碱的最佳提取方法，通过比较本研究所建HPLC法测定
            精密称取枸杞子（批号：NKY01）1.0 g，共3份，按上                  结果与《中国药典》薄层色谱法测定结果的差异，发现几
        述最优提取条件超声提取甜菜碱，按“2.1”项下方法进样                        乎无明显差异。由此表明，本研究成功建立了枸杞子中
        测定，记录峰面积并按外标法计算提取液中甜菜碱含                            甜菜碱的定量分析方法和提取方法，可为枸杞子中甜菜
        量。结果，甜菜碱平均含量为2.30％（RSD＝0.43％，n＝                    碱的含量测定提供方法支持。
        3），表明此提取方法可行。                                      参考文献
        2.3 含量测定方法比较                                       [ 1 ]  国家药典委员会.中华人民共和国药典：一部[S].2015年
                                                                版.北京：中国医药科技出版社，2015：249.
            分别取 10 批枸杞子样品各 1 g，按“2.2.2”项下最优
                                                           [ 2 ]  LIND B，JIANG Y，WARK L，et al. Dietary wolfberry in-
        提取方法提取，按“2.1.2”项下方法制备供试品溶液，再
                                                                creases hepatic insulin sensitivity in obese mice[J]. FASEB
        按“2.1.3”项下色谱条件进样测定，记录峰面积并按外标
                                                                J，2012，6（3）：828-837．
        法计算甜菜碱含量；同时，按照2015年版《中国药典》（一                       [ 3 ]  CHU PHW，LI HY，CHIN MP，et al. Effect of lyciumbar-
                             [1]
        部）中收录的薄层色谱法 测定供试品溶液中甜菜碱含                                barum（Wolfberry）polysaccharides on preserving retinal
        量，结果见表5。由表5可见，两种方法测定结果的相对                               function after partial optic nerve transaction[J]. PLoS
        误差为－1.92％～2.79％，表明两种方法测定结果几乎                            One，2013. DOI：10.1371/journal.pone.0081339.
        无明显差异。                                             [ 4 ]  武改梅，贾跃胜，袁世宏.枸杞抗癌的免疫药理研究进
                   表5 含量测定结果比较（％％）                              展[J].中国药房，2002，13（1）：54-55.
        Tab 5 Comparison of content determination results（％％）  [ 5 ]  史蓉，李婷婷，周丽，等.甘肃枸杞功能性物质及其功效研
                                                                究综述[J].甘肃农业科技，2019（9）：81-86.
        批号           HPLC法          薄层色谱法        相对误差
        NKY01         2.30            2.29        －0.44    [ 6 ]  李炳龙，齐永秀，马向忠，等.甜菜碱药物分析进展[J].泰
        NKY02         2.17            2.15         0.93         山医学院学报，2008，29（3）：238-240.
        NKY03         2.52            2.50         0.80    [ 7 ]  张宇金，高世勇，何立巍，甜菜碱的生物活性研究[J].哈
        NKY04         1.96            1.98        －1.01         尔滨商业大学学报（自然科学版），2006，22（1）：13-16.
        NKY05         2.18            2.16         0.93    [ 8 ]  贺天雨，乐胜锋，杜宁，等.液相色谱法在枸杞甜菜碱含量
        NKY06         1.95            1.97        －1.02         测定中的应用[J].食品安全质量检测学报，2019，10
        NKY07         2.55            2.60        －1.92
        NKY08         2.21            2.15         2.79         （11）：3444-3451.
        NKY09         1.91            1.88         1.60    [ 9 ]  谢忱，徐丽珍，李宪铭，等.枸杞子化学成分研究[J].中国
        NKY10         2.01            2.02        －0.50         中药杂志，2001，26（5）：323-324.
        3 讨论                                               [10]  张怡，张宗山，王芳，等.高效液相色谱法测定阿维菌素在
        3.1  色谱条件的选择                                            枸杞果实中的残留动态[J].西北农业科技大学学报（自
                                                                然科学版），2006，34（12）：181-184.
            由于枸杞子中成分具有多样性，将目标成分与其他
                                                           [11]  翟雪蓓，武晓媛，徐晓阳，等.高效液相色谱测定中药夏枯
        成分有效分离是进行定量分析的关键。本课题组前期
                                                                草活性成分含量[J].世界最新医学信息文摘，2019，19
        考 察 了 不 同 色 谱 柱 [Agilent Zorbax NH2 色 谱 柱（150
                                                                （69）：118.
        mm×4.6 mm，5 μm）、Agilent Zorbax 300-SCXA 色谱柱        [12]  鄢玉芬，徐双美，梁乙川，等. HPLC法测定不同贮藏条件
       （250 mm×4.6 mm，5 μm）、Waters Spherisorb NH2色谱柱            下川芎中 10 种化学成分的含量[J].中国药房，2019，30

       （250 mm×4.6 mm，5 μm）]、不同流动相比例（60 ∶ 40、70 ∶               （6）：807-812.
        30、75∶25、80∶20，V/V）对甜菜碱分离的影响。结果，Wa-                [13]  卢艳婷.枸杞中甜菜碱的含量测定[J].食品安全导刊，
        ters Spherisorb NH2柱中甜菜碱色谱峰与其他成分色谱                      2018（18）：49-50.
        峰的分离效果优于其他色谱柱，且当乙腈-0.01mol/L 磷                     [14]  梁景辉，贾芙蓉，时璐，李攀龙.HPLC-ELSD 测定枸杞子
        酸二氢钾水溶液的比例为75∶25（V/V）时，色谱峰之间分                           中甜菜碱的含量[J].中国处方药，2016，14（2）：32-33.
                                                           [15]  谷大建，李旭. SPE-HPLC 法测定枸杞中甜菜碱的含
        离效果较好。
                                                                量[J].齐鲁药事，2007，4（12）：213-214.
        3.2  浸润提取法的考察
                                                           [16]  张自萍，郭荣，廖国玲，等.枸杞甜菜碱含量测定方法的比
            本研究在前期筛选提取方法时，还考察了浸润提取                              较研究[J].西北农业学报，2007，16（6）：292-295.
        法的提取效果，分别测定了浸润 20、25、30、35、40、45、                               （收稿日期：2020-03-20   修回日期：2020-06-04）
        50、55 min 时同一批枸杞子（批号：NKY01）提取液中甜                                                        （编辑：邹丽娟）


        中国药房    2020年第31卷第14期                                            China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 14  ·1703  ·
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